非酒精性脂肪性肝炎大鼠TLR4基因及其甲基化水平的相关性研究

目的 观察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝脏中Toll样受体4（TLR4）基因的表达及其甲基化水平的 变化,并探讨两者在NASH发病中的相关性。方法 将20只大鼠采用随机数字表法分为正常组与模型组,每组10 只。正常组与模型组大鼠分别饲喂普通饲料和高脂高糖饲料,于24周后处死。测量大鼠体质量及肝质量,并取各组 大鼠血清及肝脏组织,于低温保存。通过病理染色观察肝细胞的形态变化、脂肪变性及炎性细胞浸润程度。采用酶 联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、三酰甘油（TG）及总胆固醇 （TC）水平;采用免疫组织化学染色法检测肝脏CD68蛋白的表达;采用蛋白免疫印迹法检测肝脏TLR4蛋白的表达; 实时荧光定量PCR检测肝脏TLR4基因mRNA的表达;亚硫酸氢测序PCR（BSP）检测肝脏TLR4基因甲基化水平。结 果 与正常组相比,模型组肝细胞体积增大,出现大量脂肪空泡,炎性细胞浸润明显;肝指数升高,血清中ALT、AST、 TC及TG明显升高（P＜0.01）;CD68蛋白的表达含量明显升高;TLR4蛋白、mRNA表达明显升高（P＜0.01）;甲基化水 平降低（P＜0.01）。TLR4的甲基化水平与其mRNA相对含量的表达呈负相关（P＜0.01）。结论 NASH模型大鼠肝 脏TLR4基因的表达与其甲基化水平呈负相关,TLR4基因甲基化水平的降低在NASH发病因素中发挥重要作用。     

部分脾动脉栓塞术联合内镜治疗门脉高压症合并中重度食管胃静脉曲张破裂出血的疗效分析

目的　研究内镜下食管静脉曲张套扎术（EVL）、胃静脉曲张硬化术（GVS）联合部分脾动脉栓塞术（PSE）对门脉高压症（PH）合并中重度食管胃静脉曲张（EGV）破裂出血的疗效、安全性及经济性。方法　纳入92例有明确EGV出血的肝硬化PH的住院患者。43例接受EVL/GVS联合PSE治疗为观察组,49例患者接受EVL/GVS治疗为对照组。比较2组患者中重度EGV的根治率、复发率、再出血率、住院天数、安全性及住院总费用。结果　观察组、对照组第1、3个月在EGV根治率、复发率、再出血率方面差异均无统计学意义（均P＞0.05）。第6、12个月观察组EGV根治率显著高于对照组（均P＜0.05）,复发率和再出血率显著低于对照组（均P＜0.05）,观察组住院总费用（万元：8.97 vs. 13.77）、住院总天数（d：27.0 vs. 43.0）显著低于对照组（均P＜0.01）。PSE常见并发症为发热、腹痛、腹腔积液、腹腔感染,严重并发症为脾脓肿。结论　内镜套扎、硬化联合部分脾动脉栓塞术治疗门脉高压症合并中重度EGV破裂出血中长期疗效与单纯内镜套扎、硬化术相比有较高的根治率,较低的复发率、再出血率、住院总费用及住院总天数。PSE并发症可控。     

新型冠状病毒肺炎危重型合并肥胖症患者一例

摘要：新型冠状病毒肺炎（COVID-19）危重型病死率高,其中多为老年、伴基础病及肥胖者。本文报告1例COVID-19危重型合并肥胖症患者的成功治愈过程,并介绍了有效的呼吸和循环支持过程,以期为COVID-19危重型合并肥胖患者的治疗提供参考。     

苍术挥发油对溃疡性结肠炎大鼠的改善作用

摘要：目的　研究苍术挥发油对溃疡性结肠炎（UC）模型大鼠的改善作用。方法　以5%的2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠建立UC大鼠模型。将模型大鼠按照随机数字表法分为模型组,阳性对照组（美沙拉嗪0.36 g/kg灌胃）,低、中、高剂量苍术挥发油组（分别以1、2、4 g/kg苍术挥发油灌胃）,每组10只。另设空白对照组大鼠10只（灌胃等体积蒸馏水）。各组大鼠每日给药（或蒸馏水）1次,连续10 d。记录各组大鼠模型制备前、给药前和末次给药后的体质量变化。末次给药后,取大鼠结肠组织,HE染色观察结肠病理改变,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α含量;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）检测组织中自噬基因Beclin 1和P62 mRNA表达,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3（LC3）蛋白表达水平。结果　与空白对照组相比,模型组给药后体质量下降,结肠黏膜上皮细胞脱落,隐窝扭曲或萎缩,炎症细胞浸润;结肠组织中IL-6和TNF-α含量升高,Beclin 1和P62 mRNA表达水平升高（P＜0.05）;LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达无明显变化（P＞0.05）。与模型组相比,中、高剂量组和阳性对照组大鼠给药后体质量升高,结肠上皮细胞损伤减轻,结肠组织IL-6和TNF-α含量下降,LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高;与模型组相比,高剂量组和阳性对照组Beclin 1和P62 mRNA表达明显升高（P＜0.05）。低剂量组与模型组相比,各指标变化差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　苍术挥发油能够改善UC模型大鼠结肠组织病理损伤,降低结肠组织IL-6、TNF-α含量,可能与上调Beclin1、P62 mRNA表达和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达量有关。     

MCP-1参与缬沙坦对阿霉素心脏毒性的预保护作用

目的　探讨阿霉素诱导SD大鼠心肌损伤模型中单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）蛋白表达及其潜在的干预机制。方法　选择8周龄雄性SPF级SD大鼠30只,按照随机数字表法分为3组：对照组（Con组,生理盐水灌胃＋腹腔注射）、阿霉素组（Dox组,1.25 mL/kg阿霉素腹腔注射+2 mL/kg生理盐水灌胃）及缬沙坦+阿霉素组（Val+Dox组,1.25 mL/kg阿霉素腹腔注射+2 mL/kg缬沙坦灌胃）各10只,连续干预6周。10周时超声心动图检测心功能变化,留取大鼠心肌组织,电镜观察心肌超微结构变化,采用蛋白芯片技术检测各组血清MCP-1、调节激活正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）及次级淋巴组织趋化因子（6Ckine）蛋白含量,采用Western blot检测各组心肌组织MCP-1蛋白表达。结果　超声结果显示,与Con组相比,Dox组和Val+Dox组左心室射血分数（LVEF）、左心室短轴缩短率（LVFS）明显降低,左心室收缩末期内径（LVESD）、左心室舒张末期内径（LVEDD）明显升高（P＜0.05）。与Dox组相比,Val+Dox组LVEF、LVFS明显升高,LVESD、LVEDD明显降低（P＜0.05）。电镜下可见Con组心肌细胞结构清晰;Dox组心肌结构模糊,心肌溶解,可见自噬小体;Val+Dox组心肌结构模糊不清,线粒体体积增大、大小不等,但结构完整。与Con组相比,Dox组血清MCP-1、RANTES、6Ckine蛋白分别上调1.87倍、1.40倍和1.26倍（P＜0.05）。Western blot结果显示,Dox组与Con组相比,心肌组织MCP-1蛋白表达显著升高（P＜0.05）;Val+Dox组与Dox组相比,心肌组织MCP-1蛋白表达显著降低（P＜0.05）。结论　MCP-1蛋白可能参与阿霉素诱导的心肌损伤,缬沙坦可能通过下调MCP-1蛋白表达减轻心肌损伤。     

超声弹性成像及超声造影技术评估慢性乙肝肝纤维化程度的临床研究

目的　探讨声触诊组织量化（VTQ）及超声造影（CEUS）技术对慢性乙肝肝纤维化程度的诊断价值。方法　65例慢性乙肝患者分别进行VTQ、CEUS技术检查及肝穿刺活检,获取剪切波速度（SWV）及造影参数：门静脉到达时间（PVAT）、肝动脉到达时间（HAAT）、肝静脉到达时间（HVAT）、肝实质达峰时间（TTP）、肝动脉-肝静脉渡越时间（HV-HAAT）、肝动脉-门静脉渡越时间（PV-HAAT）。根据病理结果分为轻度组12例、中度组23例和重度组30例,比较各组SWV和CEUS参数差异,分析SWV、CEUS参数与肝纤维化程度的相关性,绘制受试者工作特征（ROC）曲线,寻找SWV、CEUS参数诊断重度肝纤维化的截断值,计算曲线下面积（AUC）,评价SWV、CEUS参数对重度肝纤维化的诊断效能,采用DeLong法比较不同检测方法的AUC差异。结果　与轻度组比较,中度组和重度组SWV增大,重度组HVAT、HV-HAAT减小（P＜0.05）;与中度组比较,重度组SWV增大,HVAT、HV-HAAT减小（P＜0.05）。SWV与肝纤维化严重程度呈正相关（rs=0.713,P＜0.05）,HVAT、HV-HAAT与肝纤维化严重程度呈负相关（rs分别为 -0.437、-0.620,P＜0.05）;SWV、HVAT、HV-HAAT诊断重度组肝纤维化（肝硬化）的AUC（95%CI）分别为0.925（0.832~0.976）、0.734（0.610~0.836）、0.804（0.687~0.892）,截断值分别为1.92 m/s、21.02 s、8.23 s;SWV的诊断效能优于HVAT、HV-HAAT（Z分别为2.817和1.987,均P＜0.05）。结论　与CEUS相比,VTQ技术对慢性乙肝肝纤维化程度的诊断效能更佳。     

茶多酚对早期龋进展的影响

目的　探讨茶多酚对牙齿早期龋进展的影响。方法　采用体外脱矿的方法建立牛牙牙釉质和牙本质早期龋模型。将釉质龋及牙本质龋标本随机分为4组（n=6）：空白对照组（DW组）、氟化钠组（NaF组）、茶多酚组（TP组）、茶多酚与氟化钠联合应用组（TP+NaF组）,pH循环实验模拟早期龋的进程。检测pH循环后的脱矿液中钙、磷离子浓度,通过显微硬度计检测牙体硬组织表面显微硬度值,X线能谱分析样本表面钙磷比,并测定再矿化液中羟脯氨酸水平。结果　在牙釉质及牙本质的脱矿液中,TP组钙、磷离子相对释放量与DW组差异无统计学意义,明显高于NaF组和TP+NaF组（P＜0.05）。TP组牙釉质表面显微硬度值与DW组差异无统计学意义,牙本质表面显微硬度值高于DW组;DW组、TP组牙釉质及牙本质表面显微硬度值均低于NaF组和TP+NaF组（P＜0.05）。TP组牙釉质及牙本质表面钙磷比均高于DW组（P＜0.05）,牙釉质表面钙磷比与NaF组和TP+NaF组差异无统计学意义,牙本质表面钙磷比低于NaF组和TP+NaF组（P＜0.05）。NaF组和TP+NaF组牙本质再矿化液中羟脯氨酸水平均低于DW组和TP组（P＜0.05）,TP组与DW组以及TP+NaF组与NaF组间差异均无统计学意义。结论　在早期龋的进展过程中,茶多酚无明显抑制牙釉质及牙本质脱矿的作用,但可通过促进钙磷离子的再沉积促进再矿化的发生。     

3D-STI评价老年急性NSTEMI合并慢性肾功能不全的临床研究#br#

目的　探讨三维斑点追踪技术（3D-STI）评价老年急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）合并慢性肾功能不全患者冠状动脉病变的严重程度及左室壁运动、左室功能受损程度的价值。方法　收集明确诊断急性NSTEMI的老年患者128例,根据肾功能情况分为肾功能不全组（不全组）和肾功能正常组（对照组）,对比患者一般临床特点、心脏超声三维斑点整体纵向应变（GLS）、整体径向应变（GRS）、整体圆周应变（GCS）、整体面积应变（GAS）及左室射血分数（LVEF）与冠状动脉病变SYNTAX评分情况。结果　与对照组比较,肾功能不全组的心脏GLS、GCS、GRS、GAS的绝对值及LVEF均明显降低;冠状动脉病变SYNTAX评分明显升高,以三支病变为主;B型钠尿肽前体（NT-proBNP）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）明显升高;以上差异均有统计学意义（P＜0.01）。冠状动脉SYNTAX评分与GLS、GCS、GRS、GAS绝对值及LVEF呈负相关（r分别为-0.472、-0.477、-0.528、-0.580、-0.306,均P＜0.01）;LVEF与GLS、GCS、GRS、GAS绝对值呈正相关（r分别为0.423、0.316、0.413、0.403,均P＜0.01）。结论　3D-STI可作为一种评价老年急性NSTEMI合并慢性肾功能不全的患者冠脉病变程度、左室壁运动及左室功能的新技术,为临床早期治疗及疗效的评估提供参考依据。     

黄酮类化合物抗卵巢癌化疗耐药的作用进展

摘要：黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一类多酚类物质,亦是诸多传统中草药中的有效成分之一,因其高效、低毒,且具有多种生物学活性而得到了广泛的关注。卵巢癌是病死率最高的妇科恶性肿瘤,化疗耐药是导致其预后不良的主要原因之一。研究发现,黄酮类化合物对改善卵巢癌耐药有独特的效果,或将有助于克服卵巢癌耐药。本文就近年来黄酮类化合物改善卵巢癌化疗耐药作用的相关研究进展进行综述。     

唐山市苯丙酮尿症患儿筛查及PAH基因突变情况分析

摘要：目的　分析唐山市苯丙酮尿症（PKU）患儿筛查结果及苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变的情况。方法　选取2015年1月—2018年12月唐山市新生儿303 777例,通过茚三酮免疫荧光法检测新生儿足跟血中苯丙氨酸（PA）含量。再利用聚合酶链反应（PCR）和基因测序的方法对筛查出的PKU患儿PAH基因进行检测。结果　303 777例新生儿初步筛查共发现609例可疑阳性,召回其中411例（67.49%）进行复查,确诊42例（13.8/10万）。42例PKU患者的PAH基因测序显示,在84条染色体上共检测到62个（73.81%）12种突变,其中错义突变8种,无义突变2种,缺失突变1种,剪接突变1种。患者PAH基因突变分布在第2、3、6、7、9外显子上,其中第7外显子最多（35个,56.45%）,其次为第3外显子（14个,22.58%）。最常见的突变基因为Exon7-R243Q（18个,29.03%）和Exon3-R111X（10个,16.13%）、Exon7-R261Q（10个,16.13%）。筛查中发现1例典型PKU患儿,该患儿在PAH基因外显子区域同时发现2处杂合突变：c.208-210delTCT（缺失突变）和c.964G＞A（鸟嘌呤＞腺嘌呤）。结论　唐山市新生儿PKU发病率略高于全国,PAH基因突变以错义突变为主,第7外显子是唐山市患儿PAH基因高频突变位点。