人脐带沃顿胶间充质干细胞对重型再生障碍性贫血调节性T细胞及Foxp3基因的影响

目的研究脐带沃顿胶间充质干细胞(WJCs)对重型再生障碍性贫血(SAA)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞及Foxp3基因表达水平的影响,探讨WJCs对SAA患者T淋巴细胞(TLCs)免疫调节作用的可能机制。方法从人脐带中分离培养WJCs,通过流式细胞术检测其表面标记并进行鉴定;采用密度梯度离心法从SAA患者外周血中分离TLCs;在植物凝集素(PHA)刺激下,将SAA患者TLCs(1×105个)进行体外培养,实验组加入不同数量级WJCs(1×103、1×104、1×105个)共培养,3 d后采用MTT法检测淋巴细胞抑制率;流式细胞仪检测实验组及正常对照组SAA患者TLCs中CD4+CD25+T细胞比例的变化,RT-PCR方法检测Foxp3基因mRNA水平的变化。结果 WJCs能明显抑制SAA患者TLCs增殖,且抑制作用与WJCs呈剂量依赖性;实验组CD4+CD25+T细胞比例以及Foxp3基因表达水平均比对照组明显增加,且与TLCs增殖水平呈负相关。结论 WJCs对SAA患者TLCs的抑制作用呈剂量依赖性,通过上调Foxp3的表达而发挥CD4+CD25+调节性T细胞的免疫调节作用可能是其机制之一。     

PDCD4、TGF-β1在急性髓系白血病患者骨髓中的表达及意义

目的探讨程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)与转化生长因子β1(TGF-β1)在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达及其相关关系。方法采用RT-PCR、ELISA和Western blotting三种方法分别从基因水平和蛋白水平检测30例初诊急性髓系白血病患者(AML组),30例急性髓系白血病完全缓解患者(AML-CR组),20例缺铁性贫血患者(对照组)骨髓单个核细胞中PDCD4、TGF-β1的表达情况,并分析相互间的相关性。结果 PDCD4、TGF-β1的RT-PCR结果均显示,AML组mRNA的表达量明显低于对照组(P<0.05),AML-CR组表达量虽明显高于AML组,但差异没有统计学意义(P>0.05)。ELISA结果显示,AML组TGF-β1的蛋白表达量明显低于对照组和AML-CR组(P<0.05)。Western blotting结果显示,AML组PDCD4蛋白表达明显低于对照组和AML-CR组(P<0.05)。PDCD4、TGF-β1的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论 PDCD4、TGF-β1在初诊AML中低表达,PDCD4、TGF-β1在白血病的发生发展中具有相关关系。     

多发性骨髓瘤的治疗

异基因造血干细胞移植是惟一有可能治愈多发性骨髓瘤的方法,但其治疗相关死亡率高限制了其应用。自体造血干细胞移植对提高患者的生活质量及延长生存期起到了巨大的作用,近年来各种新药及传统的化疗方案加新药所组成的新的化疗方案的应用更进一步提高了自体造血干细胞移植的疗效。     

异基因造血干细胞移植后aGVHD与调节性T细胞、IL-35的相关性

目的   探索异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后发生急性移植物抗宿主病（aGVHD）的患者外周血中调节性T细胞及其相关转录因子、细胞因子的水平,以期获得能够有效预测患者发生aGVHD的生物学指标。方法   外周血样品采自接受造血干细胞移植术的患者和健康人,其中aGVHD阳性组13例,aGVHD阴性组10例,正常对照组21例。采用流式细胞术检测各组外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,应用实时定量PCR检测外周血单个核细胞中Foxp3转录因子的相对表达量,应用酶联免疫吸附试验检测外周血血浆中Treg相关细胞因子IL-35的表达水平。结果   aGVHD阳性组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、单个核细胞中Foxp3转录因子的相对表达量、血浆中IL-35的表达水平较aGVHD阴性组和正常对照组明显降低（P<0.05）,且经有效治疗后各指标显著升高。在aGVHD阳性组中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、Foxp3的相对表达量与aGVHD的危险度分级呈负相关（P<0.05）。配对样本资料分析显示,aGVHD发生时外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、Foxp3 mRNA的相对表达量与aGVHD发生前1~2周相比明显下降（P<0.05）。结论   异基因造血干细胞移植后患者发生aGVHD时CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的百分比、其转录因子的表达量及IL-35水平均发生明显降低,且在治疗后明显升高,可以为临床预测aGVHD的发生发展及预后提供理论依据和实验基础。     

THA方案治疗急性非淋巴细胞白血病26例临床观察

梁山县人民医院应用吡喃阿霉素（THP）、高三尖杉酯碱（HHT）和阿糖胞苷（Ara-C）组成THA方案,治疗成人急性非淋巴细胞白血病（acute non-lymphocytic leukemia,ANLL）26例,结果报道如下。     

基质金属蛋白酶抑制剂对小鼠急性移植物抗宿主病的预防作用

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)对小鼠异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防作用。方法用主要组织相容性复合物完全不相合的纯种近交系小鼠[供鼠为雌性 C57B/L6(H-2~b)鼠;受鼠为雄性 BALB/c(H-2~d)鼠]建立 allo-HSCT 后 aGVHD 动物模型。将小鼠随机分3组,给予 TIMP(A 组)、环孢菌素 A(CsA)(B 组)作为 GVHD 的预防方案。结果移植小鼠出现典型的 aGVHD 症状,未用 aGVHD 预防方案的移植小鼠(C 组)死亡高峰在移植后第5天～第7天,全部死亡。用 aGVHD 预防方案的 A 组和 B 组小鼠 aGVHD 症状明显减轻,平均生存时间较 C 组显著延长[分别延长(4.8±1.4) d 和(4.3±0.9)d,p<0.05]。不同 aGVHD 预防方案的移植小鼠之间,移植后外周血常规变化差异无统计学意义。应用预防方案后,移植小鼠 aGVHD 病理表现减轻。结论 TIMP 能有效预防小鼠 allo-HSCT 后 aGVHD,减轻其症状和病理损害程度,显著延长平均生存时间。TIMP 对造血干细胞植入和造血恢复无显著影响。     

THA方案治疗急性非淋巴细胞白血病26例临床观察

梁山县人民医院应用吡喃阿霉素(THP)、高三尖杉酯碱(HHT)和阿糖胞苷(Ara C)组成THA方案,治疗成人急性非淋巴细胞白血病(acutenon lymphocyticleukemia,ANLL)26例,结果报道如下。1临床资料1.1一般资料1998年1月20日～2002年1月20日梁山县人民医院收治的26例ANLL患者,男15例,女11例。年龄13～65岁,中位年龄30岁。经临床、骨髓细胞学和组织化学染色确诊。按FAB分型:M12例,M215例,M44例,M55例。初治20例(其中M12例,M42例,M54例);复发3例(其中M22例,M41例)难治3例(其中M21例,M41例,M51例)。1.2治疗方法THP20mg,静脉滴入,d1～d3;H…     

脑梗死患者血浆D-二聚体测定的临床意义

脑梗死时血栓的形成与血液高凝状态有密切关系。D．H聚体（D．Dimer）水平的增高反映体内有纤维蛋白形成和继发性纤溶活性增强,我们测定了75例急性脑梗死患者血浆D－Dimer水平,旨在探讨其含量与梗塞范围的关系。至临床资料所有患者均为我院神经内科住院的脑梗死患者,病程在1周以内。符合1986年第2届全国脑血管病学术会议制定的诊断标准,并经头颅CT检查证实。按梗塞灶的大小将患者分为两组。直径32．scm者为大梗死灶,（25cm者为小梗死灶。大梗死灶组38例,其中男ZO例,女18例,平均年龄52．8岁;小梗死灶组37例,其中男对例,女16例…     

应用抗胸腺细胞球蛋白治疗重型再生障碍性贫血并发神经精神病变一例

我们在应用抗胸腺细胞球蛋白 (ＡＴＧ)治疗 1例重型再生障碍性贫血患者时 ,患者突发脑病 ,现将发病及抢救经过摘录如下。患者 ,男 ,44岁。因乏力、面色苍黄 1月余 ,于 1999年 3月 2 3日住院。入院体温 37.5℃ ,血压 15 0 / 80ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ=0 .133ｋＰａ) ,双下肢及胸背部有散在出血点。外周血ＷＢＣ2 .3× 10 9/Ｌ ,ＢＰＣ 2 0× 10 9/Ｌ ,Ｈｂ 75ｇ/Ｌ ,Ｒｅｔ 0 .0 0 0 1;骨髓增生重度减低 ,三系造血细胞明显减少 ,全片未见巨核细胞 ,骨髓小粒中非造血细胞和脂肪细胞增多。酸溶血试验 (- ) ,糖水试验 (- )。诊断为再生障碍性贫血。…     

再生障碍性贫血患者CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化

目的 测定再生障碍性贫血(AA)患者治疗前后外周血CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞(Treg)的数量及叉头翼状螺旋转录因子(FOXP3)mRNA、Notch1 mRNA的表达水平,探讨Treg在AA发病中的作用及其机制.方法 流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素(CsA)治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4+ CD25+ CD127low T细胞、CD4+ CD25+ T细胞的数量,并与正常对照比较;采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平,分析两者相关性.结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4+ CD25+ T细胞占CD4+ T细胞比例分别为(4.3±0.7)%、(4.2±0.6)%,明显高于正常对照组[(2.4±0.8)%](P＜0.05).CsA治疗后恢复组患者比例下降为(2.6±0.7)%(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.AA初发组及未恢复组CD4+ CD25+ CD127low T细胞在CD4+ T细胞中的比例分别为(2.4±1.2)%、(2.5±1.1)%,较正常对照组[(7.1±2.7)%]及恢复组[(5.3±1.0)%]明显降低(P值均＜0.01);但后两组比较差异无统计学意义.AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为(0.260±0.011)和(0.018±0.005),较正常对照[(1.307±0.011)和(0.308±0.028)]表达明显下调(P值均＜0.01),治疗后分别为(1.287±0.012)和(0.281±0.013),表达较初发组显著提高(P值均＜0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P值均＞0.05).AA患者CD4+ CD25+ CD127low T细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性(P值均＜0.01).结论AA患者外周血CD4+ CD25+ CD127low Treg减少,其抑制作用减弱,导致自身反应性T细胞过度活化,抑制造血.其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关.