灯盏花乙素对人心脏微血管内皮细胞中PKCε表达的调控作用

目的 探讨灯盏花乙素 (scutellarin, SCU) 对正常及缺氧再给氧 (hypoxia reoxygenation, HR) 处理时人心脏微血管内皮细胞 (human cardiac microvascular endothelial cells, HCMECs) 中PKCε蛋白及m RNA表达的调控作用.方法 以正常与缺氧再给氧2种方式培养HCMECs, 实验分组为:在正常培养实验中分为正常对照 (Control) 组、SCU (0.1μM, 1μM, 10μM) 3种剂量组;HR培养实验中分为Control组、Model (HR) 组、HR处理的SCU (0.1μM, 1μM, 10μM) 3种剂量组.分别以Western blot与RT-PCR方法检测HCMECs中p-PKCε与PKCε蛋白与m RNA表达的变化.结果 在正常培养的HCMECs中, SCU (0.1μM, 1μM, 10μM) 剂量组均可显著上调PKCε的蛋白及m RNA的表达 (P<0.05) , 对p-PKCε也有上调趋势;在HR培养的细胞实验中, Model组PKCε有下调趋势, 而SCU 10μM组可显著上调PKCε的蛋白及m RNA的表达 (P<0.05) , 并且SCU 10μM亦可显著上调p-PKCε (P<0.05) .结论 SCU对正常及HR处理时HCMECs中PKCε蛋白及m RNA的表达有明显的上调作用.     

脉冲电磁场对大鼠椎间盘退变及A2A腺苷受体介导的活性氧/PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察脉冲电磁场（PEMF）对椎间盘退行性病变（IDD）大鼠髓核A2A腺苷受体（A2AR）的调控效应,并探讨其对A2AR介导的活性氧（ROS）/PI3K/Akt信号通路的影响。 方法 采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、椎间盘退行性病变组（简称模型组）、A2AR激动剂CGS-21680治疗组（简称激动剂组）、PEMF组和PEMF联合CGS-21680治疗组（简称观察组）。除对照组外,其余各组大鼠均制成IDD动物模型。制模后激动剂组向L5-6椎间盘组织注射100 μl CGS-21680,PEMF组给予PEMF干预,观察组注射CGS-21680后再给予PEMF干预,PEMF干预时间为14 d。培养大鼠原代髓核细胞,将其分为对照组、IL-1β模型组(简称IL-1β组)、激动剂组、PEMF组和观察组,各组细胞干预方法同上。于制模8周后采用HE染色评估各组大鼠椎间盘组织病理形态变化,采用TUNEL染色评估髓核细胞凋亡情况,采用免疫组化/免疫荧光法测定8-OHDG表达,采用ELISA试剂盒等检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及ROS含量,采用Western blot技术检测A2AR、PI3K、AKT及p-AKT蛋白水平。 结果 模型组大鼠髓核细胞明显皱缩、坏死,纤维环断裂;观察组纤维环完整,髓核结构基本趋于正常。激动剂组、PEMF组及观察组SOD水平及A2AR、PI3K、p-AKT、AKT蛋白含量均较模型组明显升高,MDA、ROS及8-OHDG表达均显著降低（P＜0.05）;并且观察组ROS水平亦显著低于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）,p-AKT磷酸化水平则显著高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。细胞实验结果显示,激动剂组、PEMF组及观察组髓核细胞SOD水平、A2AR、PI3K、p-AKT、AKT蛋白含量均显著高于IL-1β组,MDA、ROS及8-OHDG水平均明显降低（P＜0.05）;并且观察组ROS表达亦显著低于激动剂组和PEMF组（P＜0.05）,A2AR蛋白含量及p-AKT磷酸化水平则明显高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。激动剂组、PEMF组及观察组髓核细胞Bax水平均较IL-1β组显著降低,Bcl-2表达则明显升高（P＜0.05）,并且观察组细胞凋亡率亦显著低于激动剂组和PEMF组,Bcl-2表达则显著高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。 结论 PEMF可通过上调A2AR活性,减少ROS生成,从而发挥抗氧化应激作用;联合A2AR激动剂能进一步激活PI3K/Akt磷酸化,下调促凋亡蛋白Bax水平,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而抑制髓核细胞凋亡,减缓IDD恶性进展。     

皮肤感染性肉芽肿常见病原菌微孔板反向杂交检测法的研究

目的 探讨微孔板反向分子杂交技术与PCR-ELISA相结合的“拟芯片”法检测和鉴定皮肤感染性肉芽肿常见病原菌的方法。 方法 选取、设计真菌和分枝杆菌两对通用引物,及10种皮肤感染性肉芽肿常见的病原菌：结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、海鱼分枝杆菌、偶遇分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、申克孢子丝菌、卡氏枝孢霉、裴氏着色真菌、F. Monophora、白念珠菌的特异性探针;采用标准株验证通用引物、特异性探针并检测“拟芯片”法的敏感性、特异性;对19株临床分离株进行检测和鉴定。 结果 两对通用引物均可扩增出对应的菌种基因序列,PCR产物经测序分析与预期相符;“拟芯片”法检测阴性标本吸光度为0.041 ± 0.02,公式计算得临界值为0.101,在此基础上测得其敏感性为1 × 10 ~ 1 × 102个菌细胞/ml。各病原菌与相应的探针杂交,吸光度均 ＞ 0.101,为阳性;而与非对应的探针杂交,则吸光度 ＜ 0.101,为阴性,特异性高;对临床分离株的菌种鉴定准确率高。 结论 “拟芯片”法可应用于皮肤感染性肉芽肿常见病原菌的实验室快速检测和鉴定。     

手术治疗髌骨骨软骨骨折19例疗效观察

目的探讨髌骨骨软骨骨折的手术方法及疗效。方法对2005年7月～2007年8月手术治疗的19例髌骨骨软骨骨折的临床资料进行总结分析。所有病例均先行关节镜检,镜下游离体摘除手术6例,切开复位内固定13例。结果本组19例患者全部得到随访,平均13.2个月〔5个月～23个月〕。根据Lysholm膝关节功能评分标准评价其疗效,术后患者感觉满意,关节功能恢复良好。结论根据髌骨骨软骨骨折块的大小及损伤的时间,采用关节镜检查、镜下手术或切开复位、应用AO微型螺钉处理髌骨骨软骨骨折,疗效满意。     

妊娠期高血压疾病临床分析

目的:探讨妊娠期高血压疾病对妊娠结局的影响。方法:对292例妊娠期高血压疾病的临床资料进行回顾性分析。结果:292例妊娠期高血压病的剖宫产率、早产、双胎、产后出血、新生儿窒息的发生率明显高于对照组,有统计学差异(P0.01),围生儿病死率两组比较无统计学差异(P0.05)。结论:妊娠期高血压疾病对母儿危害极大,应适时终止妊娠,终止妊娠的方式首选剖宫产。     

指背动脉蒂逆行岛状皮瓣修复指端皮肤缺损的临床研究

目的 介绍一种修复手指末端皮肤缺损的新型逆行岛状皮辩.方法 应用指背动脉为蒂,设计成逆行岛状皮瓣,从2002年6月～2006年10月,临床应用掌背指背动脉蒂逆行岛状皮瓣修复手指末端皮肤缺损30例,皮瓣面积1.2 cm×1.4 cm～2.4cm×3.2 cm.结果 临床应用30例,皮瓣全部成活,效果满意.结论 以指背动脉为蒂设计成逆行岛状皮瓣,该皮瓣设计合理、血供可靠、操作简便,适用于手指末端软组织缺损的修复.     

产科静脉用药发生不良反应的护理观察与纠纷防范

目的：提高护理人员对发生药物不良反应的应对能力，减少纠纷的发生。方法：收集我院产科发生的28例药物不良反应的患者的资料，从一般资料、用药原因、药物种类、药物不良反应表现、不良反应的处理等五个方面进行分析，提出加强静脉用药滴数的观察；规范服务用语、细心观察；高度重视、及时抢救处理；当发生药物不良反应引发的纠纷时及时联系高职称的药师协助解决。结果：出现药物不良反应的28例患者均治愈出院，虽有4例引发纠纷，由于及时发现、处理得当，纠纷得以平息。结论：对产科静脉用药进行细致的护理观察和规范的服务用语，以及及时有效的处理，是保证护理安全和防范纠纷的手段。     

腺苷受体2A调控神经肽Y抑制髓核细胞凋亡及基质降解的机制研究

目的探索腺苷受体2A(A2AR)调控神经肽Y(NPY)的机制及其在椎间盘退行性病变中对髓核细胞凋亡和细胞外基质的影响。方法采用随机数字表分组法将30只雄性SD大鼠分为5组, 每组6只。S组为对照组, 即穿刺大鼠L5～6椎间盘后注射生理盐水;M组为模型组, 即通过椎间盘穿刺联合椎间盘内注射肿瘤坏死因子α构建大鼠椎间盘退变模型;A2AR-小干扰RNA(siRNA)组、NC-siRNA组和CGS-21680组则为构建椎间盘退变模型基础上分别向椎间盘内注射A2AR的siRNA、阴性对照(NC) siRNA和A2AR激动剂CGS-21680。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应检测A2AR、NPY、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、蛋白激酶A(PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)等蛋白在椎间盘中的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果在M组中, A2AR(1.72±0.50比0.95±0.18, F=11.49, P>0.05)、NPY(0.40±0.03比0.20±0.04, F=22.08, P<0.05)和bax(0.62±...     

lncRNA ZMIZ1-AS1通过稳定ZMIZ1促进骨肉瘤进展

目的:探讨ZMIZ1-AS1及其下游通路在骨肉瘤进展中的作用。方法:通过克隆形成试验、Transwell细胞侵袭试验和划痕试验检测骨肉瘤细胞增殖、侵袭及迁移能力,染色质免疫沉淀法及双荧光素酶报告法检测SOX2及MYC蛋白与ZMIZ1-AS1启动子的结合,RNA免疫沉淀法检测PTBP1蛋白与ZMIZ1-AS1(或ZMIZ1 mRNA)的相互作用。结果:SOX2和MYC是Hippo通路的下游效应子,并可转录激活ZMIZ1-AS1;与对照组相比,骨肉瘤组织与细胞中ZMIZ1-AS1表达量较高,沉默ZMIZ1-AS1能抑制骨肉瘤细胞活性、增殖、迁移及侵袭;ZMIZ1-AS1募集RNA结合蛋白PTBP1来稳定ZMIZ1 mRNA;PTBP1或ZMIZ1过表达可挽救沉默ZMIZ1-AS1对骨肉瘤细胞过程的抑制作用。结论:ZMIZ1-AS1通过稳定ZMIZ1促进骨肉瘤进展。