98例迟发性呼吸机相关性肺炎患者的病原学及耐药性监测

目的探讨迟发性呼吸机相关性肺炎（VAP）患者的病原菌分布和耐药性。方法将98例被确诊为迟发性VAP的机械通气患者进行病原学分布和耐药状况监测。结果纤维支气管镜采样98例共检出致病菌168株,革兰阴性菌占82．9％．其中非发酵菌占5012％,肠杆菌科占3217％;革兰阳性菌占1315％;真菌占4．6％。前3位致病菌分别为鲍氏不动杆菌（26．9％）、铜绿假单胞菌（13．6％）和肺炎克雷伯菌（10．5％）。药敏结果显示前几位革兰阴性菌对常用抗菌药物均有较高耐药性,草兰阳性茵均对万古霉素敏感。结论迟发性VAP的病原菌以革兰氏阴性茵为主,且呈现多重耐药现象,合适的经验性抗菌药物治疗应根据病原学与耐药性的监测结果。     

消化道念珠菌病

消化道念珠菌病是由念珠菌感染口腔、食管及胃肠道所引起的疾病,包括口腔黏膜念珠菌病、念珠菌性食管炎、念珠菌性胃肠炎等。一、病原学70%的正常人群口腔和胃肠道中有真菌定植,大部分是念珠菌属。     

甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌万古霉素最低抑菌浓度分布及不同药敏试验方法比较

金黄色葡萄球菌是临床常见致病菌,可引起皮肤感染、慢性骨感染、败血症及心内膜炎等各类感染.尤其是甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的出现,更是给全世界的医院带来了难题.糖肽类抗生素万古霉素于1958年首次投入使用,随后即被广泛用于治疗MRSA引起的严重感染.金黄色葡萄球菌可由万古霉素耐药的肠球菌获得vanA基因而产生对万古霉素的耐药,至今全世界已报道11例万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌[1].而自1997年日本报道万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌后,金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感性问题就一直引起医疗界的广泛关注[ 2].另外,即使按照现行美国临床实验室标准化协会( CLSI)万古霉素药物敏感实验折点(最低抑菌浓度MIC值≤2 mg/L)判断为敏感的金黄色葡萄球菌,其临床使用万古霉素治疗失败的病例也屡有报道,这种治疗欠佳的原因可能为其万古霉素MIC值的上升[3].本研究收集浙江省8家医院临床分离MRSA菌株,应用Etest方法及微量肉汤稀释法检测其万古霉素的MIC值,了解MRSA对万古霉素敏感性,并对Etest方法与微量肉汤稀释法测量万古霉素对MRSA的MIC值进行比较分析.     

联合使用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的影响

目的 探讨联合使用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应,寻找有效的组合方案.方法 收集2008 -2009年分离自浙江大学医学院附属第一医院,宁波李惠利医院、浙江省人民医院、杭州市第三医院、绍兴市第二医院、杭州市第一医院、复旦大学附属华山医院、南京军区总医院等8家医院确证产KPC-2酶的24株肺炎克雷伯菌,采用MLST技术分型,琼脂稀释法测定阿米卡星、米诺环素、亚胺培南、阿莫西林/克拉维酸、头孢他啶、美罗培南、庆大霉素、头孢西丁、头孢吡肟、利福平、多黏菌素B、环丙沙星对24株菌株的MIC值,Etest测定替加环素、哌拉西林/三唑巴坦的MIC值.采用棋盘琼脂稀释法测定头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟联合阿米卡星、环丙沙星联合阿米卡星、环丙沙星联合头孢吡肟、亚胺培南联合阿米卡星、亚胺培南联合环丙沙星、亚胺培南联合多黏菌素B、亚胺培南联合米诺环素、多黏菌素B联合利福平、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸对菌株的抑菌效果.结果 24株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌分为5个ST型,其中ST11型是最主要的克隆群(15株).菌株对多黏菌素B、替加环素均敏感,对米诺环素耐药率为4.2％.最佳组合方案为头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸,出现协同作用有19株;其次为亚胺培南联合阿米卡星、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸,出现协同作用均为13株.结论 产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对替加环素、多黏菌素B、米诺环素较敏感,头孢吡肟联合阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南联合阿米卡星、头孢他啶联合阿莫西林/克拉维酸在体外以协同作用为主,其疗效值得临床进一步观察.     

2011年中国CHINET细菌耐药性监测

目的了解国内主要地区临床分离菌对常用抗菌药的敏感性和耐药性。方法国内主要地区15所教学医院(13所综合性医院、2所儿童医院)临床分离菌采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验。按CLSI 2011年版判断结果。结果 2011年1 12月收集各医院临床分离菌共59 287株,其中革兰阳性菌16 872株,占28.5%,革兰阴性菌42 415株,占71.5%。金葡菌(SA)和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中甲氧西林耐药株的检出率平均分别为50.6%和74.6%。甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株。MRSA中有73.3%的菌株对甲氧苄啶磺胺甲噁唑敏感;MRCNS中有88.2%的菌株对利福平敏感。未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。肠球菌属细菌中粪肠球菌对所测试的抗菌药(氯霉素除外)的耐药率均显著低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株,根据表型推测多数为VanA型耐药。肺炎链球菌非脑膜炎株成人株和儿童株中PSSP所占比例较2010年均略有升高,PRSP的检出率均有所下降。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌中产ESBLs株分别平均为50.7%、38.5%和13.8%。肠杆菌科细菌中产ESBLs株对测试药物的耐药率均比非产ESBLs株高。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率4%～6%。不动杆菌属细菌(鲍曼不动杆菌占88.6%)对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为60.4%和61.4%。肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中仍有少数泛耐药株。结论细菌耐药性仍呈增长趋势,多重耐药和泛耐药菌株在某些科室内的流行播散对临床构成严重威胁,应进行流行病学调查并采取有效的控制措施。     

2007年CHINET大肠埃希菌和克雷伯菌属耐药性监测

目的 了解2007年我国不同地区12所医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属的耐药性.方法 采用纸片扩散法( K-B 法)对临床分离株作药敏试验.结果 共收集CHINET 细菌耐药性监测网12所医院分离的大肠埃希菌6 527株,肺炎克雷伯菌3 051株,催产克雷伯菌206株.其中儿童分离株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别占24.0%(1 566/6 527)和 17.8% (542/3 051).大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs菌株检出率分别平均为55.0%(12.3%~72.1%)和44.9%(15.4%~ 70.6% ).各医院ESBLs检出率存在一定差异.药敏结果显示,大肠埃希菌和克雷伯菌属对亚胺培南、美罗培南和头孢哌酮-舒巴坦都保持高度敏感,耐药率均低于10%.产ESBLs株对上述3种药物的耐药率也均低于20%.50%以上的产ESBLs株对庆大霉素和环丙沙星耐药.有5所医院分离出对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株,其中肺炎克雷伯菌21株,大肠埃希菌2株,产酸克雷伯菌1株.其中20株肺炎克雷伯菌为泛耐药株,占0.7%(20/3 051).结论 大肠埃希菌和克雷伯菌属对碳青霉烯类抗生素和头孢哌酮-舒巴坦仍保持高度敏感性,不同地区的分离株中产ESBLs菌株检出率和药敏试验结果存在差异,儿童分离株中产ESBLs检出率上升值得关注.     

2010年CLSI三代头孢菌素折点改变对我国大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及奇异变形杆菌药物敏感性结果解释的评估

目的评估2010年CLSI M100-S20(S20)及2009年CLSI M100-S19(S19)文件中CAZ、CTX、CRO新旧折点变化对我国如何解释产ESBL大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌体外药物敏感性试验结果的影响.方法收集2005-2007年中国15家医院SEANIR监测项目中3种细菌琼脂稀释法药敏结果,用PCR-基因序列分析法和(或)药敏表型分析法去除产AmpC酶的菌株.用CLSI琼脂稀释法确定ESBL表型.3种抗菌药物对2 733株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的敏感性用WHONET5.4软件分别按S19和S20折点进行回顾性分析.对北京协和医院同时有琼脂稀释法和纸片扩散法药敏结果的207株3种肠杆菌科细菌用WHONET5.4软件进行散点图和回归性分析,观察S19和S20折点下3种抗菌药物两种方法的相关性.结果产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对CTX的耐药率分别由S19折点(64μg/m1)下的65.2%、55.5%和14.6%上升为S20折点(4 μg/ml)下的99.7%、96.2%和93.8%,敏感率则由S19折点(8 μg/ml)下的6.0%、11.5%和33.3%下降至S20折点(1μg/ml)下的0%、0.2%和0%.CRO的结果与CTX相近.虽然在我国产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对CAZ的敏感率比CTX和CRO高,它们的耐药率也由S19折点(32μg/ml)下的30.3%和43.2%升为S20折点(16μg/ml)下的41.9%和55.9%,敏感率则由S19折点(8μg/ml)下的58.1%和44.1%降至S20折点(4 μg/m1)下的44.7%和28.0%.不产ESBL的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌在CTX、CRO和CAZ新旧折点下的敏感率为99.2%～100.0%,耐药率为0%～0.4%.琼脂稀释法CTX和CRO S20折点与ESBL表型分布具有良好的对应关系;琼脂稀释法和纸片扩散法回归性分析得CAZ、CTX和CRO的r值分别为0.67、0.79和0.77,P均＜0.01,S20与S19相比,纸片扩散法药敏正确分类均在可接受范围内.结论应用S20 CTX和CRO的新折点,药敏结果与ESBL检测结果一致性大大提高,临床医生可根据药敏结果结合临床情况合理选择抗菌药物,细菌室可不报告ESBL表型情况.S20 CAZ新折点与我国临床治疗结局相关性还有待进一步评估.     

2010年中国CHINET血流感染的病原菌分布及耐药性

目的了解2010年CHINET血培养分离菌的菌种分布和耐药性。方法对CHINET细菌耐药监测网2010年1月至2010年12月所有血标本按常规方法进行细菌分离、培养、鉴定。按统一方案用K-B纸片扩散法进行抗菌药敏感试验。结果 2010年自血液标本中共获分离细菌5 646株,其中革兰阳性球菌占64.3%,革兰阴性杆菌占35.6%。最常见的分离菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌(47.0%)、大肠埃希菌(1 5.0%)、肠球菌属细菌(7.4%)、克雷伯菌属细菌(6.0%)、金葡菌(5.6%)、不动杆菌属细菌(3.9%)、假单胞菌属细菌(2.9%)、草绿色链球菌(2.9%)、肠杆菌属细菌(1.9%)、沙门菌属细菌(1.2%)和嗜麦芽窄食单胞菌(1.1%),占分离菌株的94.8%。MRSA及MRCNS分别占金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的51.1%和56.8%。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和氨苄西林的耐药率分别为34.3%和14.7%,屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。草绿色链球菌对青霉素的耐药率为11.2%。葡萄球菌、肺炎链球菌和其他链球菌属细菌中均未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药菌株,粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素的耐药率分别为2.1%和7.0%。大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属和枸橼酸菌属细菌等肠杆菌科细菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率在0～10%,但克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属和变形菌属细菌对厄他培南的耐药率达10%～20%。不发酵糖革兰阴性杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率为18.3%～22%,但不动杆菌属细菌耐药率达57%。结论 2010年CHINET监测资料显示革兰阳性菌,尤其是CNS在血流感染中占重要地位,血培养分离株对常用抗菌药严重耐药,因此应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施以抑制耐药菌传播。     

碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵和外膜孔蛋白表达水平的研究

目的探讨我国临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌外排泵MexAB—OprM和外膜孔蛋白OprD2表达水平及其与碳青霉烯类抗生素耐药性之间的关系。方法收集我国15个省市28所医院临床分离的铜绿假单胞菌655株，琼脂稀释法测定该菌加入外排泵抑制剂羟基氰氯苯腙（CCCP）前后对亚胺培南和美罗培南的MIC；RTPCR检测外排泵MexAB-OprM和孔蛋白OprD2的表达水平；十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳（SD-PAGE）和蛋白印迹（Western blot）检测外膜孔蛋白OprD2。结果收集到的655株铜绿假单胞菌菌株对亚胺培南和美罗培南敏感率分别为52．5％和59．2％，加入CCCP前后其对亚胺培南和美罗培南的敏感率无明显变化；52．0％（51／9B）美罗培南耐药株MexAB-OprM显著高表达（P〈0．05），43．7％（59／135）亚胺培南耐药株OprD2显著低表达（P〈0．05），14．8％（20／135）亚胺培南耐药株OprD2表达缺失；SDS-PAGE和Western—blot显示与标准菌株PAO1相比，OprD2表达水平减低菌株ZZ20显影减低，表达缺失菌株BJ1不显影。结论MexAB-OprM表达升高和OprD2表达降低甚至缺失是我国铜绿假单胞菌对美罗培南和亚胺培南耐药的重要机制。     

耐万古霉素肠球菌二株的耐药基因及传播机制研究

肠球菌是重要的条件致病菌之一,不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等.近年来抗菌药物的广泛应用,使肠球菌对多种抗菌药物产生耐药,并成为导致医院感染的重要致病菌.由于肠球菌对抗生素的耐药性增加,特别是近年出现的万古霉素耐药肠球菌(VRE)给临床治疗造成困难.本研究分析了杭州市分离到的两株VRE菌株的克隆相关性、耐药性及耐药传播机制,为VRE感染的防治提供基础.