腹腔镜手术中经脐缘穿刺与经脐孔基底垂直穿刺气腹的对比研究

目的探讨在腹腔镜手术中用Veress针经脐孔基底垂直穿刺气腹是否比经脐缘穿刺气腹更为容易操作成功和安全。方法 2010年1月至2011年9月间选取360例确定行腹腔镜手术的患者按手术时间先后排序,排在奇数位的分入A组,排在偶数位的分入B组,每组各180例;A组患者行经脐孔基底垂直穿刺气腹,B组患者行经脐缘穿刺气腹;由36位腹腔镜手术初学者进行穿刺气腹操作,其中每位初学者按手术先后顺序交替穿刺A组与B组患者各5例。观察两组患者的临床资料、穿刺次数、成功率、术中及术后并发症率。结果两组患者在年龄、性别、体重指数、病因等方面比较差异无统计意义(P=0.843、0.526、0.149、0.414)。两组患者的总穿刺成功率、1次穿刺次数成功率、穿刺相关并发症差异有统计学意义(χ2=6.464、12.085、4.595,P=0.011、0.001、0.032)。A组的总穿刺成功率及1次穿刺次数成功率高于B组,A组的穿刺相关并发症少于B组,在体重指数高于25kg/m2的患者中尤为显著。结论用Veress针经脐孔基底垂直穿刺气腹比经脐缘穿刺气腹更为容易操作成功和安全,特别是对肥胖患者,是刚开展腹腔镜手术医生的理想穿刺气腹方法。     

肠减压后腹腔镜辅助右半结肠切除术在右半结肠癌伴肠梗阻中的应用

目的 探讨肠减压后腹腔镜手术与传统开腹手术在右半结肠癌并急性肠梗阻中的可行性与疗效.方法 回顾性分析2019年1月至2020年6月在该院普通外科就诊的53例急性右侧梗阻性结肠癌患者的病历资料.入选患者术前腹部立位平片及腹部CT均明确提示为右半结肠癌伴肠梗阻,不减压均无法建立腹腔镜操作空间,术后病理证实为结肠癌.根据其手术方式分为肠减压后联合入路翻页式腹腔镜辅助右半结肠癌根治术组(腹腔镜组,n=22)和传统开腹手术组(传统开腹组,n=31).比较两组患者的一般资料、手术时间、出血量、切口长度、肛门排气时间、术后住院时间及术后并发症的差异.结果 两组患者基线资料比较差异无统计学意义(P＞0.05).腹腔镜组、传统开腹组患者术中出血量分别为(24.48±7.57)、(69.00±12.87)mL,切口长度分别为(6.80±0.56)、(18.55±1.32)cm,肛门排气时间分别为(40.85±3.60)、(68.43±3.04)h,术后住院时间分别为(6.41±1.74)、(11.71±1.40)d,两组患者上述指标比较差异均有统计学意义(P＜0.05).腹腔镜组、传统开腹组患者手术时间分别为(171.47±9.01)、(185.18±9.40)min,两组患者手术时间及术后并发症(手术切口感染率、吻合口瘘、腹腔内出血、腹腔感染)比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 对右半结肠癌并急性肠梗阻患者采用肠减压后联合入路翻页式腹腔镜辅助右半结肠癌根治术具有创伤小、安全、有效等优势.     

含VEGFP驱动双自杀基因重组腺病毒的制备及其体外抑瘤作用的观察

目的:应用AdEasier1系统高效制备含血管内皮生长因子启动子(vascular endothelial growth factor promoter,VEGFP)驱动双自杀基因的重组腺病毒,并观察其体外肿瘤杀伤作用。方法:首先,用NotⅠ和XhoⅠ切下pEGFP1SVVEGFP上的VEGFP,亚克隆至pAdtrack构建pAdtrackVEGFP;再分别以JM109细菌和pREP8TK为模板,PCR扩增出CD和TK基因片段,亚克隆到中间载体pcDNA3构建含CDglyTK融合基因的pcDNA3CD/TK。用HindⅢ和PvuⅡ酶切,回收纯化含polyA的片段CDglyTKpA,插入pAdtrackVEGFP构建转移质粒pAdtrackVEGFPCD/TK,经PmeⅠ线性化后转化AdEasier1细菌。用25μg/mL卡那霉素筛选阳性克隆,先后进行琼脂糖电泳和PacⅠ酶切鉴定,筛选出正确重组腺病毒质粒pAdEasyVEGFPCD/TK,经293细胞包装、扩增获得重组腺病毒AdVEGFPCD/TK,行PCR鉴定。通过测定细胞克隆形成率和细胞生存率观察重组腺病毒对体外培养的LOVO细胞的毒作用。结果:包装扩增后重组腺病毒的滴度为3.2×1011病毒颗粒/mL,PCR扩增结果与预期相符。在前药5氟胞嘧啶(5fluorocytosine,5FC)和更昔洛韦(ganciclovir,GCV)存在下,重组腺病毒对LOVO具有明显杀伤作用,细胞克隆形成率和细胞生存率都明显下降。结论:应用AdEasier1系统可以成功制备含VEGFP驱动CD/TK自杀基因的重组腺病毒,该重组体具有明显的肿瘤杀伤作用。     

Ad-KDR-CDglyTK双自杀基因系统对荷瘤鼠胃癌体内抑制实验

目的:探讨KDR启动子驱动双自杀基因体系对荷瘤鼠胃癌的体内抑瘤作用.方法:建立胃癌移植瘤动物模型,当肿瘤直径达0.5 cm时,随机分为A组:空白对照,不施加任何处理;B组:注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTK与前药5-FC和GCV;C组:仅注射重组腺病毒AdKDR-CDglyTK;D组:仅注射前药5-FC和GCV.治疗过程中绘制肿瘤生长曲线,观察该治疗体系的体内抑瘤效应;通过RT-PCR检测肿瘤组织内融合基因的表达;采用免疫组化行微血管密度检查.结果:接种肿瘤细胞后13d,裸鼠出现右臀区皮下瘤结节.治疗结束后A、B、C、D组间瘤质量差异有统计学意义(F=12 727.42,P=0.000),B组明显缩小.重组腺病毒转基因荷瘤鼠胃癌组织内可检测到CDglyTK融合基因产物的表达.肿瘤组织的MVD值在A、B、C、D组之间差异有统计学意义,F=27.04,P=0.000.结论:KDR启动子驱动双自杀基因体系对裸鼠皮下移植瘤有明显的抑瘤作用,表现为肿瘤的生长抑制和瘤体微血管密度减少等.     

影像三维重建在直肠肿瘤诊治中的作用

目的:探讨直肠肿瘤患者进行直肠肿瘤数字解剖模型构建及三维图像构建的临床价值方法:搜集直肠癌和直肠息肉患者36例,行肠道准备后使用CT进行薄层扫描及数字模型构建;手术后取患者病理标本,将二者结果进行对比.结果:病变部位主要表现为局部突起、凹陷及肠管狭窄,可用于分析肿痛与周围结构的相互有关系,重建的三维图像与直肠肿瘤大体标本一致性较高.结论:此方法可以帮助临床医生更好地理解肿瘤的整体形态,更好地分析其与周围重要结构的毗邻关系,有利于指导手术的顺利进行.     

绍兴市越城区2008—2011年手足口病流行特征分析

目的通过对绍兴市越城区2008年—2011年手足口病监测数据的流行病学特征分析,为该区手足口病科学合理的预防控制提供参考。方法采用描述性流行病学方法,对来自中国疾病预防控制信息系统及越城区2008年—2011年手足口病监测数据进行分析。结果 2008年—2011年手足口病新发发病率依次为87.6/10万、102.0/10万、226.9/10万、121.9/10万;发病高峰为4～7月;1～岁、2～岁、3～岁、4～岁四个年龄组发病例数共占79.2%;男女儿童比例1.6∶1;散居儿童和托幼机构为主要发病群体。结论绍兴市越城区手足口病发病高峰为春末夏初,加强对5岁以下儿童手足口病的防控工作,流动人口聚居区散居儿童、托幼机构是防控的重点。     

聚酰胺纳米分子介导survivin反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞凋亡

背景:传统的病毒载体及非病毒载体在基因治疗中均存在明显的缺点,采用纳米材料作为反义寡核苷酸载体有望获得更好更安全的基因转导,提高基因治疗的有效性和安全性.实验拟采用聚酰胺纳米分子介导反义寡核苷酸阻断survivin表达,诱导大肠癌凋亡.目的:探讨聚酰胺树形分子高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligonucleotide,survivin-asODN)转染结直肠癌SW620细胞的可行性以及对结直肠癌SW620细胞survivin表达、细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:肿瘤基因治疗体外实验,于2007-09/2008-05在上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米工程研究室及南方医科大学珠江医院中心实验室完成.材料:人结直肠癌细胞株SW620购自中国科学院上海细胞研究所,聚酰胺树形分子由上海交通大学微纳米研究院生物纳米工程研究室崔大祥教授提供,转染试剂脂质体LipofectamineTM 2000购自美国Invitrogen公司.survivin-asODN由上海生工公司合成.方法:采用300 μg/L survivin-asODN和4.06 μg/L聚酰胺制备聚酰胺反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照.透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的的包封率、载药率和体外DNA释放速度.将上述两种基因转染复合物转染结直肠癌细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后细胞中survivin蛋白的表达:流式细胞术检测两组细胞的凋亡率.主要观察指标:阳离子脂质体-survivin-asODN复合物及聚酰胺-survivin-asODN复合物的粒经,zeta电位,基因载药率,包封率,释放率,转染后survivin表达率及对凋亡的诱导率.结果:聚酰胺-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径(P<0.01),但zeta电位高于后者(P<0.05);基因载药率、包封率两组差异无显著性意义:聚酰胺对DNA持续释放14 d,但脂质体只持续5 d.聚酰胺-survivin-asODN转染结直肠癌细胞的效果强于脂质体survivin-asODN(P<0.05).转染后结直肠癌细胞survivin蛋白的表达低于脂质体复合物(P<0.05),细胞的凋亡率高于脂质体复合物(P<0.05).结论:聚酰胺能将survivin-asODN高效递送到结直肠癌SW620细胞,降低survivin蛋白表达并诱导结直肠癌细胞凋亡.     

单孔腹腔镜全腹膜外操作与开放式腹股沟疝无张力修补术的对比研究

目的比较单孔腹腔镜全腹膜外操作与开放式腹股沟疝无张力修补术的临床治疗效果。方法回顾性分析我院2015年1月~2015年6月收治的50例男性单侧腹股沟疝患者的临床资料,年龄18~63岁,中位年龄37岁,所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。患者术前均经超声及临床体格检查,确诊为腹股沟疝。21例行单孔腹腔镜全腹膜外腹股沟疝无张力修补术,29例行开放无张力疝修补术治疗,比较两种术式的手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后并发症、术后24小时及慢性疼痛(1月以上)、总住院费用等临床疗效。结果单孔腹腔镜组手术时间、术中出血量、术后平均住院时间及术后24小时疼痛率显著低于开放组,差异有显著性(P0.05);而在总住院费用方面,开放式腹股沟疝无张力修补术组显著低于SILS-TEP组,差异有显著性,有统计学意义(P0.05);而二者在慢性疼痛(1月以上)和术后并发症方面没有显著性差异(P0.05)。结论采用单孔腹腔镜全腹膜外腹股沟疝无张力修补术的患者术后恢复较好,临床效果明显优于开放性无张力修补术。     

免气腹与气腹式腹腔镜手术对比

1材料和方法 作者利用自行设计研制成功的免气腹装置一机械式腹壁悬吊器[1]完成42例免气腹腹腔镜手术,包括胆囊切除术34例、肝囊肿开窗术3例、疝修补术2例、精索静脉曲张结扎术3例,其中6例有上腹部手术史.均采用连续硬膜外麻醉.手术方式:脐下横切口1.5 cm,切开腹壁各层,直视下进腹,置入腹壁提拉器,连结免气腹装置,提拉前腹壁10 cm～15 cm,制造手术空间,完成腹腔镜手术操作.选取同期完成的气腹式腹腔镜手术45例做对比,包括胆囊切除术44例、胃穿孔修补术1例.均采用全麻,其中2例有下腹部手术史.利用CO2气体注入腹腔,压力阀值2 kPa,制造手术空间,完成腹腔镜手术.     

Ad-VEGFP-CD/TK系统抑制乳腺癌细胞增殖的体内外实验研究

目的 探讨腺病毒介导VEGF启动子驱动的CD/TK双自杀基因体系(Ad-VEGFP-CD/TK)对乳腺癌细胞MCF-7的体内外靶向杀伤作用.方法 用重组腺病毒Ad-VEGFP-CD/TK体外感染表达VEGF的MCF-7细胞和不表达VEGF的原代培养的乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察其感染率,然后给予前药GCV和5-FC,用MTT法观察该体系对细胞生长增殖的影响及其旁观者效应;用流式细胞术观察细胞周期及细胞内DNA含量的变化.建立MCF-7裸鼠皮下移植瘤模型,瘤内注射Ad-VEGFP-CD/TK,腹腔注射前药14 d,观察肿瘤生长抑制效应.结果 腺病毒对两种细胞的感染率相似.MTT法检测显示MCF-7细胞对前药具有较高的敏感性,而乳腺上皮细胞对前药不敏感,且观察到该体系对MCF-7细胞明显的旁观者效应.在感染复数为100时,用流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰;细胞周期分析显示治疗后细胞G0-G1期比率增多,G2-M及S期细胞减少.在MCF-7裸鼠移植瘤模型中,该双自杀基因系统能够显著抑制肿瘤的生长.结论 VEGF启动子可调控双自杀基因体系选择性杀伤人乳腺癌细胞MCF-7并诱导细胞凋亡,并可显著抑制人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长.