高校数字图书馆建设的思考

文章概要介绍了南京医科大学数字图书馆的建设历程以及目前存在的问题,指出数字图书馆建设是一个系统性工程,需要兼顾好硬件?软件和人员之间的关系,并给出相应的解决方案?     

双硫仑通过上调GADD45A抑制胰腺癌细胞增殖的机制研究

目的：通过体外实验评估双硫仑（disulfiram,DSF）对人胰腺癌细胞增殖、细胞周期的影响并初步探讨可能作用机制。方法：不同浓度梯度的DSF联合Cu（DSF/Cu）处理人胰腺癌PANC?1和PATU8988T细胞,CCK?8法检测细胞增殖活性及药物对细胞的增殖抑制率;选取IC50浓度的DSF/Cu处理细胞,流式细胞术检测细胞周期分布情况,并采用荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中生长阻滞和DNA损伤诱生基因45A（growth arrest and DNA damage inducible 45A,GADD45A）,G2/M周期特异性蛋白CCNB1、CDC25C、CDK1的转录和翻译水平,同时检测MAPK通路相关蛋白P38和JNK蛋白磷酸化水平;siRNA干扰试验检测抑制GADD45A基因后细胞相对活力、细胞周期及MAPK通路相关蛋白磷酸化水平的变化。结果：DSF联合Cu对人胰腺癌细胞增殖具有明显抑制作用,且抑制率随DSF浓度增加而增加。DSF/Cu可明显上调GADD45A基因的表达,诱导细胞周期G2/M期阻滞,抑制G2/M周期特异性基因及蛋白的表达;Real?time PCR结果表明DSF/Cu处理PANC?1细胞和PATU8988T 细胞24 h后GADD45A表达量升高,分别为对照组的11.4和7.99倍（P均<0.001）;相应地,PANC?1细胞和PATU8988T 细胞CCNB1、CDC25C、CDK1表达量下降,分别为对照组的31%、35%和37%（P均<0.05）及48%、24%和29%（P均<0.05）,差异有统计学意义。Western blot结果与RNA表达结果相对应,且呈浓度和时间依赖趋势。同时,MAPK信号通路相关蛋白磷酸化水平增高。siRNA?GADD45A干扰后细胞活力增加,G2/M细胞比例降低,MAPK信号通路磷酸化水平降低。结论：DSF/Cu可通过上调GADD45A并激活JNK/P38?MAPK信号通路诱导细胞周期G2/M阻滞,进而引起细胞增殖抑制,发挥抗肿瘤作用。     

小鼠日本血吸虫模型肝组织坏死形态学观察

建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型和自然感染模型，发现早期肝脏出现，片状或灶性凝固性坏死，后期发生纤维组织增生。提示肝组织凝固性坏死诱发肝纤维化，与虫卵肉芽肿引起的纤维化协同作用可能是血吸虫性肝硬化的又一发生机理。     

参附注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤作用的影响

为进一步探讨参附注射液抗休克机制，本文观察了参附注射液对鼠肾缺血再灌注模型超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及组织形态的影响。结果显示，与缺血再灌组相比，参附注射液组肾外髓水肿明显减轻（Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ活性明显增高（Ｐ＜０．０１）。提示保护ＳＯＤ活性、降低脂质过氧化反应的作用是参附注射液抗休克的机制之一。     

大鼠肾缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡的研究

以动脉错钳夹双侧肾蒂45分钟阻断肾动脉供血制备SD大鼠肾缺血模型后，分别于再灌注的0、12、24、48、72小时分批处死动物，进行肾组织光镜检查、DNA提取物凝胶电泳实验和原位细胞凋亡标记（TUNEL）实验。结果表明：1．缺血再灌注后肾组织的病理变化主要表现为皮，髓交界部的肾小管发生细胞调亡，皮质记质部的肾小管病变较轻，肾小球的改变不明显。2．TUNEL实验表明缺血再灌注后12小时时细胞调亡的水平最高（24．45±2．81个／HP），缺血再灌注当时（0小时时）细胞调亡水平（437±0．65个／HP）与正常组织间（3．67±0．72个／HP）无差异。缺血再灌注24、48、72小时时的细胞凋拦水平呈逐渐下降趋势（分别为20．45±1．38个／HP、13．8±1．37个／HP、9．5±0．79个／HP）。3．凝胶电泳实验显示缺血再灌注的肾组织出现典型的180hP及其倍体的DNA条带。4．至缺血再灌注72小时时病变肾小管内仍可见无核物质的调亡小体存在，其最终被再生的肾小管上皮挤入管腔而排出，并非被巨噬细胞吞噬清除。     

糖尿病大鼠外周神经病变与胰岛素样生长因子-1基因表达异常的关系

目的探讨肝组织胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)基因表达异常及其与糖尿病外周神经病变的关系.方法实验选用清洁级SD雄性大鼠64只.将64只大鼠按初质量匹配随机分成正常对照组16只和糖尿病组48只.用四氧嘧啶诱发糖尿病大鼠模型,并进一步将糖尿病大鼠按血糖水平分成3组(胰岛素治疗1,2,3组),与正常大鼠组进行实验比较.反转录一多聚酶链扩增反应半定量分析坐骨神经IGF-1 mRNA含量;酶联免疫吸附法分析组织IGF-1肽含量;诱发肌电图测定坐骨神经电生理指标;光镜,电镜下观察坐骨神经形态学改变.结果糖尿病2周时,胰岛素治疗2,3组大鼠肝组织IGF-1mRNA含量明显低于正常对照组,且随病程发展进一步下降(P＜0.01).糖尿病3个月时,胰岛素治疗2,3组大鼠肝组织IGF-1mRNA含量与正常对照组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01).肝组织IGF-1肽含量与IGF-1mRNA几呈平行变化趋势.此变化趋势与肝组织IGF-1肽含量变化一致(r=0.99,P＜0.001).糖尿病2周时,糖尿病组与正常对照组间电生理差异无显著无意义(P＞0.05).糖尿病2,3个月时,胰岛素治疗2,3组大鼠电生理指标与正常对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).糖尿病2,3个月时,胰岛素治疗3组与胰岛素治疗2组比较,差异有显著性意义(P＜0.01),胰岛素治疗1组与正常对照组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).糖尿病3个月时,与正常对照组及胰岛素治疗1组的髓鞘面积、轴突面积、神经纤维密度[(20.98±0.89),(21.28±1.14)μm2;(25.1±2.94),(27.31±3.21)μm2;(12.17±1.2),(2.14±0.9)×103 mm-2]比较,胰岛素治疗2组和胰岛素治疗3组轴突面积[(18.35±1.00),(14.80±0.76)μm2],髓鞘面积[(22.93±3.13),(18.34±0.90)μm2],神经纤维密度[(10.11±0.32),(8.68±0.30)×103 mm-2]均显著减少或下降.血清IGF-1呈一致性下降(r=0.99,P＜0.001).其变化与坐骨神经功能改变(感觉神经r=0.54,P＜0.025,运动神经r=0.49,P＜0.05)、组织形态异常关系密切(神经纤维密度r=0.68,P＜0.025),血糖正常糖尿病组大鼠与正常对照组间上述指标无显著差异性意义(P＞0.05).结论糖尿病早期即出现肝组织IGF-1基因表达下降,程度依糖尿病严重状态而异并随疾病进程加重,血清IGF-1水平相应地出现变化,提示肝组织为血循环IGF-1的主要来源,这种表达异常可能导致外周神经病变发生和发展.     

EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析

目的:制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A (latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串联蛋白并分析其免疫学特性?方法:用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位,将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,经大肠杆菌BL21表达并纯化?制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE?Western blot鉴定后,免疫小鼠制备多克隆抗体,以ELISA检测抗体的效价,免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性?结果:通过原核表达与纯化,获得高纯度的表位融合蛋白,经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体,该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析?结论:本研究制备的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体,为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础?