骨折愈合过程中DAG、PKC在大鼠脑干神经元的表达

目的:探讨DAG和PKC在大鼠骨折愈合病理过程中加速骨折愈合的机理。方法:将SD大鼠制成骨折模型,并设置假手术组作对照。免疫组织化学染色和免疫荧光双标法检测骨折愈合过程中DAG和PKC的表达。结果:在实验组的脑干内,术后第3、第7、14d可见DAG阳性神经元,阳性反应位于胞浆内,至术后第24、42天,细胞呈DAG反应阴性;PKC阳性神经元亦出现于术后第3、7、14天,阳性反应位于胞浆,脑干内可见DAG、PKC双阳性神经元。结论:骨折愈合的早期和中期是DAG-PKC信号途径参与骨折愈合病理过程的关键时期;DAG-PKC信号途径通过脑干内的神经元加速骨折愈合。     

金葡菌TG-TPase嵌合基因在甲醇营养型酵母中的表达

目的 设计耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)耐药相关TG-Tpase嵌合基因,构建其真核表达质粒,为嵌合基因的高效、分泌型表达奠定基础.方法 在序列结构分析的基础上,设计引物从MRSA菌株中扩增其耐药性相关转糖基酶(Tgase)和转肽酶(Tpase)活性片段,进一步用酶切连接等分子生物学操作构建TG-Tpase嵌合基因,亚克隆至酵母表达质粒pPIC9K中,转化DH5a大肠埃希菌.经酶切、PCR和核苷酸测序鉴定正确的重组质粒用Sal I线性化,整合入甲醇营养型毕赤酵母GS115中,在DNA和基因转录水平鉴定出阳性重组酵母.结果 采用PCR从MRSA基因组中扩增得到了873 bp的Tgase片段和1 044 bp的Tpase片段.以酶切连接构建的TG-Tpase嵌合基因经酶切、PCR鉴定,能获得约1 900 bp的融合片段,与预期结果 相符,测序表明序列和阅读框均正确.线性化的重组质粒转化GS115后,得到5个高拷贝阳性转化子,经诱导表达和PCR鉴定,这些转化子能转录出目的基因的mRNA.结论 成功构建了含TG-Tpase嵌合基因的重组毕赤酵母工程菌,为进一步高效制备嵌合蛋白、进而利用其酶学活性进行抗耐药性金葡菌抑制剂的筛选创造前提.     

重组毕赤酵母高密度发酵表达肽抗生素hPAB-β及其抑菌活性初步鉴定

目的探讨hPAB-β工程菌的高密度发酵方法,鉴定发酵产物中目的肽的活性。方法采用补料分批培养方法,在3.7 L发酵罐中对重组酵母菌进行高密度发酵,温度控制在30℃,pH值范围为4.95～5.05,在菌体湿重达到200～250 g/L后开始诱导,经过约50 h甲醇诱导后结束发酵。对发酵上清进行反相层析、分子筛层析以及反相高效液相色谱纯化,通过抑菌实验对纯化产物进行活性鉴定。结果3次高密度发酵在菌体湿重分别达到235.0 g/L、210 g/L和264.8g/L时进行诱导表达,发酵上清中目标肽的表达量分别达73.7 mg/L、76.6 mg/L和74.3 mg/L。发酵上清通过反相层析、分子筛层析以及反相高效液相色谱纯化,获得重组肽抗生素hPAB-β,该重组蛋白经抑菌实验显示了较好的抑菌活性。结论成功实现了酵母工程菌的高密度发酵,为下一步规模化制备hPAB-β奠定了基础。     

中国汉族青年女性鼻尖活动度的测量及临床意义

目的测量中国汉族青年女性的鼻尖活动范围,并与隆鼻术后的鼻尖活动范围对比,为鼻整形提供形态学资料及术后评判指标。方法选择100名普通汉族青年女性(正常组)和30名植入人工材料的隆鼻术后女性患者(隆鼻组),确定鼻的活动临界点A,测量鼻尖活动度、A点至鼻尖距离(A-P)和鼻长。结果正常组的鼻尖活动度经测量为35.73°±4.72°,隆鼻组鼻尖活动度为21.45°±7.53°,两者有明显统计学差异。正常组A-P间距为(16.62±1.95)mm,隆鼻组为(25.89±10.16)mm。鼻长均在正常范围内。隆鼻组63%的成员感觉鼻尖活动度下降,30%的成员因此对手术效果欠满意。结论证实植入人工材料的隆鼻术可降低鼻尖活动度,进而影响受术者对手术效果的评价。     

六个成骨不全家系的临床表型分析及基因变异检测

目的分析6个成骨不全家系的临床表型并明确其致病变异,为遗传咨询及产前诊断提供依据。方法收集6个家系的临床资料以及外周血或引产组织样本,应用二代测序(next generation sequencing,NGS)技术对先证者的全部基因进行检测,用PCR反应扩增检出的变异位点,之后进行Sanger测序。在6个家系的所有成员以及100名健康对照中对检测到的变异位点进行验证。结果家系1的先证者及其女儿携带COL1A1基因c.1976G>C杂合变异,家系2~6的先证者分别携带COL1A2基因c.2224G>A、COL1A1基因c.2533G>A、COL1A2基因c.2845G>A、COL1A1基因c.2532_2540delCGGACCCGC以及COL1A2基因c.1847G>A杂合变异。先证者的双亲均未携带相应变异,在100名健康对照中均未检测到上述变异。结论6个成骨不全家系的致病原因可能均为COL1A1/2基因的变异。新发现的变异丰富了成骨不全症的表现型-基因型数据库,并为这些家系的遗传咨询及产前诊断提供了依据。     

经股动脉冠状动脉造影及介入治疗冠心病881例护理体会

2005年1月～12月,我院对881例冠心病患者施行经股动脉冠状动脉造影术(CAG) 经皮冠状动脉成形术(PTCA) 支架植入术,成功完成,效果满意.现将护理体会报告如下.……     

运动平板试验Duke评分对胸痛患者危险分层及预后的价值

目的评价运动平板试验Duke评分(DTS)对胸痛患者危险分层及预后评估的应用价值。方法选择169例运动试验阳性和可疑阳性同时行冠状动脉造影的患者为研究对象,按Duke评分分为DTS低危组(Duke≥5分,n=35)、中高危组(DTS<+5,n=134),比较两组患者冠状动脉病变和临床特点,随访两年比较2组发生主要不良心血管事件(MACE)的概率,分析DTS预测MACE的价值。结果在中高危组中限制性心绞痛发作例数、ST段偏移≥1 mm例数、运动时ST段改变涉及导联数目、ST段偏移值均明显高于DTS低危组(P<0.05);而运动持续时间和运动最大心率明显低于DTS低危组(P<0.05)。DTS与冠脉病变的严重程度相关,冠脉造影结果显示低危组冠脉造影Gensini积分低于中高危组(P<0.0001);胸痛患者有随访资料的169例,失访9例,160例完成随访,失访率为5.33%。MACE主要发生在随访1个月,在DTS中高危组中发生MACE明显高于DTS低危组(P<0.05);logistic多因素回归分析显示,DTS是心血管事件发生的危险因素(OR=1.434,1.278¹.609;Waldχ2=37.7076,P<0.0001)。结论运动试验DTS与冠状动脉病变狭窄程度高度相关;DTS中高危组发生MACE明显高于低值组,应用该评分可以有效地对临床中胸痛患者进行危险分层及预后的评估,对于DTS中高危组的患者应迅速进行评估并考虑早期行再灌注治疗。     

父子四人患食管癌病例报告

我们收治了一例有家族史的食管癌病人,对其家系进行了调查,发现父子4人同患食管癌,报道如下。     

总是倒苦水心灵更受伤

每到夜深人静，各大电台的谈心节目纷纷开通，为陷入彷徨的人们排忧解难。根据一些心理治疗理念，适当的倾诉可以缓解一半以上的情绪困扰。然而，最近的一项研究发现，过度倾诉反而不利于消除忧伤的情绪，此时，沉默是金。 这项研究由美国心理学博士马克·西里及其同事执行，发表在美国《咨询与临床心理学杂志》上。研究随机抽取了2000名经历“9·11”灾难的美国人，其中一部分亲历者选择对自己的感受和想法避而不谈，另一部分则经常向别人诉说自己的经历。两年后的跟踪调查发现，经常倾诉的人心理创伤的恢复程度反而没有沉默的人好。