银杏叶提取物对哮喘大鼠气道炎性细胞蛋白激酶Cα表达及白细胞介素-4分泌的影响

目的探讨银杏叶提取物（EGh）对哮喘的治疗效果及可能机制。方法48只SD大鼠随机分成：正常对照组（6只）、哮喘组（此组再分为：未处理组，激素处理1、2、4周组，EGb处理1、2、4周组，每组各6只）。采用Wright染色法计数肺泡灌洗液中各类炎性细胞的相对数，免疫组化（SP）法测定蛋白激酶Cα（PKCα）的表达情况，ELISA法测定肺泡灌洗液上清中IL-4的含量。结果哮喘未处理组大鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞（EOS）、淋巴细胞相对计数百分比、PKCα在淋巴细胞和总的细胞中的阳性表达率以及上清液中IL-4含量均显著高于正常对照组（均P〈0．05）。与未处理组比较，激素处理不同时间组前述各指标均明显下降（均P〈0．05）。EGb处理1、2周组各指标明显高于激素处理组（P〈0．05），4周组与激素处理组比较无明显差异。EGb处理1周组除淋巴细胞PKCα阳性表达率外，其余检测指标与哮喘未处理组比较均无明显差异（均P〉0．05），而EGb处理2、4周组相关检测指标均明显下降（均P〈0．05），且随时间延长，下降更明显（P〈0．05）。EGb处理组炎性细胞PKCa阳性表达率与上清液中IL-4、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的相对计数百分比呈显著正相关（r值分别为0．641、0．699、0．625，均P〈0．01，n=18）。结论EGb可减轻气道EOS和淋巴细胞等炎性细胞的浸润以及气道炎性细胞PKCa的阳性表达率和IL-4的分泌量，其作用弱于糖皮质激素，但随着药物治疗时间的延长其药理作用逐渐明显。EGb治疗哮喘的作用可能与其减少炎性细胞PKCa的表达进而降低EOS和淋巴细胞在气道的浸润以及IL-4的浓度有关。     

The Diagnosis Value and Its Implication of Impulse Oscillometry in Obstructive Sleep Apnea Syndrome Patients

Obstructlvesleepapneasyndrome(OSAS)isaverycommondisease,butitspathogeneslswasun-clear.ltwasreportedthatupperairwayanatomicnarrowingplayedanimportantrole.Unfortunately,thetechniqueofmeasuringupperairwaydiameterwasstillunder-matured,sotheupperairwayanatomicnarrowingwasnotwellevaluated.Impulseosclllometry(IOS)wasanew--developedtechniqueofmeasuringlungfunctionandrespiratoryimpedance,whichanalyzedthefrequencyspectrumofrespirationatrestbasedonforcedoscillationprinciple,tomea-surethedifferentcompon…     

烟雾暴露和低氧单独及联合作用对大鼠肺血管重建及蛋白激酶C-α表达的影响

目的探讨烟雾暴露和低氧单独及联合作用对大鼠肺血管重建及蛋白激酶C-α(PKC-α)表达的影响。方法健康雄性W istar大鼠56只,随机分为正常对照组(C组)、烟雾暴露组(S4W组和S8W组)、低氧组(H4W组和H8W组)和烟雾暴露+低氧组(SH4W组和SH8W组),复制大鼠慢性烟雾暴露及低氧模型。右心导管法记录并测定平均肺动脉压(mPAP),分离心脏计算右心室肥厚指数(RVH I)。弹力纤维染色计算腺泡内肺动脉3种类型血管的构成比及肺动脉管壁骨架蛋白(α-SM-actin)染色显示肺血管重建,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)染色检测细胞增殖、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PKC-αmRNA表达,免疫荧光及W estern b lot检测PKC-α蛋白表达。结果与C组大鼠mPAP[(14±4)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa]比较,H4W、H8W、SH4W、SH8W组大鼠mPAP均显著增高[(31±7)(32±8)、(32±9)、(31±10)mm Hg,P均<0.01],而S4W、S8W组均无显著升高[(15±5)、(16±6)mm Hg,P均>0.05]。S4W、S8W、H4W、H8W、SH4W和SH8W组大鼠RVH I(0.258±0.024、0.394±0.021、0.374±0.020、0.414±0.019、0.434±0.023、0.442±0.020)、肌型动脉占血管总数的百分比[(33.5±6.8)%、(41.1±9.8)%、(35.9±6.6)%、(46.0±6.3)%、(42.9±6.5)%、(50.2±9.9)%]及α-SM-actin表达(53±15、75±14、56±11、82±17、83±17、98±16)均显著高于C组(P均<0.01),凋亡指数(2.5±1.0、3.8±1.4、2.3±1.1、3.3±1.1、3.5±1.4、4.8±1.4)和增殖指数(33.1±11.8、43.8±11.0、36.5±10.6、46.3±12.1、45.3±12.4、53.3±13.4)均高于C组(P均<0.01)。肺动脉PKC-αmRNA和蛋白的表达均增强(P均<0.01)。且SH4W、SH8W组各指标分别与H4W、H8W组比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论烟雾暴露和低氧均能诱导肺动脉平滑肌细胞凋亡与增殖,导致肺血管重建,二者协同作用能加重肺血管重建;激活PKC信号转导途径可能是其部分机制。     

共刺激信号与支气管哮喘γδT细胞活化关系的研究

我们之前的研究表明[1,2],γδ T细胞在哮喘支气管肺泡灌洗液(BALF)中明显活化;γδ T细胞可能存在Th1/Th2模式,并表现为Th2样优势应答.为进一步阐明γδ T细胞活化的细胞和分子机制,我们探讨了单核/巨噬细胞(Mon/Mφ)与γδ T细胞间共刺激分子B7∶CD28/CTLA-4( )的改变.材料与方法 2～3月龄雄性Wistar大鼠20只,体重(200±50)g.随机分正常组和哮喘组,每组各10只.哮喘模型的建立、鉴定及标本的收集和处理按方法[1].     

钾通道对人支气管平滑肌细胞增殖与凋亡及其相关基因表达的影响

目的　探讨电压依赖性延迟整流钾通道 (KV)、钙激活钾通道 (KCa)和ATP敏感性钾通道 (KATP)对人支气管平滑肌细胞 (HBSMCs)增殖与凋亡及其相关基因表达的影响。方法　支气管组织取材于 5例肺癌切除术患者癌旁正常的肺组织 ,将培养的HBSMCs分为 4组 :(1)对照组 (用不含药物的无血清培养基处理 ) ;(2 ) 4 氨基吡啶 (4 AP)组 (含 4mmol/L的 4 AP) ;(3)四乙铵 (TEA)组 (含 1mmol/L的TEA) ;(4)格列本脲 (Glib)组 (含 0 1mmol/L的Glib)。采用流式细胞术观察细胞的周期 ;应用荧光光度法检测细胞内钙 ;四甲基偶氮唑盐 (MTT)微量比色分析法检测细胞的增殖 ;原位末端标记法 (TUNEL)检测细胞的凋亡 ;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原 (PCNA)及凋亡相关基因Fas和FasL的表达 ,以观察 3种钾通道阻断剂对培养的HBSMCs增殖及凋亡的影响。结果 (1)对照组HBSMCs吸光度 (A)值为 0 30± 0 0 8,4 AP组为 0 6 7± 0 14 ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;对照组PCNA的阳性率为 (2 3± 5 ) % ,4 AP组为 (89± 7) % ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;对照组细胞内Ca2 浓度为 (98± 7)nmol/L ,4 AP组为 (2 5 5± 17)nmol/L ,两组比较差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;对照组S G2 M期细胞数为 (12 6±     

茶碱对慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞白细胞介素4 mRNA表达的影响

本组研究从转录水平观察ＣＯＰＤ患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)中ＩＬ 4ｍＲＮＡ表达的变化以及茶碱对其影响 ,以期为阐明ＩＬ 4在ＣＯＰＤ发病机制中的作用及探讨茶碱的抗炎作用机制提供实验依据。对象与方法　 1 对象 :(1)ＣＯＰＤ急性加重期[2 ] 患者 30例 ,年龄 45～ 77岁 ,男 2 2例 ,女 8例。其中吸烟者 2 4例 ,不吸烟者 6例 ,吸烟指数 (吸烟指数 =每天平均吸烟支数×年数 ) 15 0～ 96 0年支 ,平均 436年支。近 1周来未用糖皮质激素及 β受体激动剂。将患者按随机单盲法分为 2组 :常规治疗加茶碱治疗组 (茶碱治疗组 )和单纯常规治疗…     

蛋白激酶C对慢性缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道的作用

蛋白激酶C(PKC)在缺氧性肺动脉高压的发病机制中起着重要的作用。但PKC对正常和慢性缺氧肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上电压门控钾离子通道(Kv通道)的影响尚少报道。我们的研究旨在探讨PKC对慢性缺氧PASMC膜上Kv通道的作用，以进一步阐明缺氧性肺动脉高压的发病机制。     

ERK对慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通路在慢性哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)凋亡中的作用及其机制。方法:30只Wistar大鼠分为正常对照组(A组)和慢性哮喘组(B组),用原位末端标记法和Annexin-VFITCPI双染色法观察ASMC凋亡,免疫组织化学法检测bcl-2和bax的表达,Western blot检测caspase-3蛋白的表达,并用ERK激动剂表皮生长因子(EGF)和抑制剂PD98059干预两组ASMC,观察上述指标的变化。结果:与正常对照组ASMC比较,慢性哮喘组ASMC凋亡指数、早期凋亡细胞百分率明显下降。经PD98059干预之后,慢性哮喘组ASMC的凋亡指数与早期凋亡细胞百分率、bax蛋白表达量和caspase-3蛋白含量明显增高,bcl-2蛋白表达量明显降低。经EGF干预之后,慢性哮喘组ASMC凋亡指数与早期凋亡细胞百分率进一步下降,而这一作用可以被PD98059所抑制。结论:慢性哮喘组大鼠ASMC内源性增殖活性增加的同时,伴有凋亡活性下降。ERK1/2参与慢性哮喘ASMC凋亡调控,其机制与bcl-2家族和caspace-3有关。     

营养合剂对正常人吸烟后气道反应性及肺血管反应性升高的抑制作用

营养合剂对正常人吸烟后气道反应性及肺血管反应性升高的抑制作用同济医科大学病理生理教研室同济医院呼吸内科（武汉４３００３０）孔炜李运峰倪望徐永健刘声远吸烟是引起慢性阻塞性肺病、肺心病的常见病因。在其发病机制中气道反应性增高及缺氧性肺血管收缩反应（ＨＰＶ...     

γδT细胞与哮喘特异性致敏原皮下脱敏疗法的研究

目的　探讨支气管哮喘γδT细胞与特异性致敏原脱敏疗法的关系 ,了解γδT细胞在哮喘发病机制中的作用。方法　应用卵清蛋白 (OVA)致敏并刺激Wistar大鼠 ,制作致敏大鼠哮喘模型 ;再用OVA皮下注射脱敏 ;观察脱敏前后OVA激发反应 ,测定气道反应性 (PC50 ) ;肺组织切片做HE染色观察炎症改变和做原位杂交检测IL 4mRNA和IFN γmRNA表达 ,并采用免疫组化法检测肺组织中γδT细胞数量 ;用ELISA法检测血清IL 4和IFN γ浓度 ,用流式细胞术检测PBMC和支气管肺泡灌洗液 (BALF)中γδTCR阳性T细胞百分率。结果　在脱敏组 (C组 ) ,用脱敏前激发浓度的OVA激发不再有明显哮喘发作 ,支气管肺内嗜酸细胞 (Eos)消失、过敏性炎症消除 ,其PC50 与对照组 (即D组和E组 )比较差异均有显著性 (均为P <0 .0 1)、而与正常组 (即A组 )比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;C组肺内IL 4mRNA表达及血清IL 4浓度均明显低于D、E组 (均为P <0 .0 1) ,而C组肺内IFN γmRNA表达及血清IFN γ浓度均明显高于A、D、E组 (均为P <0 .0 1) ;与此同时 ,C组肺组织内及BALF中γδT细胞数量则明显低于D、E组 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论　特异性致敏原皮下脱敏疗法能纠正哮喘TH1 TH2反应失衡 ,同时伴随肺内及外周血γδT细胞异常分布的恢复 ,提示γδT