丁型肝炎病毒中国湖南株高变区部分序列分析

用耐高温逆转录以及套式聚合酶链反应方法,对HDV中国湖南株基因组高变区1642～417片段(D1),以及保守区681～895片段(D3)进行扩增,用荧光法直接测序,对其进行序列分析。D1片段除去引物外可判读222nt(1662～197),D3片段除去引物还有176nt(701～875)。两段序列分别与美国株、意大利株、日本株以及中国河南株进行了比较。结果显示,中国湖南株高变区1662～197片段(D1)与日本株的同源性仅为44.06％,与意大利株的同源性相对较高,但也仅为72.57％。日本株在该片段的同源性特别低,而中国河南株在该片段的同源性并不特别低。各株之间在该片段的同源性仅为44.06％～72.56％,说明HDV基因组1662～197片段是高变区。中国湖南株D1片段与其它各株的同源性为44.06％～72.57％,且与中国河南株同源性也仅为62.61％,提示中国湖南株可能系一新的亚型。各株之间在701～875片段(D3)的同源性较高,中国湖南株与意大利株更为接近(93.03％),而与中国河南株(91.82％)、美国株(89.54％)和日本株(89.54％)的同源性相对较低。各株之间的同源性比较接近,提示HDV基因组701～875片段是相对保守区。同源性的高低与地理位置分布不一致,其原因有待进一步研究。     

人发角蛋白植入对大鼠脊髓损伤功能与形态的影响

目的：研究脊髓损伤后植入人发角蛋白（human hair keratin，HHK）对动物行为学影响及其对损伤脊髓的形态学影响与HHK本身的形态学变化。方法：采用重物下落撞击法制备大鼠脊髓损伤模型，在损伤处移植入HHK，分别于植入后5、10、15、20、25、30d进行行为学检查，于20d与30d脊髓进行形态学观察。结果：HHK植入后在30d内对大鼠的行为学影响与模型对照组没有统计学意义，但HHK可降解吸收融入损伤的脊髓组织，而受损伤的脊髓组织中可见大量胶质细胞、成纤维细胞与巨噬细胞浸润、神经纤维与髓鞘朗革非氏细胞。结论：HHK可能在脊髓损伤后的修复与重建中起作用。     

血浆甘油三酯和三种脂蛋白胆固醇是冠脉粥样硬化程度的独立预报指标

血浆甘油三酯和三种脂蛋白胆固醇是冠脉粥样硬化程度的独立预报指标［英］／ＤｒｅｘｅｌＨ…／／Ｃｒｃｕｌａｔｉｍ．１９９４；９０（５）２２３０～２２３５目的脂蛋白系与动脉粥样硬化有多方面的联系。ＬＤＬ胆固醇和动脉硬化的形成及进展有关。ＨＤＬ胆固醇是具有抗...     

血管性血友病因子裂解酶金属蛋白酶域的克隆和表达

目的:克隆和表达血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)的金属蛋白酶域。方法:应用PCR从含有人vWF-cp金属蛋白酶域的质粒中扩增出该区域,克隆至pUC18载体后行序列分析,并将其重组于带有6×HisTag的融合蛋白表达载体pET28a(+)中,在大肠杆菌DE3／plySs中诱导表达。融合蛋白经Ni-NTA柱纯化后,采用Westernblot印迹鉴定。结果:PCR扩增得到658bp的vWF-cp金属蛋白酶域的基因片段,测序结果与GenBank序列一致。重组表达质粒经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导5h后表达的融合蛋白占菌体总蛋白的28％,进一步纯化后其纯度在95％以上。结论:在大肠杆菌中高效表达了人vWF-cp的金属蛋白酶结构域,为深入研究vWF-cp结构与功能的关系奠定了基础。     

模拟失重对雄性大鼠骨流变特性的测试

目的研究模拟失重对大鼠承重骨流变特性的影响,为航天医学提供模拟失重动物骨流变参数。方法30只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组15只和头低位30°尾吊组(失重模型组)15只。实验第28天时取两组动物股骨进行压缩应力松弛、蠕变实验。结果得出了正常对照组和失重模型组大鼠股骨压缩应力松弛、蠕变数据和曲线,得出了两组大鼠股骨的归一化应力松弛函数,归一化蠕变函数与曲线,以一元线性回归分析的方法处理实验数据,得出了回归系数a、b与c、d值和归一化应力松弛函数G(t)、归一化蠕变函数J(t)表达式,还得出了两组大鼠股骨应力松弛、蠕变与时间的变化规律。结论失重模型组大鼠股骨应力松弛、蠕变量低于正常对照组。     

三叶青藤茎叶药材饮片质量控制研究

目的 建立三叶青藤茎叶药材饮片质量控制方法.方法 采用薄层色谱法鉴别药材饮片;建立其砷盐、重金属杂质限量检查法以及水分、总灰分、酸不溶性灰分检测法;测定其浸出物含量;以异荭草苷为指标性成分,采用NaNO2-Al(NO3)3-NaO H比色法,在500 nm检测波长、优化显色反应条件,控制三叶青藤茎叶药材饮片中总黄酮含量.结果 3批三叶青藤茎叶药材饮片薄层色谱在对照物出现斑点的相应位置显相同颜色荧光斑点,且各成分分离良好;4批三叶青藤茎叶药材饮片水分测定结果为4.05%~6.77%,总灰分6.06%~7.25%,酸不溶性灰分0.64%~1.65%,水溶性浸出物16.00%~27.09%,醇溶性浸出物15.42%~27.07%,砷盐杂质限量<1 ppm,重金属杂质限量<10 ppm;建立的比色法在7.73~61.82μg/mL范围内线性关系良好,回归方程A=1.50×10-2 C-1.78×10-2(r=0.9996),4批三叶青藤茎叶药材饮片总黄酮含量20.83~21.50 mg/g.结论 所建立的薄层色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及总黄酮含量测定法可作为三叶青藤茎叶药材饮片内控质量标准的参考依据.     

PBL教学模式联合微信平台在妇产科实习中的应用

目的探讨PBL结合微信平台在妇产科实习中的应用效果。方法选择西南医科大学临床医学实习生作为研究对象,其中实验组60人,采用基于PBL结合微信平台进行教学;对照组60人,采用传统PBL教学方法进行教学。结果对照组男生的操作成绩、笔试成绩、总成绩均显著低于女生(P<0.05)。实验组的操作成绩、笔试成绩以及总成绩均显著高于对照组(P<0.05),实验组男生以上三类成绩均显著高于对照组男生(P<0.05),实验组女生以上三类成绩也显著高于对照组女生(P<0.05)。实验组教学内容广度好评率、学生接受程度好评率显著高于对照组(P<0.05);实验组男生教学内容广度好评率、学生接受程度好评率均高于对照组男生(P<0.05),而实验组女生的接受程度好评率高于对照组女生(P<0.05)。结论 PBL结合微信平台提高了临床实习教学效果和实习质量,有推广意义。     

补肾调经汤辅助治疗多囊卵巢综合征不孕症的疗效及机制探讨

目的:探讨补肾调经汤辅助治疗多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)不孕症的疗效机制。方法:选择2015年1月—2017年1月本院收治的89例PCOS不孕症患者,随机分为对照组和治疗组,其中对照组44例、治疗组45例。对照组患者给予常规西药治疗,治疗组患者在对照组治疗的基础上给予补肾调经汤辅助治疗,两组患者均给予治疗6个月。评价患者临床疗效、比较两组治疗前后宫颈黏液评分、测量治疗前后子宫内膜厚度、计算治疗前后胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、检测治疗前后血清瘦素(leptin,LP)、睾酮(testosterone,T)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)及雌二醇(estradiol,E_2)水平。结果:治疗组的总有效率为95.56%(43/45),明显高于对照组的79.55%(35/44),差异具有统计学意义(χ~2=5.264,P=0.022)。两组治疗后宫颈黏液评分、子宫内膜厚度、血清E_2水平均较治疗前明显增大,血清LP、T、LH、HOMA-IR均较治疗前明显减小,且治疗组以上各指标改善均明显优于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:补肾调经汤辅助治疗PCOS不孕症的临床疗效显著,能够明显改善子宫内膜厚度,促进排卵和月经恢复,推测与调节代谢和内分泌有关,值得在临床上推广应用。     

hsa-miR-23a-3p靶向TGFβ2对急性淋巴细胞白血病CEM/C1细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响

目的:探究hsa-miR-23a-3p靶向转化生长因子β2(TGFβ2)对急性淋巴细胞白血病细胞株CEM/C1增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响.方法:将CEM/C1细胞随机分为4组:Control组、mimic组、pcDNA-TGFβ2组和mimic+TGFβ2组,采用Li-pofectamine 2000分别转染mimic对照、miR-23a-3p mimic、TGFβ2过表达质粒及共转染miR-23a-3p mimic+TGFβ2过表达质粒.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-23a-3p、TGFβ2表达;荧光素酶报告实验验证miR-23a-3p与TGFβ2的靶向关系;克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭;微管形成实验检测细胞微管形成的结节数;Western blotting法检测 Ki67、Survivin、Caspase-3、Bax、Bcl-2、VEGF 蛋白表达.结果:与 Control 组相比,mimic 组miR-23a-3p表达、细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达量和Bax/Bcl-2比值升高,TGFβ2mRNA表达、克隆形成率、微管形成结节数及Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,侵袭细胞数减少(均P＜0.05),pcDNA-TGFβ2组与mimic组各指标变化相反(均P＜0.05);与pcDNA-TGFβ2组比较,mimic+TGFβ2组克隆形成率、微管形成结节数和Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比值升高,侵袭细胞数减少(均P＜0.05).荧光素酶报告实验证实miR-23a-3p和TGFβ2存在靶向关系.结论:hsa-miR-23a-3p通过靶向下调TGFβ2表达抑制人白血病细胞增殖、侵袭、细胞骨架重组,促进细胞凋亡.     

达格列净联合二甲双胍治疗新发2型糖尿病的疗效及对血清Hcy、Lp(a)水平的影响

2型糖尿病(T2DM)在糖尿病患者中占比最高,其血糖水平呈缓慢升高趋势[1],临床治疗常用药物为二甲双胍。随着T2DM患者的疾病进展,使用单药效果不佳,需联合其他药物进行治疗。达格列净是一种新型的治疗T2DM的药物,其作用机制为通过选择性作用于肾小管近端钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2),抑制葡萄糖重吸收,促进葡萄糖从尿液中排泄,从而降低血糖[2]。本研究旨在探讨达格列净联合二甲双胍治疗T2DM的疗效及对血清同型半胱氨酸(Hcy)、脂蛋白(a)[Lp(a)]水平的影响,报道如下。