HPV感染阳性角朊细胞的原代培养及生物学特性研究

目的 培养人原代乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染阳性皮肤角朊细胞,观察其生物学特性。方法 取患者新鲜疣体及正常包皮皮肤组织,用胰酶消化法培养角朊细胞,观察其生长情况,绘制细胞生长曲线图,用ＰＣＲ及原位杂交方法检测上述细胞。结果 ＨＰＶ阳性角朊细胞（ＰＫ）在１６４０液中生长情况良好,增殖速度较正常角朊细胞快。结论 ＰＫ细胞在１６４０液中生长情况良好,适合作为ＨＰＶ感染动物模型用于进一步研究。     

巢式竞争DNA模板的制备方法

0　引言　我们建立了巢式竞争 PCR定量方法进行血清HBV DNA定量扩增 [1 ] .在该实验中我们采用了简便的长引物引导扩增方法制备了特殊的巢式竞争 DNA模板 .1　材料和方法1. 1　材料　我们对 HBV DNA C区 186 5 - 2 45 8区段进行巢式扩增定量 ,而巢式扩增片段长度为 5 5 9bp.按文献 HBVDNA序列 [2 ] ,用 oligo引物设计软件和 www.ncbi.nlm.nih.gov DNA同源性数据库分析设计巢式引物 .两外侧引物分别为 :b1:(上游 186 5 - 1883) 5′caagcctccaagctgtgcc3′,b2 (下游2 45 8- 2 44 0 ) 5′atactaacattgagattcc 3′;两内侧引物分别为…     

骨组织总RNA的提取

o引言分离纯净完整的RNA对于分子克隆的实验是很重要的,而且是进行基因表达分析的基础．文献调查发现对提取细胞系及各种脏器组织中RNA的方法报道有很多,但未发现有关于从骨组织中提取总RNA的成熟方法．我们在实践中摸索出提取骨组织总RNA的有效方法,现报道如下．1材料和方法1．l骨标本制备取截肢标本,无菌条件下,即取截肢体正常骨段骨组织,剔除骨膜,除净松质骨和骨髓,将此皮质骨咬至o．5cmXo．5cm大小,以4℃生理盐水反复冲洗后,迅速置液氮中保存．将液氮中保存的骨组织取出置室温下5min,再放回液氮中,复取出置室温下5min…     

吗啡 舒芬太尼和地佐辛用于术后自控镇痛效果比较

<正>疼痛是一种复杂的生理、心理活动,是临床上最常见的症状之一。近年来,随着人们对生活质量要求的提高,临床疼痛治疗逐步普及,经静脉自控镇痛技术(PCIA)广泛使用,且所用药物也较多。本文旨在比较吗啡、舒芬太尼和地佐辛用于静脉持续镇痛的效果及安全性。     

瑞芬太尼靶控输注用于清醒电子支气管镜检查的可行性分析

<正>电子支气管镜镜体细、可弯曲、视野范围大、可直接看清至气管的第4级分支,并可以直接吸痰、钳夹咬取组织作病理检查或用毛刷刷出细胞行细胞学检查等优点,操作方便,为目前早期诊断肺癌的重要手段之一。但电子支气管镜检查是一项侵入式检查,检查过程可引起机体短暂而强烈的血压     

西安市儿童CagA阳性幽门螺杆菌感染血清流行病学调查

幽门螺杆菌（Ｈｐ）是小儿慢性胃炎、十二指肠炎及消化性溃疡的重要病因之一，成人Ｈｐ相关性胃疾病的发生与儿童期Ｈｐ感染密切相关［１］．研究表明，只有产生细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）的Ｈｐ菌株才有致病性，而一半以上的Ｈｐ菌株表达ＣａｇＡ［２］，ＣａｇＡ与慢性胃炎及消化性溃疡有密切关系［３］，同时ＣａｇＡ可能是胃癌发生的一个重要因素［４］．因此，我们采用斑点金免疫渗滤法，对胃癌高发区西安市１４岁及以下儿童进行Ｈｐ感染及ＣａｇＡ阳性Ｈｐ感染的血清流行病学调查，结果如下．１　材料和方法１．１　材料　共７９…     

剪切波弹性成像在慢性踝关节不稳者肌肉硬度评估中的应用

目的:讨论剪切波弹性成像在慢性踝关节不稳(CAI)腓肠肌及腓骨长肌硬度的评估和临床应用价值。方法:选择2019年8月—2020年5月在我院收治的单侧慢性踝关节不稳(CAI)的患者50例作为观察组(均经病史、影像辅助检查及CAI的问卷表等考虑为CAI患者),另外选择50例健康者作为本次对照组。通过二维超声及剪切波弹性成像的检查方式,分别对观察组和对照组双下肢腓骨长肌及腓肠肌内侧头的肌肉厚度(mm)、杨氏模量均值(kPa)及剪切波速度均值(m/s)的测值进行比较。结果:观察组健侧腓肠肌内侧头、腓骨长肌的杨氏模量值及剪切波速度均大于患侧腓肠肌内侧头、腓骨长肌的杨氏模量值及剪切波速度(P<0.05)。结论:慢性踝关节不稳患者的患侧腓肠肌内侧头及腓骨长肌肌肉硬度下降,超声剪切波成像对于慢性踝关节不稳的肌肉硬度定量评估具有一定的价值。     

幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段的克隆及序列分析

目的 vacA基因编码的蛋白是幽门螺杆菌的一个重要毒力因子,通过空泡化作用损伤上皮细胞.vacA基因与Hp感染者的临床发病有着密切的关系,vacA的基因型决定毒素蛋白体外表达水平的高低.我们从幽门螺杆菌88022菌株中扩增出vacA基因毒性相关片段,进行序列测定和序列比较分析,为Hp的临床检测奠定基础.方法以该菌株总DNA为模板,紧随vacA基因序列s区保守区域的引物(位于316bp～335bp和1198bp～1218bp)扩增vacA基因的一个903bp片段,编码的氨基酸为34～334位,用BamHⅠ和Pst Ⅰ双酶切后克隆入pGEM-3Zf(-)质粒载体,以双脱氧法双向测定目的片段的序列,拼接出该片段的全序列,并与已知的Hp vacA基因序列作比较.结果所得序列与Hp国际标准株CCUG17874(GeneBank gi619248)和NCTC11638(GeneBank gi 495469)的vacA基因序列完全一致,氨基酸序列分析和所报道的结果一致.结论构建了Hp vacA基因毒性相关片段的重组克隆,为以后的进一步研究奠定了基础.     

改良PCR-ELISA的建立及初步应用

目的　建立操作简单、灵敏、特异的PCR -ELISA。方法　采用短DNA片段扩增 ,其中上游引物 5′端标记有生物素 ,使PCR扩增产物的一条链上带有生物素 ,随着PCR反应的结束 ,PCR反应液中的地高辛标记的探针与PCR产物中的生物素标记的DNA链杂交 ,形成杂交产物 ,然后杂交产物通过生物素与微孔板上固定的链霉亲合素结合 ,被固定在微孔板上 ,最后用ELISA检测被固定的杂交产物。结果　该方法可以检测出 1× 10 1拷贝的HBVDNA模板 ,对 10 0例乙型肝炎患者的血清进行检测 ,HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清 10 0 %(30 /30 )检出HBVDNA ;HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清HBVDNA阳性为 78 6 %(2 2 /2 8) ;HBsAg(+)、抗HBc(+)的血清HBVDNA阳性为 6 6 7%(16 /2 4) ,其余为阴性。非乙型肝炎血清的结果均为阴性。结论　该PCR -ELISA操作简单 ,方法灵敏、特异。     

唇腭裂儿童父母家庭功能评定和简易应对方式问卷的相关性

目的 探讨唇腭裂患儿父母的家庭功能和简易应对方式, 促进唇腭裂父母改善自身情绪和家庭问题, 为预防唇腭裂儿童心理问题提供一些依据.方法 采用家庭功能量表和简易应对方式量表对住院期间的79例6岁以下的唇腭裂患儿父母进行问卷调查.结果 家庭功能量表的相关问题解决、行为控制差异有统计学意义 (P<0.05) ;简易应对方式量表相关分析中家长年龄与家长的积极应对呈显著统计学差异 (P<0.05) .结论 唇腭裂患儿父母应对刺激时的情感反应和问题解决等能力差, 如情感和情绪难以表达和倾诉、家庭成员间的信息交流、语言沟通不足等, 在面对突发事件和危险情况时的行为控制模式不好, 容易出现手足无措;且父母年龄越大, 采取的积极应对方式越少.父母的家庭功能和应对方式对唇腭裂患儿身心健康具有重大意义, 需及时进行心理干预.