雷公藤甲素对高糖刺激足细胞synaptopodin和desmin表达影响

目的通过观察高糖刺激对小鼠足细胞synaptopodin和desmin表达影响及雷公藤甲素(TP)对其干预作用,探讨TP减少糖尿病肾病尿蛋白的分子机制。方法以体外培养小鼠永生化足细胞为研究对象,将其分为正常糖组、高糖刺激组、甘露醇对照组、低剂量TP干预组和高剂量TP干预组5组,分别加含有5.5mmol/L的D-葡萄糖、含有30.0mmol/L的D-葡萄糖、含有5.5mmol/L的D-葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇、含有30.0mmol/L的D-葡萄糖+3μg/L的TP、含有30.0 mmol/L的D-葡萄糖+10μg/L的TP培养液培养48h。应用荧光定量PCR法和Western Blot方法检测各组足细胞synaptopodin、desmin mRNA和蛋白的表达。结果与正常糖组相比,高糖刺激组足细胞synaptopodin mRNA和蛋白的表达增加,desmin mRNA和蛋白的表达减少;低剂量TP干预和高剂量TP干预组synaptopodin mRNA和蛋白表达水平均较高糖刺激组升高,而desmin mRNA和蛋白表达水平较高糖刺激组降低,且呈一定的剂量-效应关系,差异有显著性(F=25.919~551.012,P<0.05)。结论 TP可以改善高糖诱导的足细胞synaptopodin和desmin表达异常,这可能是TP减少糖尿病肾病尿蛋白的机制之一。     

Klotho基因G-395A多态性与慢性肾脏病患者动脉硬化的关系

目的:研究慢性肾脏病非透析患者Klotho基因启动子区域G-395A单核苷酸多态性的分布,探讨该基因多态性位点与慢性肾脏病动脉硬化的相关性。方法:116例慢性肾脏病非透析患者均进行彩超测定颈动脉内膜厚度,并记录动脉硬化的传统危险因素,根据测定结果分为动脉硬化组(56例)和对照组(60例)。应用Taq Man探针等位基因特异性杂交分析法对Klotho基因G-395A多态性位点进行分析。结果:G-395A多态性位点共检测出GG、GA、AA 3种基因型,频率分别为56.9%、32.8%和10.3%,符合Hardy-Weinberg平衡。动脉硬化组G-395A等位基因的频率显著低于对照组(35.1%vs49.0%,P=0.032)。logistic回归分析,调整传统危险因素后G-395A与动脉硬化呈负相关(β=-0.412,P=0.024)。结论:Klotho基因G-395A等位基因可能是慢性肾脏病动脉硬化的遗传学保护因素。     

血清CA19-9在检测HBV相关性肝病中的价值

目的:探讨血清CA19 -9在在慢性乙肝病毒相关性肝病患者临床应用中的价值.方法:CA19 -9、a-FP采用IRMA法测定;a-FP采用IRMA法测定;HBV DNA定量:采用FQ - PCR法.结果:原发性肝癌组检测结果,与肝硬化组、HBV- DNA阳性组、HBV-DNA阴性组比较差异有显著意义.肝硬化组检测结果,与HBV -DNA阳性组、阴性组比较差异均有显著意义.HBV-DNA阳性组检测结果,与HBV-DNA阴性组比较差异无显著意义.结论:检测CA19 -9在慢性乙肝病毒相关性肝病,特别是对乙肝病毒相关性原发性肝癌、肝硬化患者临床应用中的价值.     

厄贝沙坦对早期糖尿病肾脏疾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的：观察厄贝沙坦（irbesartan）对糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）大鼠足细胞裂孔隔膜蛋白分子（nephrin和 podocin）表达的影响,探讨厄贝沙坦对DKD的防治作用。方法以高脂高糖喂养8周联合小剂量链脲佐菌素（30 mg/kg）建立DKD大鼠模型,将 DKD大鼠模型随机分为2组：厄贝沙坦组及模型对照组;另设正常对照组。厄贝沙坦组给予厄旦沙坦（50 mg·kg-1·d-1）,另外2组每日给予等量0.9%生理盐水灌胃。各组于治疗前及药物干预后第4、8、12周周末检测大鼠血糖浓度和尿微量白蛋白量;观察大鼠体质量、肾重、肾肥大指数、血清尿素氮、肌酐、总胆固醇、三酰甘油变化;光镜观察肾脏病理改变;应用免疫组化技术观察足细胞相关蛋白 nephrin、podocin肾组织分布与表达;采用 Western blot技术测定肾皮质 nephrin、podocin 蛋白的表达。结果应用厄贝沙坦干预后与DKD对照组相比,大鼠的尿微量白蛋白总量、肾肥大指数、血糖、尿素氮、血肌酐较模型对照组明显降低（P〈0.05）,体质量增加（P〈0.05）,病理改变减轻,nephrin和 podocin蛋白表达增加（P〈0.05）。结论厄贝沙坦能上调 nephrin和 podocin的表达水平,降低尿微量白蛋白排泄,延缓DKD的进展。     

2型糖尿病伴发高血压病人胰岛β细胞早期分泌相的变化

①目的 探讨２型糖尿病伴发高血压病人胰岛β细胞早期分泌相的变化规律。②方法 采用精氨酸兴奋试验及放免法，分别检测了８２例２型糖尿病病人空腹及左旋精氨酸（Ｌ－ＡＲＧ）刺激后２，４，６min时胰岛素（ＩＮＳ）和Ｃ肽（Ｃ－Ｐ）水平变化，并与５０例健康人进行对照。③结果伴发高血压的２型糖尿组空腹ＩＮＳ水平明显高于对照组帮无血管病变组（Ｆ＝９．４１，q＝３．９１，６．０７，Ｐ＜０．０１）；其Ｃ－Ｐ水平亦明显高于     

雷公藤对糖尿病大鼠肾皮质GLUT-1 mRNA表达的影响及其意义

目的 探讨雷公藤对糖尿病(DM)大鼠肾脏GLUT-1 mRNA 表达的影响及其意义.方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立DM动物模型.将46只3月龄160～190 g大鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组,DM模型组,雷公藤组(6.7mg·kg-1·d-1) .第4、8、12周末各组处死4只大鼠并收集标本,记录体重、右肾重、检测血糖、血尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白定量.用RT-PCR方法检测肾皮质GLUT-1 mRNA表达水平.肾组织行HE、PAS染色.结果 ①与正常对照组相比,DM模型组大鼠造模成功后血糖明显增高(P＜0.01),但24 h尿蛋白排泄量无明显增高(P＞0.05);4 w时体重、肾重指数、尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白排泄量、肾皮质GLUT-1 mRNA表达均明显增加(P均＜0.01),12 w时增加更加显著.与DM模型组相比,雷公藤组8 w时血糖、尿素氮、肌酐降低(P均＜0.05),24 h尿蛋白排泄量和肾皮质GLUT-1 mRNA表达量均明显下降(P均＜0.01);12 w时体重增加(P＜0.05),肾重指数才明显下降(P＜0.01).②肾组织HE、PAS染色病理学观察:DM模型组光镜下肾小球肥大,系膜细胞增生,系膜基质弥漫性或结节性增多,肾小球、肾小管基底膜增厚,而雷公藤组这些病理改变明显减轻.结论 雷公藤能明显减少DM大鼠尿蛋白排泄量,抑制肾脏肥大、减轻肾脏的纤维化硬化程度.其机制可能是下调GLUT-1 mRNA的表达量及功能活性,最终延缓DN的发展.     

中药组方治疗糖尿病肾病临床观察及机制探讨

目的 :观察中药组方 (DN -DC)治疗糖尿病肾病的效果 ,并对其机制进行探讨。方法 :根据尿蛋白情况将糖尿病肾病病人分为早期糖尿病肾病组和临床糖尿病肾病组 ,两组病人均随机分为糖尿病肾病西药组 ,糖尿病肾病西药 +中药 (DN -DC)组 ,另设正常对照组。治疗 8周 ,观察血糖、血脂、血肌酐、尿蛋白排泄率、血内皮素(ET)、转化生长因子 - β1(TGF - β1)、血管内皮细胞生长因子 (VEGF)。结果 :8周时早期糖尿病肾病和临床糖尿病肾病组中 ,服用DN -DC治疗组UAE、血ET、TGF - β、VEGF、血脂水平均较未治疗组低 (P <0 0 5 )。血糖水平变化不明显。结论 :①DN -DC能减少糖尿病肾病的尿蛋白排泄 ,对糖尿病肾病的肾损伤有延缓作用 ;②DN -DC对糖尿病肾损伤的保护机制与DN -DC降低血ET、TGF - β1、VEGF有关。     

尿毒症脑病大鼠脑组织谷氨酸和γ-氨基丁酸浓度变化

目的研究尿毒症脑病大鼠大脑组织中谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）浓度变化与尿毒症脑病发病的相关性。方法Wister大鼠36只,随机分为两组：正常对照组（12只）、模型组（24只）。模型组大鼠给予顺铂诱导急性肾功能衰竭,再将模型组大鼠分为尿毒症组和尿毒症脑病组。高效液相色谱法分别检测上述三组大鼠大脑组织内Glu和GABA的含量。结果尿毒症组和尿毒症脑病组大鼠大脑组织中Glu和GABA浓度发生变化,尿毒症组大鼠大脑组织中Glu和GABA浓度与正常组相比,差别没有统计学意义（P〉0.05）。尿毒症脑病大鼠大脑组织中Glu和GABA浓度与正常组和尿毒症组相比,差别均有统计学意义（P〈0.01）。结论急性肾功能衰竭并发脑病时,脑组织中Glu和GABA浓度发生明显变化,因此Glu和GABA可能参与了尿毒症脑病的发生。     

肥大细胞、巨噬细胞及转化生长因子在IgA肾病患者肾组织中的浸润及意义

目的:观察肥大细胞、巨噬细胞、转化生长因子β1在IgA肾病患者肾组织中的浸润表达,并分析其意义。方法:①收集2004-06/2006-02青岛大学医学院附属医院肾内科收治的26例IgA肾病住院患者的肾活检标本,均经肾活检确诊肾小球系膜区存在以IgA为主的免疫复合物,并经临床及实验室检查排除紫癜性肾炎、狼疮性肾炎等继发性IgA肾病,临床资料及病理资料完整,患者全部签署肾穿刺知情同意书。另取5例配型不合的移植肾或肾穿刺后病理结果正常的肾组织(捐献者均签署捐献协议)作为正常对照组。②两组标本均行常规组织化学染色及特染,采用免疫组织化学技术检测肥大细胞、巨噬细胞在肾组织中的浸润及转化生长因子β1的表达,肥大细胞与巨噬细胞阳性呈黄褐色,转化生长因子β1阳性呈深黄色。③IgA肾病活动性指标包括每系膜区系膜细胞增生数、间质炎性细胞浸润细胞性新月体占肾小球面积的百分比3项。慢性化指标包括纤维性新月体占肾小球面积、局灶性节段性硬化占肾小球面积、肾小管萎缩占肾小管间质面积、间质纤维化程度占肾小管间质面积4项。④单盲法分析肥大细胞、巨噬细胞及转化生长因子β1的相关性及其与IgA肾病活动性指标、慢性化指标、血肌酐、尿蛋白之间的关系。结果:①肥大细胞、巨噬细胞的浸润及转化生长因子β1的表达:正常肾组织中偶见或无肥大细胞、巨噬细胞和转化生长因子β1的表达,而患肾中肥大细胞、巨噬细胞的浸润数量和转化生长因子β1的表达均明显增强(t=3.82～7.27,P<0.01)。②肥大细胞、巨噬细胞、转化生长因子β1与临床指标的相关性:相应部位肥大细胞、巨噬细胞的浸润数量及转化生长因子β1的表达呈显著正相关(r=0.51～0.91,P均<0.01)。肥大细胞数量与慢性化指标、血肌酐呈显著正相关(r=0.87,0.69,P均<0.01),与活动性指标和尿蛋白定量无明显相关性(r=0.30,0.21,P均>0.05);巨噬细胞数量和转化生长因子β1与活动性指标、慢性化指标、血肌酐、尿蛋白定量均呈显著正相关(r=0.39～0.90,P均<0.01;r=0.34～0.68,P<0.01或0.05)结论:①肥大细胞可能是IgA肾病肾间质纤维化的重要参与者,其数量增加可能预示着IgA肾病的慢性化和预后不良。②巨噬细胞可能是IgA肾病发生发展过程的全程参与者,它的浸润可能是肥大细胞在肾间质中浸润的前提条件之一。③转化生长因子β1不仅是贯穿始终的重要的致纤维化因子,而且可能是巨噬细胞和肥大细胞的重要趋化因子,并能促进它们的增殖、活化、发挥生物学作用。     

DN-1号防治糖尿病肾病鼠进行性肾损伤

目的　观察DN 1号 (黄芪、党参、丹参、大黄复方合剂 )对糖尿病肾病的治疗效果 ,并对其作用机制进行探讨。方法　采用STZ单剂 (6 5mg/kg)腹腔注射方法建立糖尿病大鼠动物模型。动物分为糖尿病肾病对照组、糖尿病肾病DN 1号治疗组和正常对照组。观察DN 1号对各组血糖、血脂、血肌酐、转化生长因子 β1(TGF β1)、白介素 8(IL 8)、2 4h尿微量白蛋白排泄率、肾脏病理的影响。结果　糖尿病肾病组 4～ 8周对尿蛋白排泄率、血脂、TGF β1、IL 8水平 ,肾组织中TGF β1的表达均高于正常对照组。肾组织光镜和电镜检查均出现早期糖尿病肾病典型的病理改变。DN 1号治疗组 8周对尿白蛋白排泄率、血脂、TGF β1、IL 8较未治疗组低 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。肾组织中TGF β1的表达也较对照组低。血糖在治疗组和对照组无显著性差异。结论　DN 1号能减少糖尿病肾病的尿蛋白排泄 ,对肾损伤有保护和延缓作用。对糖尿病肾病损伤保护机制与DN 1号降低血TGF β1、IL 8分泌 ,减少肾组织中TGF β1的表达有关。