2000至2002年北京儿童中青霉素不敏感肺炎链球菌的血清型分布和同源性研究

研究表明青霉素不敏感肺炎链球菌（peniciHinnonsusceptible Streptococcus pneumoniae，PNSP）的克隆传播是其流行的重要因素，我们也证实克隆传播是北京地区PNSP流行的重要因素。进一步血清分型可为抗生素耐药性和流行克隆分析提供更多信息，为推广接种疫苗预防PNSP感染和控制其传播提供依据。     

基因多态性分析在凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定中的应用

凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase-negative Staphylococcus，CNS）是定居在人体皮肤和黏膜表面的正常菌群。随着大量介入性医疗技术的发展和广谱抗生素的应用，CNS已成为儿科医院感染性疾病最常见的致病原，尤其是抵抗力低下的新生儿败血症的常见病原。因此，建立快速及可靠的菌种鉴定方法，对于早期预测每一种临床细菌菌株的潜在致病性或抗生素的敏感性是非常必要的。     

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目的探讨细胞间粘附基因(ica)A和icaD在新生儿凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)败血症中的诊断意义。方法收集北京儿童医院新生儿病房2001年11月至2003年3月间血培养为CNS的患儿为研究入选病例。通过应用聚合酶链反应(PCR)方法检测icaA及icaD的存在。结果在80例入选患儿中,血培养均分离出CNS。根据新生儿败血症的诊断标准,临床诊断败血症27例(33.8%),其中早产儿7例,足月小样儿2例。在菌种的分布上,表皮葡萄球菌18例(66.7%),溶血葡萄球菌7例(25.9%),人葡萄球菌2例(7.4%)。对90株CNS菌株应用PCR方法检测icaA及icaD,共有8株阳性,均为表皮葡萄球菌,并且icaA和icaD同时阳性。在经PCR扩增后所产生的图谱中,icaA在814bp,icaD在282bp。在ica阳性的8例病例中,临床诊断为败血症7例,一致率为87.5%,在临床排除败血症的53例患儿中,仅有1例ica阳性(1.8%)。ica的阳性预测值为25.9%,阴性预测值为98.1%。结论ica基因PCR检测是临床诊断CNS败血症或导管相关感染的一种潜在的实验室方法。     

5岁以下儿童门诊呼吸道感染常见病原携带及抗生素耐药的流行病学特征调查

目的　了解 5岁以下儿童呼吸道感染肺炎链球菌 (SP)、流感嗜血杆菌 (HI)、卡他莫拉菌 (M .Cat)携带株的流行病学特征、耐药情况及其影响因素。方法　对 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 3年 5月在北京儿童医院内科门诊就诊的≤ 5岁呼吸道感染儿童进行随机选择问卷调查 ;采鼻咽拭子标本 ;培养、分离、鉴定SP、HI,其中对 2 0 0 2年 1月至 2 0 0 3年 5月的标本同时进行了M .Cat的分离 ;用E test、K B法检测SP、HI对抗生素的敏感性 ,用琼脂扩散法检测M .Cat的药物敏感性 ;评价年龄、居住地、入托、抗生素使用、诊断对病原携带及其耐药株的影响。结果　本文≤ 5岁儿童呼吸道感染SP、HI、M .Cat的携带率分别为 2 8 6%、2 8 3%、1 5 8%。SP青霉素耐药率为 2 3 3% ,HI氨苄青霉素的耐药率为 1 0 2 % ,M .Cat对氨苄青霉素的耐药率高达 90 3%。影响病原携带、抗生素耐药的主要因素有年龄、入托、抗生素使用。结论　≤ 5岁儿童呼吸道感染携带病原菌株耐药率快速上升 ,抗生素使耐药菌株携带率增高 ,因而合理使用抗生素非常重要。     

A族链球菌细菌学及其感染的诊断

一、链球菌概况链球菌广泛分布于自然界和动物体内,可长期寄居于人体鼻咽部和肠道中。为革兰阳性菌,呈球状或卵圆形,直径约为0.5～1.0μm,排列呈链状,长短不一,可由4～8至20个以上细菌组成,触酶反应呈阴性,为需氧或兼性厌氧菌,对营养要求较高。链球菌种类繁多,其分类方法目前尚未统一。根据溶血能力分为α、β、γ溶血性链球菌,又称之甲型、乙型、丙型溶血性链球菌。根据细菌生长繁殖是否需氧分为需氧、厌氧、微嗜氧链球菌。根据链球菌胞壁所含多糖(C抗原)的不同分为A～V等20族(其中缺I和J),称之族特异性抗原(Lancefield分型)。对人类有…     

四家儿童医院住院肺炎病例肺炎链球菌分离株的耐药性监测

目的：了解从我国住院肺炎儿童分离的肺炎链球菌对抗菌药物的敏感性状况,为临床用药提供依据。方法：肺炎链球菌分离自2006年2月~2007年2月在北京、上海、广州和深圳4家儿童医院住院的肺炎患儿,采用E试验法检测菌株对8种抗生素的敏感性。结果：279株肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为86.0％,耐药率达23.3％。在检测的β内酰胺类抗菌药物中,肺炎链球菌对阿莫西林还保持着很高的敏感率（92.1％）,对头孢呋辛和头孢曲松的敏感率分别为19.0％和75.3％。几乎全部菌株（99.6％）对红霉素耐药。万古霉素和氧氟沙星的敏感率分别为99.6％和97.8％。17.6％的分离株对亚胺培南不敏感,以中介株为主。不同地区分离的肺炎链球菌对红霉素、万古霉素和氧氟沙星的敏感状况没有明显不同,但对其他几种抗菌药物的敏感性状况存在差异。结论：从肺炎住院儿童分离的肺炎链球菌对阿莫西林、万古霉素和氧氟沙星敏感率高,对头孢曲松和亚胺培南比较敏感,对青霉素、头孢呋辛和红霉素普遍不敏感或耐药。     

双重染色免疫荧光法评价选择性IgA缺乏症的B细胞成熟度

选择性IgA缺乏症(SIgAD)的发病机理至今尚未十分明确。本研究力图探讨SIgAD患者B细胞分化受阻的阶段。5例患者血清IgA均少于5mg/dl。以RITC抗IgA荧光抗体和FITC抗IgD或IgM荧光抗体采用免疫荧光技术对患者外周血淋巴细胞进行双重染色。以正常成人作为对照测定B细胞的数量和表型。结果显示患者的IgA-B细胞百分数较成人低。大多数TgA-B细胞不同于成人,多同时表达表面IgM、IgD和IgA。这说明SIgAD患者的IgA-B细胞成熟受阻于分化的早期阶段。     

分离肺炎链球菌主群与耐药亚群的简易方法

目的：研究分离肺炎链球菌苯唑西林(OX)纸片清晰抑菌环内散在克隆与产生清晰抑菌环的主要克隆的简易方法。方法：以OX纸片清晰抑菌环内存在散在克隆的4株临床分离株R0137、S1039、R1284和R2034为研究对象。用常备的药敏培养基和OX纸片尝试分离散在克隆和主要克隆，并以青霉素结合蛋白基因(pbp)pbp1a、pbp2b和pbp2x限制性片段长度多态性(RFLP)分析和盒式一聚合酶链反应(BOX-PCR)菌株亲缘关系鉴定研究所分离菌株问的关系。结果：于同一菌株分离出的克隆OX纸片药敏检测结果均不一致；除S1039外，青霉素E test检测结果也不一致。从R0317、S1039各分离出2株．2株间pbp酶切图谱相同，BOX-PCR属于同一型；而从R2034分离出的2株，pbp酶切图谱与BOX-PCR均不相同；从R1284分离出3个具有不同药敏表型的克隆，其中2株pbpla和pbp2b酶切图谱相同，BOX-PCR属于同一型；另外1株pbp2b酶切图谱与前2株相同，而pbpla和pbp2x不同，BOX-PCR属于不同型。结论：用药敏培养基和药敏纸片可成功分离不同耐药水平的混合菌株，方法简单易行。对所分离的菌株的分子生物学研究可能揭示自然过程中耐药基因逐步变异的特征。     

中国儿童侵袭性肺炎链球菌耐红霉素株的流行病学特征

目的:检测中国儿童侵袭性肺炎链球菌耐红霉素株的耐药基因,并分析其流行病学特征。方法：对2006-2008年间从全国11个医疗中心收取的,共171株侵袭性肺炎链球菌株进行血清分型和药敏试验。对其中耐红霉素株进行耐药基因检测、多位点序列分析和脉冲场凝胶电泳分析。结果：共有164株(95.9%)对红霉素耐药,除了2株细菌以外都呈现出高水平耐药(MIC≥256μg/ml)。其中有104(63.4%)株只携带ermB基因,59(36.0%)株同时携带ermB和mefA基因,仅1株细菌单独携带mefA基因。同时携带2个耐药基因的血清型主要是19A和19F,它们都显示同样的PFGE形式（C型）。结论：中国儿童的侵袭性肺炎链球菌红霉素耐药率很高,其主要的耐药机制是由ermB基因介导的。同时携带ermB 和mefA两种耐药基因的血清型主要是19A和19F,它们与Taiwan19F-14 克隆具有遗传相关性。