甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定细胞DNA聚合酶βmRNA表达水平研究

目的和方法：本实验室曾报道，低浓度０－２ μｍｏｌＬ 烷化剂甲基硝基亚硝基胍（ Ｎ－ ｍｅｔｈｙｌ－ Ｎ′－ ｎｉｔｒｏ － Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ ， ＭＮＮＧ） 可以诱导哺乳类细胞遗传不稳定状态。为明确其发生机制，本文利用定量ＲＴ－ ＰＣＲ 方法，研究了该低浓度ＭＮＮＧ 对人ＨｅＬａ 及猴肾ｖｅｒｏ 细胞ＤＮＡ 聚合酶β（ｐｏｌ β） ｍ ＲＮＡ 表达水平的影响。结果：经０－２ μｍｏｌＬ ＭＮＮＧ２ ．５ ｈ 处理后，ＨｅＬａ 细胞ｐｏｌ βｍ ＲＮＡ 水平在６ ～２４ ｈ 内升高约１ 倍；而ｖｅｒｏ 细胞ｐｏｌ βｍ ＲＮＡ 水平在１２ ～３０ ｈ 内亦升高１倍左右。结论：提示ｐｏｌ βｍＲＮＡ 水平改变可能参与ＭＮＮＧ 诱发细胞遗传不稳定的发生     

人细胞色素P450 1A2 cDNA克隆及鉴定

为建立人细胞色素 P450转基因细胞 ,从人肝组织提取总 RNA,RT- PCR扩增人细胞色素 P4501 A2基因的 c DNA( CYP1 A2 c DNA) ,将其连接到p GEM- T载体上 ,并对 CYP1 A2 c DNA进行全序列测定 .结果与 Jaiswal等发表的 CYP1 A2 c DNA序列相比 ,所克隆的 c DNA,codon51 5AAT→ AAC都编码天冬酰胺 ,而 codon 51 0后面插入了一个CTG(亮氨酸 ) ,则与 Quattrochi等报道的相同 .本实验室克隆的 CYP1 A2 c DNA可能是一种新的CYP1 A2 c DNA,有可能来自于一种新的 CYP1 A2等位基因的转录 .     

茶多酚对氯霉素毒性作用的影响

氯霉素是一种广谱抗菌素，它的代谢失活主要器官为肝脏，首先被肝脏中细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ４５０）单加氧酶氧化。我们实验室曾证明β－萘黄酮（β－ＮＦ）可诱导人羊膜上皮细胞ＦＬ系（ＦＬ细胞）的ＣＹＰＰ４５０１Ａ１同功酶的活性，而茶多酚可抑制ＦＬ细胞ＣＹＰ４５０１Ａ１同功酶的活性。本实验以人羊膜上皮细胞ＦＬ系（ＦＬ细胞）和转入ＣＹＰ４５０１Ａ１基因的ＦＬ细胞（ＦＬ－１Ａ１细胞）为实验材料，观察茶多酚（Ｇ     

癌基因／抑癌基因与细胞增殖控制

癌基因／抑癌基因与细胞增殖控制浙江医科大学（３１０００６）余应年肿瘤细胞的失控性增殖是恶性肿瘤的基本特征之一。细胞增殖及其调节的分子机制已成为现代生物学与肿瘤学基础研究的热点。细胞周期的控制在稳定条件下有序的细胞周期进程酷似行走准确的时钟（细胞周期钟...     

致癌物引起猴肾细胞的遗传不稳定

由萘胺的体外生物实验探讨芳胺致癌作用机理崔明珍，项芒，裴淑，祝旭景，张丽帼，杨华，蔡丽，杨立新（北京市劳动卫生职业病防治研究所北京１０００２０）关于芳胺致癌作用机制，国内外曾有不同报道。我国戴乾圜提出了双区理论，认为芳香胺致癌，除代谢过程中氨基羟化形...     

细胞周期对细胞ADPRT基础活性及DNA损伤剂诱发活性的影响

真核细胞染色质中的腺苷二磷酸核糖基转移酶(ADPRT)是维持有效DNA切除修复所必需的。本研究证明在通透化了的FL细胞中ADPRT活性呈细胞周期依存性波动。它的活性峰值见于DNA合成峰值后的4～6小时;同步培养于G_1期的细胞在按触DNA-损伤剂,甲基硝基亚硝基胍(MNNG)、甲磺酸甲酯(MMS)及4-硝基喹啉氧化物(4NQO)后ADPRT活性明显升高。在细胞周期的不同阶段,MNNG/4NQO对ADPRT的刺激作用与细胞周期对它的影响呈叠加作用。但MMS对ADPRT活性的刺激作用却完全依存于基础酶活性。在基础酶活性最高时,MMS几乎不显示其ADPRT刺激作用。因而认为DNA-损伤剂引起的ADPRT刺激作用有不止一个机制存在。同步于G_1期的细胞最适合于显示DNA损伤后的ADPRT活性升高。上述细胞周期性影响可能同细胞周期中DNA修复的顺序性变化以及细胞对致癌物敏感性的周期性变化有关。     

SOS突变和突变抑制剂及其作用机制的研究

DNA损伤诱发的SOS反应和基因突变,以及SOS突变抑制作用是预防医学上亟待深入研究的课题。本研究对SOS突变和SOS突变抑制剂及其机制和相关技术进行了深入探索。     

化学致癌物、抗致癌物检测技术的基础和应用研究

本研究由于它的创新设计获1991年度卫生部科技进步一等奖。已在国内外发表论著33篇。主要内容有:1.非程序性 DNA 合成试验的改进本改进法以~(14)C胸苷预标记的同步化培养细胞为测试细胞,从而在测量非程序性DNA合成的~3H-胸苷掺入的比放射活性时可省略繁杂的DNA定量测定而以~3H/~(14)C放射活性比代替。使这个唯一     

FL细胞中细胞色素P450同工酶的诱导及其在诱变剂生物学检测系统中的应用

以芳烃羟化酶(AHH)、乙氧基异吩噁唑-O-去乙基酶(EROD)、乙氧基香豆素-O-去乙基酶(ECOD)及氨基比林-N-去甲基酶(APND)为标志酶、3-甲基胆蒽、β-萘黄酮、去甲肾上腺素及苯巴比安钠为诱导剂证明人羊膜FL细胞系有可诱导的细胞色素P450ⅠA及ⅡB基因的表达,有较宽的药物代谢酶谱。EROD及APND的最大诱导反应见于3-甲基胆蒽和去甲肾上腺毒复合诱导时。基础和诱导的AHH具有典型的细胞色素