蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用

目的 分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型。方法 应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌。结果 筛选到23个差异蛋白峰（P<0.001）。盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%。结论 应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台。     

蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用

目的 分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型.方法 应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛 21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌.结果 筛选到23个差异蛋白峰(P<0.001).盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%.结论 应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台.     

癌组织微小染色体支持蛋白2表达与ⅢA期非小细胞肺癌完全性切除术预后的关系

目的探讨微小染色体支持蛋白2(MCM2)在ⅢA期非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测77例NSCLC手术切除标本中MCM2的表达,依据染色程度及阳性染色细胞百分比分为表达阳性及阴性,分析MCM2表达与患者无病生存期及生存时间之间的关系。结果77例ⅢA期NSCLC患者手术标本均不同程度表达MCM2,MCM2表达阳性患者的中位无病生存期及中位生存时间(11和24个月)均显著短于表达阴性患者(16和41个月,P=0.0345、0.0138)。结论MCM2表达是ⅢA期NSCLC手术预后的独立指标。     

P53蛋白在耐药的非小细胞肺癌的表达

 突变型P₅₃蛋白在114例肺癌中阳性率为54.4%,其中腺癌为53.6%、鳞癌为57.1%、腺鳞混合型为50%.114例肺癌标本同时做丝裂霉素、阿霉素、顺铂和长春新碱的体外药敏试验。在抗癌药物耐药性和P53蛋白表达的关系中，P53蛋白阳性表达的肺癌细胞对四种抗癌药全不敏感或单药敏感者占78.8%,有统计学意义（P<0.05）.P₅₃蛋白阴性表达的肺癌细胞对四种抗癌药的敏感性无明显相关。提示突变型P53蛋白可作为肺癌的耐药标志物。     

谷胱甘肽S转移酶在进展期胃癌中的表达及意义

谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）是第二相药物代谢酶与癌的发生发展以及耐药性的产生密切相关。在３５例进展期胃癌中用ＬＳＡＢ法同时检测（ＧＳＴ－π、Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和Ｋｉ６７抗原并分析其相互关系，观察了ＧＳＴ－π表达和胃癌病理形态改变的关系。结果表明胃癌组织中ＧＳＴ－π阳性率为５７．１％与Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白，Ｋｉ６７抗原表达相关，同时ＧＳＴ－π阳性表达的胃癌大部分表现为浸润型生长累及浆膜并伴淋巴结转移     

胃癌组织中血管内皮生长因子C表达及与淋巴结转移关系

目的探讨胃癌组织中血管内皮生长因子C(VEGFC)的表达及与肿瘤淋巴结转移的关系。方法取30例胃癌患者手术切除的新鲜标本和距癌灶5cm以外的胃组织各1块,采用半定量RTPCR法和免疫组化染色法检测胃癌组织及癌旁正常组织的VEGFC表达,图像分析仪检测VEGFC的免疫组化阳性指数(positiveindex,PI)。结果胃癌细胞呈高水平表达VEGFC,癌旁正常组织则未见表达。在胃癌组织中,有淋巴结转移(PI=1.345±0.079)、淋巴管浸润(PI=1.315±0.037)患者的VEGFC表达水平分别较无转移(PI=1.156±0.045)及无浸润者(PI=1.154±0.043)增高(P<0.05)。高分化胃癌患者的VEGFCmRNA[VEGFC/βactin比值(Ar)=0.846±0.042]和VEGFC表达(PI=1.372±0.023)均分别高于中低分化胃癌者(Ar=0.663±0.007,P<0.01和PI=1.126±0.078,P<0.05)。结论VEGFC阳性表达的胃癌患者可能更易发生淋巴结转移。     

七叶灵方诱导裸鼠人肺腺癌A549移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的:研究中药复方七叶灵方诱导人肺腺癌A549细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用.方法:皮下接种人肺腺癌A549细胞,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为不用任何治疗的对照组(A组)、化疗组(B组)、化疗加七叶灵治疗组(C组)和七叶灵治疗组(D组),每组12只,分别给予相应处理.治疗开始后每周测量肿瘤体积并换算成瘤重.采用原位细胞凋亡检测试剂盒,检测瘤组织凋亡细胞数.结果:A组瘤重显著高于其他各组(P＜0.05),C组、D组与B组比较亦有显著差异(P＜0.05).凋亡细胞数各组间具有显著差异(P＜0.05),D组瘤组织中的凋亡细胞数显著高于B组和C组(P＜0.05).A组则表现出早期细胞为高分化,到后期肿瘤组织坏死及部分细胞凋亡.结论:在裸鼠体内中药七叶灵方具有诱导A549细胞凋亡的作用.     

p53、nm23基因和端粒酶表达与非小细胞肺癌临床病理关系的探讨

目的　探讨癌基因、端粒酶与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。方法　应用免疫组化SP法和PCR TRAP法对 40例非小细胞肺癌行p5 3、nm2 3和端粒酶检测。结果　癌组织中阳性反应检出率分别为3 7.5 %、17.5 %和 92 .5 % ;临床及病理TNM分期早期肺癌p5 3基因表达明显高于中、晚期肺癌 (P <0 .0 5 ) ;nm2 3基因表达与肺癌的组织学类型、淋巴结转移和病理TNM分期均无关。 60岁以下肺癌患者的端粒酶阳性率明显高于 60和 60岁以上的肺癌患者 (P <0 .0 5 ) ;60岁以下肺癌患者淋巴结转移率及病理TNM分期中、晚期比率略高于 60和 60岁以上的肺癌患者 ,分别为 69.2 %、5 0 %和 76.9%、5 7.1% (P >0 .0 5 ) ;p5 3、nm2 3和端粒酶阳性表达无协同性 (P >0 .0 5 )。结论　p5 3阳性表达可作为非小细胞肺癌的早期诊断和高危人群的筛选指标 ;nm2 3与肺癌的发生、发展和淋巴结转移均无关 ;端粒酶阳性表达与肺癌患者的年龄密切相关 ,可能与肺癌的发生、发展和转移有关 ;p5 3、nm2 3基因及端粒酶之间无明显关系     

紫杉醇耐药与敏感细胞的差异表达蛋白分析

目的 比较人肺腺癌细胞系A549与肺腺癌紫杉醇耐药细胞系A549-Taxol的差异表达蛋白.方法 提取A549和A549-Taxol总蛋白,应用双向凝胶电泳技术(2-DE)分离,ImageMaster 5.0软件分析并筛选出两者间差异表达的蛋白点,质谱分析加以鉴定.结果 获得分辨率高且重复性好的肺腺癌耐紫杉醇细胞系及亲代细胞系2-DE图谱.ImageMaster软件分析差异大于2倍的蛋白质点共有80个,其中33个在耐药细胞系中上调,47个下调.质谱分析鉴定出19种差异表达蛋白,其中A549-Taxol中上调蛋白11种,涉及细胞骨架蛋白、代谢酶类、分子伴侣和信号转导相关蛋白质.结论 应用2-DE技术整体展示了紫杉醇耐药细胞系及敏感细胞系的蛋白表达谱,质谱法鉴定的差异蛋白为进一步从多因素角度研究紫杉醇耐药机制提供了新线索.     

TGFβ1基因修饰供者树突状细胞降低移植心脏RANTES表达

目的 探讨移植前输注人TGFβ1基因修饰树状细胞(dendritic cell，DC)对移植心脏正常T细胞表达和分泌的活化调节因子(RANTES)表达的影响。方法 TGFβ1-pcDNA3重组质粒转染供者DC；，静脉输注异体大鼠，1周后检测TGFβ1-DC；在受者脾和淋巴结的分布。TUNEL法检测受者大鼠脾T细胞凋亡水平，并检测受者脾RANTES表达的变化；同时另一部分输注大鼠接受同种异体心脏移值，观察DC输注后移植心脏存活时间变化，比较移植后不同时间排斥反应级别，免疫组化检测移植心脏RANTES的表达。结果 TGFβ1-DC输注受者后，1周内可在脾和淋巴结内形成微嵌合，并有效诱导T细胞的凋亡。TGFβ1-DC输注大鼠移植后排斥反应明显低于对照组，移植心脏存活时间明显延长，并发现移植心脏RANTES表达明显低于对照组。结论 TGFβ1-DC能有效降低移植心脏RANTES表达，增强移植心脏免疫耐受性。