流感嗜血杆菌脉冲电场凝胶电脉法分型研究

为了解北京儿童医院流感嗜血杆菌（Hi)抗生素耐药菌株和b型菌株（Hib)的分子流行病学情况，采用脉冲电场凝胶电泳9PFGE）方法，对1999年和2000年分离的氨苄青霉素，头孢菌素耐药株，b型流感嗜血杆菌菌株和随机选取的非b型抗生素敏感菌株进行分型。结果显示，20株Hi菌株得到19种不同PFGE带型。1999年3株氨苄青霉素耐药菌株中有2株仅有一条带的差别；4株Hib菌株中，2株带型完全相同，与另1株有一条带的差别；2株头孢菌素耐药株有各自不同带型。2000年所有菌株带型各异，提示1999年从肺炎病人鼻咽部分离的氨苄青霉素耐药及Hib菌株多为流行病学相关菌株；2000年从上呼吸道感染儿童鼻咽部分离的氨苄青霉素耐药及Hib菌株无流行病学相关性。需要进一步监测方能确定有无耐药及Hib菌株流行，PFGE是对Hi进行流行病学研究的最佳工具之一。     

低频限制性位点聚合酶链反应研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的暴发流行

目的：探讨院内感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）流行状况,了解流行株耐药状况。方法：用K-B纸片法检测21株院内感染金黄色葡萄球菌耐药状况,建立本实验室低频限制性位点聚合酶链反应（IRS-PCR）分型方法。应用IRS-PCR对21株金黄色葡萄球菌进行基因分型。结果：21株菌经药敏实验分出6个耐药表型a～f,其中a型12株,均为多重耐药的MRSA。21株菌经IRS-PCR分为6个基因型A～F,其中A型12株来自烧伤病房,B、C、D、E、F型来源于重症监护室。结论：MRSA多为多重耐药,交叉感染是MRSA流行的主要原因。IRS-PCR能对金黄色葡萄球菌简易快速可靠分型。     

儿童患者中肠球菌属临床分离株耐药特征分析

目的了解儿童患者临床分离肠球菌属的耐药特征，指导临床合理用药。方法测定11种抗菌药物对158株肠球菌的MIC，Nithocefin纸片法检测B内酰胺酶，数据用WHONET5．3软件分析处理。结果158株儿童临床分离肠球菌中，粪肠球菌、屎肠球菌、坚韧肠球菌、鸟肠球菌和海氏肠球菌分别占56．3％、39．9％、1．3％、1．3％和1．3％；屎肠球菌对氨苄西林、阿莫西林-克拉维酸和环丙沙星的耐药率分别为96．8％，95，2％和84．1％，粪肠球菌对上述3种抗菌药的耐药率分别为23．6％，18％和49，4％，屎肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌（P〈20，001）；粪肠球菌出现2株万古霉素MIC为8mg／L的耐药菌，粪肠球菌和屎肠球菌对替考拉宁全部敏感。儿童患者中多重耐药肠球菌属菌株占88．6％。结论儿童患者肠球菌属的耐药状况十分严重，尤其屎肠球菌对B内酰胺类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药耐药率很高。     

巢式聚合酶链反应技术在流感嗜血杆菌b型检测中的应用

目的评价巢式聚合酶链反应（nested—PCR）技术在b型流感嗜血杆菌（Hib）检测中的应用价值，估计氨苄西林耐药Hi中b型的比率。方法对2000-2003年北京、上海、广州细菌监测项目中，呼吸道感染儿童鼻咽部分离培养的899株Hi，用E试验法检测氨苄西林耐药情况后，用nested-PCR与玻片凝集法对氨苄西林耐药菌株进行b型检测。结果检出74株氨苄西林耐药Hi。nested—PCR与玻片凝集法检测Hib的结果一致，74株氨苄西林耐药Hi中有2株为Hib，约占2．7％。结论nested—PCR b型荚膜检测方法可作为玻片凝集法的一个重要补充。3地4年内呼吸道感染的儿童鼻咽部携带的氨苄西林耐药Hi中，Hib的比率处于相对较低的水平。     

肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因多态性与其青霉素敏感性的关系

目的探讨肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因（pbps）多态性与青霉素敏感性的关系。方法以包括63株青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）和69株青霉素敏感菌（PSSP）共132株菌为研究对象，浓度梯度（E-test）法检测青霉素最低抑菌浓度（MIC），PER法扩增pbpEb、pbp2x和pbpla，分析其限制性片段长度多态性（RFLP）。结果pbpla有9种型，其中两种见于PSSP和部分PNSP菌株，其他7种主要见于青霉素MIC值≥0．25μg／ml的菌株（21／22）。pbp2b有10种型，其中3种型见于PSSP和部分PNSP菌株，其他7种主要见于青霉素MIC≥0．25μg／ml的菌株（20／22）。pbp2x谱型31个，PSSP菌株中有17种，其中13种仅见于PSSP菌株；余下14种只存在于PNSP（35株）。pbp1a、pbpEb和pbp2x组合的pbps型共47种，PSSP菌株中23种，其中17种仅存在于PSSP；其他24种仅见于PNSP（36株）。根据pbp1a或pbp2b基因型判断青霉素敏感，虽然敏感度高，但特异度较低（〈50％），准确性也较低；根据pbp2x或pbps基因型判断，敏感度、特异度和准确性均在85％以上。结论肺炎链球菌青霉素耐药主要与PBP1a、PBP2b和PBP2x变异有关；根据肺炎链球菌pbps基因多态性，可快速准确地判断其青霉素敏感性。     

不同血清型肺炎链球菌对非β内酰胺类抗生素的耐药性

目的了解不同血清型的肺炎链球菌对非β内酰胺类抗菌药物的耐药特点。方法以2000—2002年于北京、上海和广州3所儿童医院门诊分离的625株肺炎链球菌为研究对象,应用简易棋盘式肺炎链球菌分型系统分析血清型;采用E试验(青霉素和红霉素)和K-B纸片扩散法(复方磺胺甲噁唑、四环素和氯霉素)检测菌株对抗菌药的敏感性。结果常见的血清型/群为19群、23群、6群和14型。常见血清型菌株对红霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑不敏感率均明显高于其他少见血清型和不能分型组。青霉素不敏感菌(PNSP)对红霉素和复方磺胺甲噁唑的不敏感率明显高于青霉素敏感菌(PSSP);不能分型的PNSP对红霉素和复方磺胺甲噁唑的不敏感率也明显高于PSSP;19群的PNSP红霉素和四环素不敏感率明显高于PSSP,氯霉素耐药率明显低于PSSP;23、6、14和其他少见血清型/群菌株PNSP和PSSP之间,各抗菌药物不敏感率差异并无统计学意义。结论常见的19、23、6和14型/群肺炎链球菌对红霉素、复方磺胺甲噁唑和四环素耐药率高于其他少见血清型和不能分型菌株,PNSP与PSSP对部分非β内酰胺类抗生素不敏感率的差异可能与血清型分布有关。     

中国儿童A族链球菌感染相关疾病的诊断、治疗与预防专家共识

A族链球菌(Group AStreptococcus, GAS)是最常见的病原体之一, 尤其对于儿童。在全球范围内, GAS感染是导致发病和死亡的重要原因。但GAS造成的疾病负担在我国尚未知, 也未得到足够的重视。为此, 本专家共识在儿童GAS疾病诊断、治疗和预防方面进行了全面阐述, 涵盖了呼吸病学、感染病学、免疫学、微生物学、心脏病学、肾脏病学、重症医学和预防医学的相关方面, 旨在改善中国儿童GAS疾病的管理策略。     

A族链球菌感染的诊断

A族链球菌(GAS)在传统临床实践中又常称为化脓性链球菌, 为β-溶血性链球菌。它是链球菌属中最重要的致病菌。GAS感染及其后遗症对儿童和青年健康影响最大, 一直是困扰公共健康和国民经济的严重问题。本文目的是提倡早期、快速、准确诊断GAS感染, 以便降低疾病严重程度, 指导合理使用抗生素, 达到最佳成本效益。     

头孢地尼对5种常见致病菌的体外抗菌活性研究

目的观察头孢地尼对5种儿童常见社区获得性感染致病菌的体外抗菌活性.方法以头孢克洛作为对照,采用E-test法对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌、卡他莫拉菌和流感嗜血杆菌进行体外最低抑菌浓度(MIC)测定.结果头孢地尼对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、青霉素敏感肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌(包括β-内酰胺酶阴性和β-内酰胺酶阳性菌株)的MIC90值均小于1mg/L,其抗菌活性优于头孢克洛.结论头孢地尼对革兰阳性菌和革兰阴性菌均有广泛的抗菌作用,对产酶的细菌也有较好的抗菌活性.     

Nasal carriage of Streptococcus pneumoniae among children in Beijing

目的　了解北京地区儿童鼻部携带的肺炎链球菌对抗生素的敏感性以及血清型分布 ,分析鼻部携带青霉素非敏感肺炎链球菌的危险因素。方法　用纸片扩散法检测肺炎链球菌对红霉素 ,复方新诺明 ,氯霉素和四环素的敏感性 ;E -试验确定青霉素 ,头孢呋新 ,头孢噻肟 ,安灭菌和亚胺培南的最小抑菌浓度 ;Quellung反应确定肺炎链球菌的血清型。结果　未发现对青霉素和头孢呋新高度耐药的肺炎链球菌 ,但对青霉素和头孢呋新中度耐药的肺炎链球菌分别占 8 2 %和 2 1%。所有菌株均对头孢噻肟 ,安灭菌和亚胺培南敏感。对红霉素 ,复方新诺明和四环素耐药的肺炎链球菌特别多 ,分别占 72 % 70 %和 79%。所有肺炎链球菌中 ,有 5种血清型 (19,6 ,14 ,2 3,17)共占 5 4 7% ,不定型占 2 0 6 %。既往中耳炎病史是鼻部携带青霉素非敏感肺炎链球菌的危险因素。结论　连续监测肺炎链球菌对抗生素的敏感性具有重要意义。需要进行更大规模的研究以明确目前的 7价或 9价肺炎链球菌结合疫苗是否适合中国儿童