gadd153基因对卵巢癌细胞生长抑制作用的研究

目的　研究生长抑制ＤＮＡ损伤基因（ｇｒｏｗ ｔｈ ａｒｒｅｓｔ ａｎｄ ＤＮＡ ｄａｍ ａｇｅ, ｇａｄｄ）对卵巢癌细胞生长抑制和凋亡的作用。　方法　ＲＴ－ＰＣＲ鉴定卵巢癌ＳＫＯＶ３ 和３ＡＯ细胞株ｇａｄｄ１５３ 基因表达。通过目的基因的克隆、载体构建技术,将目的基因ｇａｄｄ１５３ 重组于ｐｌＸＳＮ－ｎｅｏ 逆转录病毒表达载体;构建的ｐＬＸＳＮ－ｇａｄｄ１５３载体采用脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）（ＤＯＴＡＰ）的方法,分别转染ＳＫＯＶ３ 和３ＡＯ细胞株;经Ｇ４１８ 抗性筛选;ＲＴ－ＰＣＲ表达鉴定;足叶乙甙（ＶＰ１６）诱导,采用流式细胞仪分析（ＦＣＭ）的方法检测转染前后肿瘤细胞的生长抑制和凋亡。　结果　ＳＫＯＶ３－ｇａｄｄ１５３ 细胞生长抑制在Ｇ１／Ｇ０ 期,部分细胞进入凋亡的状态;３ＡＯ－ｇａｄｄ１５３ 细胞生长抑制,未引起凋亡。　结论　转染ｇａｄｄ１５３ 基因的肿瘤细胞系,诱导表达后可诱发肿瘤细胞生长抑制在Ｇ１／Ｇ０期,并有细胞进入凋亡状态。证实ｇａｄｄ１５３ 基因参与了细胞生长抑制和凋亡过程。     

皂白散治疗足癣效果以及安全性的基础研究

目的观察皂白散治疗足癣的效果以及安全性。方法将大剂量皂白散(60%皂白散浸液)、小剂量皂白散(30%皂白散浸液)作用于沙保弱氏平板培养的不同真菌上,观察皂白散的抑制真菌作用;作用于普通琼脂平板培养的细菌上,观察皂白散的抑制细菌作用;作用于55℃实验用夹层铁皮水浴箱中的ICR小白鼠上,观察皂白散的镇痛作用。采用60%皂白散浸液作用于家兔的耳部溃疡表面,观察皂白散对创面愈合的作用。采用60%皂白散浸液作用于豚鼠完整、破损皮肤以及皮下注射观察其安全性。结果皂白散大剂量对Pn、An、Af具有轻度抑制作用,对C、T、M、Pp、ac有中度抑制作用;皂白散小剂量对C有轻度抑制作用,对ac有中度抑制作用。皂白散大剂量对SB、Shi、Bs、Ec、P、Sa、Ct均有中度抑制作用;皂白散小剂量对SB、Shi、P有中度抑制作用,但对Bs、Ct无抑制作用。大剂量皂白散浸液能够明显缓解ICR小白鼠疼痛,缩短兔耳外伤性创面渗出消失时间以及结痂愈合时间,对豚鼠完整、破损皮肤刺激性小,无明显全身致敏性。结论皂白散具有抑制真菌、抑制细菌、镇痛、减少组织渗出和促进创伤愈合的作用,刺激小,无明显全身致敏性,值得在临床推广应用。     

荧光法测定163例皮肤病患者血清维生素A值及其意义

为了解维生素人对皮肤病的作用及发生疾病时之血值水平.我们对西安地区163例皮肤病惠者及100例健康人,采用荧光法侧定其血清维生素A值为97.74±22.52μg/dl.测定结果为:对称性红斑角化症.毛发红糠疹.扁平苔辞.黑变病,白嫩风及维生素A缺乏症等病血清维生素A值均在正常范围.低于正常者有座疮,脂溢性皮炎.天疤疮和银屑病(P<0.05~0.01).初步讨论了几种皮肤病与维生素人的关系,为今后维生素人的合理应用,并为探讨用维生素人治疗某些皮肤病的机理提供了一些资料.     

18F-FDG脑PET显像评价烟雾病治疗效果的价值

烟雾病(Moyamoya disease,MMD)是以双侧颈内动脉(I-CA)远端和大脑前动脉(ACA)近端狭窄或闭塞伴烟雾状代偿血管形成为特点的脑血管病,脑血管造影时脑底部异常增生的血管网形如吸烟时喷出的一股烟雾而将该病形象的称为"烟雾病" [1].目前该病的确诊主要通过脑血管造影或核磁血管成像(MRA).正电子发射计算机断层显像(PET)由于可以检查脑组织的代谢情况,所以对于MMD的病情判断及寻找外科手术指征有相当重要的意义.本文对比分析112例MMD患者术前及术后PET检查结果,以探讨PET检查在MMD中的应用价值.     

nm23-H2基因抑制卵巢癌细胞侵袭转移及调节网络初探

目的研究上皮性卵巢癌转移相关nm23-H2基因功能及其调控网络,为最终揭示卵巢癌侵袭转移分子机制和晚期卵巢癌基因治疗提供理论依据。方法将nm23-H2重组质粒pCDNA3/nm23-H2转染人卵巢癌细胞系SKOV3.ip1,经G418抗性筛选及RT-PCR鉴定得到稳定转染阳性克隆H2-18,设计体外黏附实验及人工基底膜侵袭实验比较转染前后细胞黏附侵袭特性的改变。应用2 747点人类肿瘤相关Oligo芯片检测转染前后细胞基因表达的改变,寻找与nm23-H2相关下游调控肿瘤相关基因,并探讨其调节网络。结果用重组质粒pCDNA3/nm23-H2转染SKOV3.ip1细胞。转染前后细胞在体外的增殖能力没有显著变化,转染后细胞的黏附与侵袭基底膜能力明显降低。经人类肿瘤相关Oligo芯片检测转染前后细胞发现55个二倍差异表达基因,在上调基因中以转录调节、信号转导、分化发育及细胞凋亡类基因为多;下调基因中以信号传导及黏附运动功能类基因为主。结论nm23-H2基因具有抑制卵巢癌侵袭转移的作用,并且这一作用的实现是通过对一系列下游肿瘤相关基因的调控来完成的。基因芯片技术结合普通分子生物学技术是后基因组时代肿瘤相关基因功能研究及探索基因调控网络的有效手段。     

维A酸诱导人类恶性黑色素瘤细胞株A375凋亡的受体机制研究

目的研究维A酸诱导人类恶性黑素瘤细胞株A375凋亡的受体机制。方法通过Bax／Bcl-2免疫细胞化学染色、TUNEL法、Annexin V／PI染色以及活性Caspase-3检测3种维A酸（9-cis-RA、at-RA and 13-cis-RA）、维A酸A受体（RAR）激动剂TTNPB和维A酸X受体（RXR）激动剂Ma对A375细胞凋亡的影响。结果维A酸和TTNPB均不同程度的上调Bax表达并下调Bcl-2表达．Annexin V／PI和TUNEL检测结果均显示维A酸和TTNPB可诱导A375细胞凋亡,同对照相比均差异有统计学意义（P〈0．05）,而Ma与对照组相比,差异无统计学意义（P〉0．05）。活性Caspase-3分析显示,除了Ma外,所有试剂均不同程度的上调Caspase-3的表达,以TTNPB的作用最强（P〈0．05）。结论维A酸诱导A375细胞凋亡的作用涉及到Caspase-3途径。维A酸诱导A375细胞凋亡与RAR的激活可能有关,而与RXR的激活无关。     

SV40 T基因诱导的人卵巢癌细胞永生化

目的 建立人卵巢癌永生化细胞系，为卵巢癌体外研究提供实验模型。方法 利用基因重组技术构建猴肾病毒40（SV40）T抗原基因的高效真核表达载体pcD2-SV40。将其转染10例原代培养的早期传代细胞，经G418筛选，抗性克隆扩大培养，建立永生化细胞系。免疫组化检测细胞的上皮起源，用PCR、RT－PCR和Southern Blot方法鉴定SV40 T基因在转染细胞中的表达。观察所建立的永生化细胞系的染色体核型。结果 10例转染细胞中，6例筛选出抗性克隆。角蛋白免疫组化证实3例为上皮起源。其中2例上皮起源细胞得以扩大培养成系，长期稳定传代，分别命名为BUPH：OVSC－2和BUPH：OVCA－3。经鉴定两种细胞系中存在SV40 T在基因水平及转录水平的表达。其染色体核型均符合人体恶性细胞特征。结论 利用SV40T抗原基因进行人卵巢癌原代细胞的 生化是一种可行的、可重复的建系方法，可提高卵巢癌细胞成系机率。     

系统性红斑狼疮SLEDAI评分和泼尼松用量的分析

目的探讨泼尼松在SLE治疗中的规范化用量。方法随机选择97份SLE患者的病例资料,进行SLEDAI评分,并将其按不同分值分为四组。分别统计各组中泼尼松用量(或转换后等同的泼尼松用量)的均值、95%的用药可信区间,并比较各组用药量间差异是否有统计学意义。结果泼尼松用量随着SLEDAI评分的增加而增加。Ⅰ组泼尼松用量均值及95%的用药可信区间为:0.51mg/(kg·d),0.43～0.59 mg/(kg·d);Ⅱ组为0.89mg/(kg·d),0.79～0.99 mg/(kg·d);Ⅲ组为1.13 mg/(k·d),1.02～1.25mg/(kg·d);Ⅳ组为1.63mg/(kg·d),1.47～1.80mg/(kg·d)。各组用药范围不同,差异有显著性意义(P<0.01)。结论不同的SLEDAI评分可以为临床医师合理选择激素用量提供参考。     

复方中药对黑素细胞迁移和黏附的影响

目的:确定复方中药乙醇提取物对体外培养黑素细胞黏附、迁移的影响.方法:复方中药用70%乙醇提取,正常人黑素细胞来自包皮环切术切取的包皮组织.用包被纤维黏连蛋白的培养板检测黑素细胞黏附,用微孔膜研究黑素细胞迁移.结果:复方中药1号和3号乙醇提取物可促进黑素细胞黏附和迁移(P<0.05),而1、2和3号可以促进黑素细胞迁移(P<0.05).结论:部分复方中药可能通过促进黑素细胞黏附和迁移途径对白癜风起治疗作用.