从临床标本中定量检测泌尿生殖道支原体耐药性的研究

目的比较抗生素对临床标本中泌尿生殖道支原体抗菌作用。方法采用直接肉汤药盘法定量测定了临床标本中２１１株解脲脲原体（Ｕｕ）和５４株人型支原体（Ｍｈ）对８种抗菌药物的耐药性。结果２１１株Ｕｕ对四环素、强力霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素、阿奇霉素、罗红霉素、交沙霉素耐药率分别为３８４％、２３２％、２０７％、６５４％、５１６％、０％、０９％及５７％；５４株Ｍｈ对四环素、强力霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素、阿奇霉素、罗红霉素、交沙霉素耐药率分别为５９２％，４８．１％，３３３％，７５９％，５００％，１００％，１００％及２７８％。耐四环素的Ｕｕ株对强力霉素、环丙沙星、米诺环素都有交叉耐药，但对阿奇霉素、罗红霉素、交沙霉素无交叉耐药，耐四环素的Ｍｈ株对强力霉素、氧氟沙星、环丙沙星、米诺环素和交沙霉素有显著性交叉耐药。结论提示泌尿生殖道脲原体的耐药性监测，对指导临床治疗具有重要意义。     

某医学院新生泌尿道支原体感染状况调查

目的了解大学生泌尿道支原体的感染状况，分析影响大学生泌尿道支原体感染的流行病学因素，为大学生泌尿道支原体感染的预防提供科学依据。方法以某高校医学院2005级新生为研究对象，按文献方法对其尿液进行支原体培养。同时制订调查表进行问卷调查，采用SPSS13．0进行统计学分析。结果998名大一新生中，阳性65例，其中女性54例，男性11例，总阳性率为6．5％。多因素logistic回归分析发现性别、父母健在情况和家庭居住地与泌尿道支原体的感染有关。结论大学生人群存在泌尿道支原体感染，并且女性感染率明显高于男性。父母健在情况、家庭居住地是影响大学生泌尿道支原体感染的危险因素。     

从T7 噬菌体展示cDNA 文库筛选生殖支原体黏附蛋白的互作蛋白

目的：从人尿道上皮细胞（SV-HUC-1）T7噬菌体展示cDNA文库筛选生殖支原体黏附蛋白（MgPa）的互作蛋白。方法：以原核表达、纯化的重组生殖支原体黏附蛋白（rMgPa）为靶分子,对人尿道上皮细胞T7噬菌体展示cDNA文库进行4轮生物淘选,采用T7特异性引物扩增阳性克隆的插入片段,PCR产物测序后进行BLAST分析,间接ELISA、斑点免疫印迹和Far-western blot检测阳性噬菌体与rMgPa的特异结合。结果：经过4轮生物淘选,噬菌体克隆富集明显;DNA测序后经BLAST比对分析,结果表明随机挑取的32个阳性克隆包括7种不同序列,其中以RPL35重复次数最多;间接ELISA、斑点免疫印迹和Far-western blot结果表明7个代表性噬菌体均能与rMgPa特异结合。结论：60S核糖体蛋白L35（RPL35）可能是MgPa的互作蛋白,为深入了解MgPa的生物学功能以及生殖支原体的致病机制奠定了实验基础。     

从临床标本中定量检测泌尿生殖道支原体耐药性的研究

目的 比较抗生素对临床标本中泌尿生殖道支原体抗菌作用，方法 采用直接肉汤药盘法定量测定了临床标本中２１１株解脲脲原体（Ｕｕ）和５４株人型支原体（Ｍｈ）对８种抗生菌药物的耐力药性。结果 ２１１株Ｕｕ对四环素，强力霉素，氧氟沙星，环丙沙星，米诺环素，阿奇霉素，罗红霉素，交沙霉素耐药率分别为３８．４％，２３．２％，２０．７％，６５．４％，５１．６％，０％，０．９％及５．７％，５４株Ｍｈ对四环素，强力霉素     

穿透支原体P35蛋白细胞粘附活性研究

目的研究穿透支原体（Mpe）P35蛋白的细胞粘附活性。方法IPTG诱导pQE31/p35原核表达载体在E.coli 中表达,用Ni-NTA Spin亲和纯化,Western blot鉴定表达产物。通过间接免疫荧光试验（IFA）、竞争抑制试验研究rP35对HeLa细胞的粘附活性。结果pQE31/p35在E.coli 中表达出分子量约35 kDa的蛋白质,Western blot鉴定其为特异性rP35蛋白。IFA发现rP35对HeLa细胞无明显的粘附活性;竞争抑制试验表明rP35不能抑制Mpe粘附HeLa细胞。结论P35可能不是Mpe的主要粘附分子。     

肺炎支原体荚膜多糖与DC-SIGN结合并促进IL-10的分泌

目的 研究肺炎支原体(Mp)荚膜多糖(CPS)与树突状细胞(DC)特异性细胞间黏附分子-3-结合非整合素分子(DC-SIGN,CD09)的相互作用及其对未成熟DC(iDC)分泌IL-10和IL-12的影响.方法 提取并纯化Mp的CPS和脂质相关膜蛋白(LAMPs),用间接免疫荧光检测CPS与DC-SIGN受体的作用;ELISA法检测CPS和LAMPs作用后iDC所分泌的IL-10,IL-12水平.结果 间接免疫荧光可见Mp CPS可结合到DC表面,且DC-SIGN的特异性封闭抗体可阻断CPS与DC的结合;ELISA检测发现CPS与LAMPs共孵育可促进DC分泌IL-10(P ＜0.05),而IL-12的表达水平刺激前后无统计学的差异.结论 Mp的CPS可识别并结合DC的DC-SIGN受体,并促进未成熟DC分泌IL-10.