肺炎链球菌耐药性和血清型分布及隐匿性耐药克隆株的研究

目的 了解儿童肺炎链球菌携带者耐药菌株的流行情况,比较携带者菌株血清型与肺炎链球菌结合疫苗血清型的符合率,寻找单个患儿同时携带第三和耐药菌株的可能性。方法 （１）对１９９７年１１月～１２月在北京儿童医院普通门诊登记的３个月～５岁儿童进行问卷调查;（２）采集鼻咽拭子和尿标本,培养、分离和鉴定肺炎链球菌,并测定尿标本中的抗生素活性;（３）根据ＮＣＣＬＳ方法使用微量稀释法测定肺炎链球菌对青霉素、头孢呋新     

上呼吸道感染患儿肺炎链球菌血清群/型及耐药分析

目的了解患上呼吸道感染的0~5岁儿童肺炎链球菌的血清群/型及其对抗生素耐药情况。探讨肺炎链球菌疫苗在中国儿童使用的意义。方法取患儿鼻咽分泌物,分离出137株肺炎链球菌。采用荚膜肿胀法(Quellinngtest)进行血清群/型分析。E-test及K-B纸片扩散法检测对青霉素等13种抗生素的敏感性。结果疫苗相关血清型占63%,最常见的血清群/型为19、6、23、14。青霉素不敏感率为33%,较往年增高。青霉素耐药菌株对头孢类抗生素有交叉耐药性,红霉素、阿奇霉素耐药率达94%,应引起临床高度重视。结论疫苗相关血清群/型在0~5岁儿童覆盖率较高,肺炎链球菌疫苗的使用有利于降低儿童肺炎链球菌感染的发病率,有助于减少抗生素耐药的产生。     

分子生物学方法在新生儿肺炎死亡病例大肠埃希菌的检测应用

目的探讨新生儿重症肺炎死亡病例中大肠埃希菌(E.coli)感染的地位。方法收集北京儿童医院新生儿重症肺炎组200例和非感染性疾病(对照组)34例的尸检病理标本,应用PCR和Southern blot技术检测E.coli特异性uidA基因片断,并复习患儿临床资料。结果肺炎组中,PCR和Southern blot对E.coli检出率明显高于对照组(PCR:5.0% vs. 0,掊2=11.37,P0.01;Southern blot:21.5% vs. 5.9%,掊2=4.56,P0.05);晚发型肺炎E.coli检出率明显高于早发型(PCR:8.2%vs.1.9%,掊2=4.18,P0.05;Southern blot:26.8% vs. 16.5%,掊2=4.48,P0.05)。1980年前E.coli检出率高于1981年后(Southern blot法:28.0%vs.15.0%,掊2=5.00,P0.05)。E.coli检测阳性组和阴性组比较,临床表现的差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 E.coli是新生儿重症肺炎死亡病例中的重要病原。分子生物学方法检测E.coli对早期诊断有重要价值。     

纤维结合蛋白基因在儿科A族β溶血性链球菌的分布及与大环内酯类抗生素耐药的关系

目的研究纤维结合蛋白基因在我国儿科A族β溶血性链球菌(GAS)中的分布及与大环内酯类耐药之间的关系。方法收集3所儿童医院191株病原菌株,48株健康携带株,采用琼脂稀释法测定5种大环内酯类抗生素的MIC值,确定其药物敏感性;PCR扩增及测序对菌株进行emm分型;PCR检测纤维结合蛋白基因prtF1、prtF2和大环内酯类抗生素耐药基因ermB、ermTR和mefA。结果分离株的ermB阳性的有186株,ermTR阳性的有11株,prtF1、prtF2及两者同为阳性的菌株携带率分别为67.36%、66.11%和59.00%,prtF1在病原菌株和健康携带株中没有差别,prtF2在健康分离株携带率高于病原菌株,prtF1、prtF2两者集中在emm12,emm22型菌株中阳性率高,而在emm1、emm4型中很少存在。prtF1和prtF2同时阳性在ermB阳性大环内酯类抗生素耐药菌株中更为常见。结论在我国儿科GAS分离株中,以共同携带prtF1/prtF2基因的emm12型菌株为主,多存在于健康儿童中,这可能是造成我国的GAS感染耐药水平高,而侵袭性不高的原因之一。     

2000-2005年自北京儿童医院门诊患儿鼻咽部分离的19群肺炎链球菌的耐药性变化

目的明确2000—2005年分离的北京儿童19群肺炎链球菌的抗生素敏感性分布及年代变化特点。方法采用简易棋盘式肺炎链球菌分型系统以荚膜肿胀试验进行血清分型。E—test法检测分离株对青霉素等6种抗生素的最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentrations,MIC）。结果2002—2003年和2004—2005年肺炎链球菌19群在分离的青霉素不敏感肺炎链球菌中所占比例明显升高,青霉素、头孢克洛和头孢呋辛钠敏感率明显下降,MIC50、MIC90和最大MIC值的水平升高。从MIC值分布看,19群分离株对阿莫西林／克拉维酸和头孢曲松的敏感性下降,但仍处于判定标准的敏感范围。结论2000—2005年自北京儿童医院门诊患儿鼻咽部分离的肺炎链球菌19群对β内酰胺类抗生素耐药性增强,耐药株增多。     

儿童肺炎链球菌对β-内酰胺类、大环内酯类和氟喹诺酮类抗菌药物敏感性研究

目的了解2002 2004年北京儿童医院门诊5岁以下呼吸道感染儿童鼻咽拭子中分离出的肺炎链球菌,对β-内酰胺类、大环内酯类和氟喹诺酮类抗菌药物的耐药性。方法使用E试验法(E-test)对114株肺炎链球菌进行抗菌药物的敏感性试验。结果114株肺炎链球菌对青霉素不敏感率为36%,对阿莫西林/棒酸全部敏感,对头孢菌素中头孢曲松不敏感率为6.1%,头孢呋辛为30.7%,头孢克洛为29%,大环内酯类耐药率在90%左右,全部菌株对氟喹诺酮类敏感。结论儿童肺炎链球菌对青霉素和头孢二代抗菌药物不敏感率为29%~36%,对大环内酯类耐药在90%左右,未发现对氟喹诺酮类耐药菌株。     

红霉素耐药肠球菌ermB基因与转座子Tn1545和Tn917的关系

目的研究158株儿童临床标本中分离的肠球菌对红霉素耐药性及其转座子Tn1545和Tn917介导的耐大环内酯类抗生素eFmB基因的特点。方法采用琼脂稀释法对红霉素进行最小抑菌浓度（MIC）测定，用PCR检测肠球菌ermB、，蝴基因、Tn1545和Tn917。结果158株红霉素MICC50和MIC90都为256μg／ml，红霉素耐药率为94．9％（150株／158株）。在150株红霉素耐药株中，ermB基因的总携带率为70．7％，其中粪肠球菌、屎肠球菌、坚韧肠球菌、鸟肠球菌和海氏肠球菌其ermB基因的携带率分别为：78．3％、58．1％、100％、100％、100％，粪肠球菌eFmB基因的携带率高于屎肠球菌（f=6．884，P=0．009）；粪肠球菌未检测到，啪基因，只有1株屎肠球菌检测到，卿基因。106株ermB基因阳性红霉素耐药株中，46．2％的菌株eFmB基因同时存在于转座子吼1545和Tn917：ermB基因单纯存在于转座子Tn1545的43株，占40．6％；ermB基因单纯存在于转座子Tn917的1株，占0．9％。结论儿童临床标本中分离出的肠球菌耐大环内酯类抗生素的主要耐药基因为ermB基因．并且ermB基因主要是通过转座子Tn1545来携带其对大环内酯类抗生素的耐药。     

2000至2002年北京儿童中青霉素不敏感肺炎链球菌的血清型分布和同源性研究

研究表明青霉素不敏感肺炎链球菌（peniciHinnonsusceptible Streptococcus pneumoniae，PNSP）的克隆传播是其流行的重要因素，我们也证实克隆传播是北京地区PNSP流行的重要因素。进一步血清分型可为抗生素耐药性和流行克隆分析提供更多信息，为推广接种疫苗预防PNSP感染和控制其传播提供依据。     

抗感染疫苗接种

抗生素和疫苗的应用是 2 0世纪医学最重要的贡献之一。它有效地控制了威胁人类的感染性疾病 ,改变了疾病谱。但是 ,最近的国外文献表明 ,大多数感染性疾病并没有消失 ,新的病原还在发现 ,感染性疾病仍是全球儿童健康的主要危害 ,疫苗和抗生素本身仍然有很多新的问题有待解决。我国由于有较健全的防疫系统和儿童保健机构 ,儿科临床医生对儿童时期应用的疫苗和疫苗可预防疾病的认识不足 ,而在实际工作中又经常遇到很多与疫苗和免疫接种有关的疑点。因此 ,本期杂志组织国内在这方面有研究的一些专家进行讨论 ,主要涉及国内外的进展并介绍国内已经应用的新近国外应用的疫苗、疫苗的副作用和免疫机制。要讨论的问题也很多 ,不可能面面俱到 ,只是希望通过这次讨论能引起儿科医生的重视。     

5岁以下儿童门诊呼吸道感染常见病原携带及抗生素耐药的流行病学特征调查

目的　了解 5岁以下儿童呼吸道感染肺炎链球菌 (SP)、流感嗜血杆菌 (HI)、卡他莫拉菌 (M .Cat)携带株的流行病学特征、耐药情况及其影响因素。方法　对 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 3年 5月在北京儿童医院内科门诊就诊的≤ 5岁呼吸道感染儿童进行随机选择问卷调查 ;采鼻咽拭子标本 ;培养、分离、鉴定SP、HI,其中对 2 0 0 2年 1月至 2 0 0 3年 5月的标本同时进行了M .Cat的分离 ;用E test、K B法检测SP、HI对抗生素的敏感性 ,用琼脂扩散法检测M .Cat的药物敏感性 ;评价年龄、居住地、入托、抗生素使用、诊断对病原携带及其耐药株的影响。结果　本文≤ 5岁儿童呼吸道感染SP、HI、M .Cat的携带率分别为 2 8 6%、2 8 3%、1 5 8%。SP青霉素耐药率为 2 3 3% ,HI氨苄青霉素的耐药率为 1 0 2 % ,M .Cat对氨苄青霉素的耐药率高达 90 3%。影响病原携带、抗生素耐药的主要因素有年龄、入托、抗生素使用。结论　≤ 5岁儿童呼吸道感染携带病原菌株耐药率快速上升 ,抗生素使耐药菌株携带率增高 ,因而合理使用抗生素非常重要。