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日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30的模拟抗原在成虫、虫卵的定位观察 总被引:1,自引:0,他引:1
应用免疫组化和免疫电镜技术观察了日本血吸虫单克隆anti-anti-idNP30的模拟抗原在成虫、虫卵的分布和定位。单克隆anti-idNP41作为第一抗体。实验结果表明,NP30的模拟抗原定位于成虫的体膜、消化管上皮、子宫内膜上皮及虫卵的卵膜。提示NP30的模拟抗原具有其共同抗原的特性,NP30具有作为抗病疫苗候选分子的潜能 相似文献
132.
目的:探讨滋养层细胞表面抗原2(Trop2)对胃癌细胞化疗耐药的影响及机制。方法:应用慢病毒转染技术将Trop2 shRNA转染至BGC823细胞株,通过嘌呤霉素筛选出稳定转染质粒的细胞株;qRT?PCR、Western blot和免疫荧光方法检测质粒干扰效率;CCK?8细胞增殖试验和流式细胞术检测柔红霉素对BGC823细胞株增殖能力和细胞凋亡的影响;qRT?PCR、Western blot检测耐药相关基因TopoⅡα的mRNA和蛋白表达变化。结果:在稳定转染Trop2 shRNA质粒的shTrop2组中,Trop2 mRNA及蛋白表达水平较对照组(未处理)和shNC组(转染空载体质粒)明显下调;在相同药物浓度下,柔红霉素对shTrop2组的增殖抑制率明显高于对照组和shNC组,shTrop2组半数抑制浓度低于对照组和shNC组(P<0.05),shTrop2组中柔红霉素诱导的细胞凋亡率显著高于对照组和shNC组(P<0.05);稳定干扰Trop2表达后耐药相关基因TopoⅡα的表达显著上调。结论:Trop2通过抑制TopoⅡα的表达,可增强胃癌细胞对柔红霉素的耐药性。 相似文献
133.
独特型及抗独特型抗体源自免疫网络学说,抗独特型抗体具有模拟抗原及免疫调节的作用.基于这一理论基础,抗独特型抗体已被J一泛应用于疾病的免疫诊断、疫苗及免疫治疗等方面的研究中.该义就抗独特型抗体的制备、鉴定方法以及其在寄生虫病领域中的研究进展进行综述. 相似文献
134.
抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4人/鼠嵌合Fab抗体片段的制备及功能鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:构建日本血吸虫单克隆抗体NP11-4的人/鼠嵌合Fab(cFab)抗体片段,并对cFab抗体片段结合活性进行鉴定.方法:用抗体框架区的通用引物PCR扩增抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4的VH及VL基因,测序分析其核苷酸序列.将测序正确的鼠源VH、VL分别与人IgG1的CH1、CL通过Overlap PCR扩增Fd及全长L,再利用Overlap PCR以Fd和全长L基因为模板扩增cFab基因.将cFab基因片段克隆至载体pComb3XSS中构建表达载体pComb3XSS-Fab,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导进行蛋白可溶性表达.通过Western blot和ELISA方法对cFab抗体片段进行检测.结果:构建出抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4 cFab表达载体,Western blot结果证实在大肠杆菌Top10F'中表达出cFab可溶性抗体片段,ELISA结果显示cFab抗体片段与可溶性虫卵抗原(SEA)有较好的结合活性.结论:表达、纯化了抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4 cFab抗体片段,cFab抗体片段具有与亲本抗体相同的抗原结合能力,为制备抗日本血吸虫人源化免疫毒素提供了技术贮备. 相似文献
135.
136.
目的:扩增和克隆人黑色素瘤抗原MAGE—A9(melanoma antigen A9)cDNA,构建原核表达载体,制备抗MAGE—A9单抗.观察其在肝细胞癌中的表达。方法:从人肝癌组织提取总RNA,用RT—PCR从中扩增出MAGE—A9 cDNA,插入载体pMD18-T中.测序正确后,构建重组表达载体pBAD/gⅢ-MAGE—A9,转化大肠杆菌TOP10株进行表达。重组蛋白经L-Arabinose诱导表达纯化后.制备抗MAGE—A9单抗.免疫组化检测MAGE—A9在肝细胞癌中的表达和定位。结果:获得MAGE-A9cDNA,测序结果与GenBank一致。成功构建表达载体,表达可溶重组蛋白,SDS—PAGE分析其相对分子质量为35kD。获得抗MAGE—A9单抗,MAGE-A9在肝细胞癌中的阳性表达率为21%(8/39),主要表达于胞浆,未见肿瘤异质性,统计学分析MAGE—A9的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性。结论:有相当部分肝癌患者的肿瘤表达MAGE—A9抗原,且其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小和分化程度没有相关性.MAGE-A9可能成为肝癌特异性免疫治疗的靶点。 相似文献
137.
目的:从全人源单链噬菌体抗体库中筛选出抗MAGE鄄A1特异性单链抗体并进行免疫活性鉴定。方法:以纯化MAGE鄄A1为抗原,经过五轮吸附—洗脱—扩增,从单链噬菌体抗体库中筛选出特异性抗MAGE鄄A1噬菌体抗体,ELISA、DotBlotting检测其抗原结合能力,并对特异性较强的克隆提取质粒,表达可溶性抗体。WesternBlotting、DotBlotting、免疫细胞化学检测其抗原结合活性,非竞争ELISA法检测其亲和常数。结果:从单链噬菌体抗体库中筛选出噬菌体抗体并进行富集,经鉴定为抗MAGE鄄A1的特异性噬菌体抗体。抗MAGE鄄A1可溶性抗体分子量约为30kD,与MAGE鄄A1特异性结合,其亲和常数约为1.432×106L/mol。结论:所得全人源抗MAGE鄄A1单链抗体保留完整抗体分子结合抗原的特异性,免疫原性弱,是肿瘤导向治疗的理想载体。 相似文献
138.
139.
输尿管瓣膜症是输尿管壁的先天性畸形,易造成上尿路梗阻,并且由于临床缺乏典型症状及体征,故很难在术前作出诊断,常被误诊为输尿管肿瘤或狭窄。现报告1例如下。患者,女,48岁。因右下腹痛伴尿频、尿急2年,反复肉眼血尿4月,于1988年11 相似文献
140.