中药血清药理学研究中血清处理方法的探讨

目的以具有子宫兴奋作用的坤血安作为分析药物,观察不同方法处理的空白血清以及给予坤血安后采集的血清对小鼠离体子宫的影响.方法坤血安含药血清的制备:给小鼠灌服坤血安中间体470 mg/kg,50 min后小鼠摘眼球取血,分离血清,分别采用56℃加热30 min处理(加热处理)、50%乙醇沉淀(醇沉)、56℃加热30 min处理后再以50%乙醇沉淀(加热后再醇沉)、50%乙醇沉淀后再56℃加热30 min处理(醇沉后再加热)等方法处理血清;空白血清实验前灌服生理盐水,再如前法制备及处理血清.所得血清加入恒温浴槽中,以PowerLab/8S系统观察受试血清对小鼠离体子宫平滑肌活动的影响.结果不同方法处理后的空白血清中,以加热后再醇沉及醇沉后再加热2种方法所处理血清对离体子宫的干扰最小,且对药物作用影响不大.结论在此实验中采用加热后再醇沉法或醇沉后再加热法制备血清比较适宜.     

髂腹股沟神经皮支营养血管皮瓣的应用解剖

目的:为髂腹股沟神经皮支及其营养血管为蒂岛状皮瓣的临床应用提供解剖学基础。方法:在27侧经红色乳胶液灌注的会阴及下肢标本上解剖观测髂腹股沟神经皮支及其营养血管的来源、走行、分布、吻合及外径,2侧成人新鲜标本灌注墨汁,观测营养血管的墨染范围。结果:髂腹股沟神经来源于第1腰神经腹侧支,其皮支从腹股沟管浅环穿深筋膜,穿出点横径为(1.89±0.47)mm,穿出时位于精索或子宫圆韧带下方。髂腹股沟神经皮支营养血管主要来源于阴部外浅动脉的升支、降支及股内侧支,并沿途发出皮支营养周围皮肤。结论:可以设计以髂腹股沟神经营养血管为蒂的岛状皮瓣。     

高效液相色谱法测定子宫内膜细胞释放的前列腺素F_(2α)

目的:建立测定子宫内膜细胞在缩宫素(OT)存在的条件下分泌PGF2的方法。方法:采用柱α前衍生法对荧光衍生化试剂4-溴甲基-6,7-二甲氧基香豆素(BDMC)与PGF2的反应条件进行研α究。探讨荧光产物的色谱分离条件。结果:建立了测定子宫内膜分泌的微量PGF2的方法,测定了αOT诱导的大鼠子宫内膜细胞产生的PGF2。结论:本方法灵敏,最小检测限可达0.1ng,精密度α高,重复性强,可用于细胞水平或其他生物样品中前列腺素F2的测定。α     

雷公藤肝毒性机制及配伍减毒研究进展

综合分析国内外雷公藤研究相关文献,对雷公藤临床不良反应及肝毒性表现进行表述和总结,分析肝毒性产生的机制。通过雷公藤配伍单味中药、有效化学成分及中药复方及炮制加工降低肝毒性进行归纳,并分析其降低毒性机制,从而明确雷公藤肝毒性研究现状及不足,并进一步对雷公藤药材及成分降低毒性提高疗效发展提出建议,以期为雷公藤药材研究发展及临床安全有效使用提供参考。     

负压封闭引流在毁损性断肢再植中的应用

目的 为扩大断肢再植的适应证,探讨负压封闭引流(VAC)在毁损性断肢再植中的应用. 方法 2000年11月～2006年6月,对24例26侧毁损性离断肢体重建骨骼结构,修复肌腱、神经,吻合血管或通过自体静脉移植恢复血液循环,对所遗留的大面积软组织缺损,运用VAC系统Ⅰ期封闭创面,Ⅱ期主要以中厚皮片移植或肌瓣、肌皮瓣转位修复. 结果随访7～20个月,再植肢体全部存活.8例再植处发生骨不连,行自体骨移植修复.12侧小腿离断中6侧发生马蹄内翻畸形,行三关节融合矫正.所有再植肢体均获得满意的外观和功能.结论 毁损性断肢可再植成活并恢复大部分功能,VAC可解决再植术中软组织缺损的难题.     

苯肾上腺素对糖尿病大鼠室性心律失常的诱导作用

目的比较α1肾上腺素受体(α1-AR)激动剂苯肾上腺素对正常及链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠室性心律失常的差异作用,及对两组大鼠左心室肌细胞早期后除极(EAD)的差异作用;并分析两组大鼠左心室α1-AR各亚型的差异表达,解析其可能的物质基础。方法采用离体心脏心电图及电流钳法,分析α1-AR激动剂(苯肾上腺素,PE)诱导正常和糖尿病大鼠离体心脏心律失常发生率及左心室肌细胞EAD发生率的差异作用。采用Westernblot法,比较两组大鼠左心室α1-AR各亚型的蛋白表达。结果与正常大鼠相比,PE(100μmol.L-1)诱导糖尿病大鼠离体心脏产生室性心律失常的机率明显增加,PE(1000μmol.L-1)诱导左心室肌细胞产生EAD的机率明显增加;α1A-AR在糖尿病大鼠左心室的表达明显增加。结论α1-AR激动剂使糖尿病大鼠左心室肌细胞产生高机率的EAD是其诱导高机率室性心律失常的基础。而糖尿病大鼠左心室α1A-AR表达明显增加是其物质基础。     

甲醛对小鼠睾丸各阶段生殖细胞致突性的研究

目的　观察甲醛 (Formaldehyde)对小鼠睾丸各阶段生殖细胞的致突毒性。　方法　选用雄性昆明小鼠 ,采用腹腔注射染毒 ,染毒的甲醛剂量分别 0 .2 0、2 .0 0、2 0 .0 0 mg/ kg· bw。每天 1次 ,连续 5 d。第 6 d和 15 d分别处死动物进行 SCE和微核试验 ,判断生殖细胞的致突毒性。　结果　甲醛的中、高剂量组早期精细胞微核率显著升高 (P<0 .0 5 ) ;同时精原细胞 CE交换率也显著升高 (P<0 .0 5 )     

苯肾上腺素延长糖尿病大鼠心脏QT间期的机理研究

目的:分析苯肾上腺素显著延长糖尿病大鼠心脏QT间期的钾电流机理。方法:采用膜片钳全细胞式的记录方法,观察苯肾上腺素对正常及糖尿病大鼠左心室肌细胞的瞬时外向钾电流(Ito)及稳定状态的钾电流(Iss)的差异作用。结果:与对正常动物的作用相比,苯肾上腺素降低正常的和糖尿病大鼠的瞬时外向钾电流(Ito),和稳定状态的钾电流(Iss)。但与正常大鼠相比,降低糖尿病大鼠稳定状态的钾电流(Iss)更明显。结论:与正常动物相比,苯肾上腺素明显延长糖尿病大鼠离体心脏QT间期及动作电位复极90%水平时程(APD90)是由于其更显著降低左心室肌细胞稳定状态的钾电流(Iss)。     

基因芯片技术研究环维黄杨星D对大鼠肾脏基因表达的研究

目的:采用基因芯片技术研究环维黄杨星D(CVB-D)对大鼠肾脏基因表达谱的影响,初步探索其对肾脏毒性作用的机制.方法:10只SD大鼠随机分为正常组和CVB-D 10 mg·kg-1组,连续腹腔给药14d,分别从大鼠肾脏组织中提取总RNA,分离纯化后,反转录合成掺人生物素标记的cDNA探针,与基因芯片杂交,扫描芯片荧光信号图像后,统计处理并进行分析.选取5个差异表达基因,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法进行验证.结果:CVB-D组与空白组比较,共筛选出309条差异表达的基因,其中表达上调基因有147条,下调基因有162条,涉及凋亡通路相关基因、细胞周期相关基因、Ca2+信号通路相关基因、MAPK信号级联等.结论:CVB-D的肾毒性可能与凋亡通路、MAPK信号级联、细胞周期及Ca2+信号通路异常调控相关.     

TaqMan~实时定量RT-PCR检测G3型轮状病毒VP7基因方法的建立

目的:建立一种检测G3型轮状病毒VP7基因的TaqMan实时定量RT-PCR方法。方法:设计轮状病毒VP7基因型特异性引物和探针,采用体外转录RNA为标准品,建立TaqMan实时定量RT-PCR方法。结果与结论:本检测方法快速、灵敏且重复性好,可以对107～101copies.μL-1轮状病毒VP7基因进行有效检测,为G3型轮状病毒的检测和定量提供了有用的工具。