大鼠胎脑黑质细胞培养及PD鼠纹状体内悬液微移植研究

目的 探讨如何提高移植存活率和保存供体组织。方法：胎脑黑质细胞原代培养６天后，做免疫组化染色鉴定其生物活性，进行移植质量的人为控制，然后，比较各种移植技术对移植后细胞存活率、胶质细胞反应程度及功能改善的影响。实验动物分Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四组。Ａ组为假手术组，Ｂ组为立即单靶点移植组，Ｃ组为立即多靶点微移植组，Ｄ组为培养后多靶点微移植组。结果：Ｂ、Ｃ、Ｄ组术后均有功能改善。Ｃ组各时间点均比Ｂ组改善显著（Ｐ     

SPIO、EGFP双标GDNF基因修饰中脑神经干细胞移植治疗帕金森病

目的探讨超顺磁氧化铁(SPIO)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双标胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰中脑神经干细胞(mNSCs)移植对帕金森病(PD)大鼠的治疗作用。方法将PD大鼠随机分为对照组、GFP基因修饰mNSCs移植组和GDNF基因修饰mNSCs移植组,将相应细胞移植到PD大鼠纹状体。阿朴吗啡(APO)诱导PD大鼠旋转行为评估细胞移植的治疗作用。磁共振成像、免疫荧光组织化学研究移植细胞的存活、迁移和分化。结果GDNF基因修饰mNSCs移植能显著改善APO诱导PD大鼠的异常旋转行为;大多数移植细胞停留于移植原位,移植8w后,GDNF基因修饰mNSCs移植组有更多的细胞存活并分化为多巴胺神经元。结论MR I成像可对体内移植的SPIO标记细胞进行活体示踪。GDNF基因修饰胚胎mNSCs移植可显著改善PD大鼠的运动障碍,其分子机制有待进一步研究。     

BDNF、EGFP基因修饰大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞的建立

目的建立脑源性神经营养因子（BDNF）、增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因修饰大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞（mNSCs）。方法以FuGENEHD转染试剂介导质粒pcDNA3-BDNF、pEGFPN1共转染第三代E14大鼠胚胎mNSCs。荧光显微镜观察EGFP表达情况；免疫细胞化学方法和Western blot鉴定BDNF的表达；体外诱导分化后免疫细胞化学鉴定其分化能力。结果基因转染12h后EGFP开始表达：免疫细胞化学、Western blot结果表明BDNF能在细胞中正确表达；体外诱导分化研究表明BDNF、EGFP基因修饰不影响大鼠胚胎mNSCs的增殖与分化。结论成功建立了BDNF、EGFP基因修饰大鼠胚胎mNSCs，可为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。     

全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达的影响及意义

目的探讨全脑缺血-再灌注对成年大鼠海马CA1区GAD65表达的影响及意义。方法成年雄性SD大鼠24只,随机分为3组:假手术组(SH)、缺血-再灌注3d组(IR-3)及缺血-再灌注7d组(IR-7),每组8只。采用四动脉阻断法制作全脑缺血-再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测海马CA1区谷氨酸脱羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)同工酶GAD65的表达变化。结果与假手术组相比,IR-3组GAD65的表达明显增多,IR-7组恢复正常。结论GABA能中间神经元对缺血相对耐受;全脑缺血-再灌注3dGAD65的表达增多可能是一种代偿性的机制,以减轻脑缺血后的高兴奋性。     

全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达的影响及意义

目的 探讨全脑缺血-再灌注对成年大鼠海马CA1区GAD65表达的影响及意义。方法成年雄性sD大鼠24只，随机分为3组：假手术组（SH）、缺血-再灌注3天组（IR-3）及缺血-再灌注7天组（IR-7），每组8只。采用四动脉阻断法制作全脑缺血-再灌注模型，应用免疫组织化学方法检测海马CA1区谷氨酸脱羧酶（glutamic acid decarboxylase，GAD）同工酶GAD65的表达变化。结果 与假手术组相比，IR-3组GAD65的表达明显增多，IR-7组恢复正常。结论 GABA能中间神经元对缺血相对耐受；全脑缺血-再灌注3天，GAD65的表达增多可能是一种代偿性的机制，以减轻脑缺血后的高兴奋性。     

GDNF的研究进展

<正> 1993年Lin等从大鼠B49胶质细胞系中分离、纯化并成功克隆了一种新的神经营养因子即胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)。最初,因其对多巴胺能神经元具有特异性营养活性而被广泛重视。后来的研究发现,GDNF对胆碱能运动神经元也有强的活性[1]。此外,其对感觉神经元、交感神经元也有一定的作     

新生大鼠海马源性神经干细胞的分离培养及其向胆碱能神经元定向诱导分化研究(英文)

本研究目的是从新生SD大鼠海马分离、培养神经干细胞并诱导其向胆碱能神经元方向分化。利用含b FGF(20ng/ml)和B27的无血清DMEM/F12培养基培养新生SD大鼠海马分离的具有自我更新和多向分化能力的细胞群,用免疫细胞化学技术检测巢蛋白(nestin),并于分化后分别检查特异性成熟神经细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞的标记抗原β微管蛋白(Tuj1 )、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和半乳糖脑苷脂(Galc)的表达;用鸡胚骨骼肌提取液,诱导神经干细胞向胆碱能神经元方向分化。结果显示:从海马分离的细胞群具有自我更新能力,表达nestin,分化成熟后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原;与对照组3. 9%相比,鸡胚骨骼肌提取液可以诱导这些细胞中的9. 6%分化成为胆碱能神经元。提示分离的细胞具有自我更新能力和多向分化潜能,是中枢神经系统的干细胞;在加有鸡胚骨骼肌提取液的培养基诱导下,能向胆碱能神经元方向分化。     

BDNF,NGF和NT-3的mRNA和蛋白在猫左侧腰第六背根节共表达的不同方式(英文)

本实验研究了脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF),神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的mRNA和蛋白在猫左侧腰第六背根节(dorsal root ganglion,DRG)共表达的不同方式,并探讨了共表达的机制,为阐明神经营养因子的表达与脊髓可塑性的关系提供依据。本实验所使用的为未接受任何处理的健康猫。猫的左侧腰第六DRG被取出,行免疫组织化学染色与原位杂交方法结合的双重标记,确定是否有BDNF,NGF和NT-3的蛋白与mRNA共表达。实验结果显示BDNF,NGF和NT-3的蛋白与mRNA在猫DRG均有表达,但这三种神经营养因子mRNA和蛋白共表达的方式是不同的。免疫组化结果显示:BDNF阳性产物主要分布于细胞质和细胞核,细胞核的染色颜色较细胞质浅;NGF阳性产物主要分布于细胞核;NT-3阳性产物主要分布于细胞质。原位杂交结果显示:BDNF和NGF阳性信号主要分布于细胞质;NT-3阳性信号在细胞质和细胞核都有分布。由此可见,BDNF,NGF和NT-3的mRNA和蛋白在猫左侧腰第六DRG有不同的共表达方式,提示它们可能存在与脊髓可塑性有关的自分泌和/或旁分泌机制。     

三七总皂苷对SAM-P/8小鼠海马中衰老相关基因表达的影响

目的探讨三七总皂苷对SAM-P/8小鼠海马中10个衰老相关基因表达的影响。方法采用RT-PCR技术检测10个衰老相关基因在各组小鼠海马中的表达及变化情况。结果各基因在海马中均有表达,成年三七组与成年对照组比较,SCN2B表达显著增加;老年三七组与老年对照组比较,MAP2、Sortilin-1、Rab6A、Calcineurin-B和MAPKK4的表达减少;MAP1B、Calmodulin-1、Regucalcin和RAP2A基因的表达在各组之间比较均没有变化。结论三七总皂苷可能通过调节部分衰老相关基因的表达来发挥其抗衰老的作用,但早期的预防比晚期治疗更加重要。     

经口鼻蝶窦径路切除垂体腺瘤

目的　探讨经口鼻蝶窦径路切除垂体腺瘤的手术方法和疗效。方法　采用经口鼻蝶窦径路切除垂体腺瘤 2 0例 (肿瘤直径 >2 0mm)。手术沿唇下横切口 ,切除筛骨垂直板 ,进入蝶窦。修正牵开器正好指向蝶窦前壁与下壁转折处。据影像学显示 ,进一步确定中线及鞍底开窗位置和大小。用吸引器及不同的刮匙切除肿瘤 ,最后切除鞍上肿瘤。同时对肿瘤切除和手术定位技巧进行观察和总结。结果　所有病例手术定位准确、手术顺利。治愈 11例 (5 5 % )、好转 7例 (35 % )、无效 2例 (10 % )。无局部感染、死亡和其他严重并发症。结论　经口鼻蝶窦径路切除垂体腺瘤安全可靠、疗效确切