细胞遗传不稳定环境诱变剂与肿瘤发生

细胞遗传不稳定、环境诱变剂与肿瘤发生余应年,张小山浙江杭州医科大学病理生理教研室和医学分子生物学实验室杭州３１００３１癌变启动阶段在肿瘤抑制基因（抗癌基因）与原癌基因中发生的点突变事件在动物和人类肿瘤中已有广泛证明,并认为这是癌变的关键机制。它的发生...     

用反义策略研究hMMS2基因在人细胞分裂增殖中的作用

目的 :ｈＭＭＳ2是人细胞中新发现的基因 ,其酵母同源基因ＭＭＳ2是一个抗增变基因。本研究用反义策略建立ｈＭＭＳ2基因表达阻断细胞系 ,以分析ｈＭＭＳ2基因的功能。方法 :1 ｈＭＭＳ2反义ＲＮＡ表达质粒构建 :用ＰｓｔＩ酶从ｐＢＳ -ｈＭＭＳ2上切出 837ｂｐ长ｈＭＭＳ2ｃＤＮＡ片断 ,两端切平后分别连上ＳａｌＩ连接子 ,ＳａｌＩ酶切后 ,将比目的片断连到改建的地塞米松诱导表达载体多克隆位点的切点上 ,通过酶切图谱分析筛选ｈＭＭＳ2反义ＲＮＡ表达重组子 ;2 细胞转染及筛选 :反向表达重组子用改良的磷酸钙法转染入ＦＬ细胞 ,通过Ｇ…     

转基因细胞系CHL-3A4可使硝苯吡啶的多药耐药逆转作用丧失

目的:检测本实验室构建的表达人细胞色素P450 3A4同功酶转基因细胞系CHL-3A4的硝苯吡啶氧化酶活性。方法:利用多药耐药细胞K562r的阿霉素(ADR)耐药性可被硝苯吡啶逆转,而硝苯吡啶又可特异地被CYP3A4代谢,观察硝苯吡啶在CHL-3A4 S9混合物 (S9 mix) 中孵育前后的生物学活性变化来判断CHL-3A4细胞的CYP3A4硝苯吡啶氧化酶活性。结果:K562r细胞在含有硝苯吡啶(NIF) (12.5 μg·L^-1)的培养基中培养时,对阿霉素的IC₅₀值从不含NIF时的(6.47±0.60) mg·L^-1降至(0.89±0.15) mg·L^-1(P＜0.01)。K562r细胞在含有分别经CHL-3A4、CHL细胞的S9组分和灭活的CHL-3A4细胞的S9组分预处理的NIF(12.5 μg·L^-1)的培养基中培养时,阿霉素对其的IC₅₀值分别为(6.10±0.50) mg·L^-1、(0.32±0.09) mg·L^-1和(0.32±0.04) mg·L^-1。前者和后两者相比P＜0.01。 结论:实验室构建的表达人细胞色素P450 3A4同功酶转基因细胞系CHL-3A4具有硝苯吡啶氧化酶活性,从而进一步确证其表达产物为人CYP3A4同功酶。并为今后检测CYP同功酶活性提供了一种新的途径。     

氰戊菊酯的UDS试验结果

UDS试验是检测DNA损伤的短期试验之一.用UDS试验检测三种不同来源的氰戊菊酯,氰戊菊酯№1和№2浓度在5×10~(-8)～10~(-5)mol/L,有或无代谢活化系统时,都无诱发UDS作用.氰戊莉酯№3在不和体外活化系统,浓度为5×10~(-5)mol/L时结果为阳性,并能获得剂量效应关系.加有大鼠肝微粒体制剂时,氰戊菊酯№3浓度在5×10~(-8)～10~(-5)mol/L,无诱发UDS作用.比较三种氰戊菊酯制品的纯度后认为,№3的DNA损伤作用可能是样本中之杂质所引起.     

用^32P后标记法研究交链孢酚及菜油油烟凝聚物对FL细胞DN…

交链孢酚是河南林县污染粮食中分离的互隔交链孢霉的代谢提取物，可能与食管癌的发病有关，菜油油烟凝聚物可能与非吸烟妇女的肺癌发生有关。人羊膜上皮细胞系ＦＬ细胞接触不同剂量的交链孢酚；及经β－萘磺酮诱导２４ｈ的ＦＬ细胞接触不同剂量的菜油油烟凝聚物，用＾３２Ｐ后标记法检测其加成物，分别可分离到１个和４个主要加成物斑块，均有明显剂量依赖性关系，提示该两种物质有明显的细胞遗传毒效应。     

大蒜素对甲基甲磺酸酯(MMS)诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的影响

人们已认识到天然物质的某些成分是诱变和促使肿瘤发生的重要因素之一,但有些成分却是抗诱变和抗肿瘤的重要物质。国内外对蔬菜、水果等食物的抗癌作用已有不少报道。大蒜的抗癌作用也引起人们极大兴趣,已用多种不同终点的抗诱变方法进行探讨。本文报道用小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验方法,研究大蒜素对MMS 诱变效应的抑制作用。材料和方法实验动物为本校动物科繁殖的 NIH 小鼠,体重18～24克,每个剂量组雌、雄各5只。     

大鼠腹腔细胞致癌性试验——一种新的短期检测系统

本法特点是体内给药活化,体外培养一周,时间短、经济。本法可作为验证体外微生物诱变试验初步结果的手段。实验用成年大鼠,经口给药。第一次(或一次)给药后6小时,向腹腔内注入含有Al(OH)_3(4 mg/kg)之培养基10 ml,以刺激腹腔细胞的分裂。Al(OH)_3的作用可能是使细胞的溶血卵磷脂增加,后者有促进细胞生长的作     

双-(O,O-二乙硫代磷酰)-二硫物诱发人培养细胞系的程序外DNA合成

双-(O,O-二乙硫代磷酰)二硫物〔Bis-(O,O-diethylphosphinothioyl)-disulfide〕(简称“二硫物”)是一种新合成的有机磷杀菌剂。“二硫物”的结构式是:田间试验证明:它对水稻白叶枯病的防治效果相当于或优于5-氧吩嗪(叶枯净);对水稻纹枯病和瓜类白粉病也有防治作用。而且它对柑桔、山楂、苹果和棉花红蜘蛛类也有防治作用,故可用作杀螨剂。我们发现     

杀虫脒及其代谢物对细菌的诱变作用及细胞的DNA修复合成作用

杀虫脒是近年发展的高效新农药,对螨和稻螟均有毒杀效力,对温血动物的毒性中等。气巴-加基公司毒理部曾以杀虫脒及其代谢物喂小鼠终生,可致小鼠结缔组织恶性血管内皮瘤。据说杀虫脒主要代谢产物4-氯邻甲苯胺用Ames试验测试,在S-9活化系统作用下,对TA_(100)及TA_(98)具有诱变作用,但未查见正式报告。1978年初,我室接受了杀虫脒致突变研究的任务。对上述检品,用两个测试系统进行检测。(1)沙门氏菌/