N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍引起vero细胞基因表达改变及有关cDNA片段的初步鉴定

运用mRNA差异显示(DD-PCR)技术，通过26 对锚定及任意引物组合显示基因的差异表达情况，分离了7 个表达有差异的片段.其中3 个片段的相关基因属于对N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)处理的初级反应基因，2个属于次级反应基因.另有2 个片段的差异表达仅在蛋白合成抑制剂环己亚胺（CHM）合并MNNG处理时才出现.反向缝隙印迹杂交分析印证了2 个片段在DD-PCR中发现的改变，同时分析的本实验室分离的25个片段中，8 个片段的变化被验证与DD-PCR中的改变一致.序列分析结果显示这些片段与许多基因有高同源性，其中包括一些参与信息传导的基因.     

茶多酚对人羊膜上皮细胞FL系CYP1A1mRNA水平和转录的影响

本文采用快速印迹杂交和延续转录试验两种特异ｍＲＮＡ检测技术，在经β－萘黄酮（β－ＮＦ）诱导的人羊膜上皮细胞ＦＬ系中，观察了茶多酚对人羊膜上皮细胞ＦＬ系ＣＹＰ１Ａ１ｍＲＮＡ水平和转录的影响，结果表明，细胞中ＣＹＰ１Ａ１ｍＲＮＡ的含量和细胞核ＣＹＰ１Ａ１转录水平均比空白对照组增加，茶多酚可明显抑制其基础表达及β－ＮＦ的诱导作用。因此，我们认为茶多酚预防肿瘤的作用还可能与它影响细胞ＣＹＰ１Ａ１基因表达，     

细胞色素P4501A1基因mRNA的化学诱导及在人肝中的基础表达

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术研究了几种传代培养细胞和成人肝组织及人胚胎肝组织细胞色素Ｐ４５０１Ａ１（１Ａ１）基础表达水平并观察了几种化学诱导剂对人羊膜细胞ＦＬ系和原代胚肝细胞该基因ｍＲＮＡ水平的诱导．结果显示：３－甲基胆蒽，苯巴比妥，β－萘黄酮在不同程度上能高诱导ＦＬ细胞１Ａ１ｍＲＮＡ表达．ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＣＨＬ细胞及Ｖ７９细胞存在基础表达，但Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果提示其表达量极低．成人肝脏中１Ａ１亦存在极低的表达水平，而人胚胎肝脏不能用高灵敏度的ＲＴ－ＰＣＲ检测到痕迹表达，提示胚胎发育时期１Ａ１基因处于完全关闭状态．     

非抗癌剂配合化疗增强抗肿瘤效果的研究进展(综述)

化疗虽是治疗恶性肿瘤的重要手段之一,但由于存在的某些问题,例如抗肿瘤药物常常不能迅速地在瘤组织中达到有效浓度,在正常组织中蓄积并产生各种毒性反应,某些药物在体内的活化作用低、分解快以及产生耐药性等等,无疑均会影响化疗的进行及其疗效。近几年来,人们根据肿瘤病理和药物代谢方面的某些特点,发现了多种非抗癌剂配合化疗能克服     

哺乳类细胞非定标性突变机制的研究

非定标性突变是发生在DNA损伤剂攻击部位之外的突变，其在哺乳类细胞的形成机制是一个亟待解决的课题。本文作为系统研究的一部分，首先观察化学诱变剂甲基硝基硝胍（MNNG）引起的非洲绿猴肾vero细胞非定标性突变率的时相变化，继而在突变率最高时点分别以RNA合成抑制剂和蛋白质合成抑制剂阻断基因转录和翻译，结果发现前者能使MNNG引起的非定标突变率下降到对照水平，而后者反而使突变率大大增高。提示非定标性突变形成过程中可能发生基因表达改变，并提出引起这种改变的细胞信号传导通路假设和今后的研究方向。     

DNA损伤剂与ADPRT介导的细胞NAD含量下降

本文观察了一系列已知致癌物及其非致癌性类同物对经β—萘黄酮诱导过的或未经诱导的人FL细胞中的作用,以验证有ADPRT介导的,即可被ADPRT抑制剂防止的细胞NAD含量下降作为判断终点来检测化学物质诱发的DNA损伤的可能性。实验表明在MFO诱发过的FL细胞中AFB_1(1～100μmol/L),B(a)P(10～1000μmol/L),芘(1～1000μmol/L),DMA(10～100μmol/L),2—AAF(100～1000μmol/L)及 EC(10～1000μmol/L)可引起剂量依存性ADPRT介导的细胞NAD含量下降,而蒽(0.1～1000μmol/L),4—AAF(0.1～1000μmol/L),IsoPC(1～100μmol/L),黄樟素0.1～100μmol/L)及 Cy(1～100μmol/L)则否。直接作用致癌物ProLac(1～100μmol/L)及其非致癌性类同物BuLac(1～1000μmol/L)在MFO未经诱导的FL细胞中皆不能诱发ADPRT介导的细胞NAD含量降低。与非程序性DNA合成试验结果相对比,上述结果表明这一以ADPRT介导的细胞NAD含量下降作为判断终点的新检测法是一个检测化学诱变剂/致癌物特异而价廉的方法,其特异性与灵敏度与UDS试验相仿。     

人羊膜细胞FL系中细胞色素P450同功酶的诱导

人羊膜细胞FL系含有低水平的基础EROD,ECOD和APND活性,其中EROD活性可被3—MC,β—NF及NE诱导达对照的3.1～6.7倍;ECOD和APND活性则不仅可被上述三种诱导剂还可被PB所诱导,分别增加到2～3和1.5～2倍的活性。当用3—MC与NE同时处理细胞时,EROD和APND活性的升高明显强于3—MC单独处理时。在诱导剂撤除后,细胞内EROD和ECOD的活性维持诱导后的高水平达24～36 h之久。提示诱导后一定时间内细胞对外来化合物的代谢能力明显增强。     

叶青双对哺乳类细胞的DNA损伤作用

叶青双为一种新农药,属噻二唑类化合物,其化学名为N,N’—甲撑—双(2—氨丛—5巯基—1,3,4,—噻唑),[N,N’—Methylenc—bis(2—amino—5 sulfhydryl—1,3,4—thiadizolc)],又名二巯基敌枯双。结构武为:     

单克隆抗体在体内肿瘤定位中的应用

三十多年前,Pressman等就己提出用放射性核素(radionuclides)标记抗体作体内肿瘤定位的概念,并开创了这一领域的研究.但发展缓慢.只是近七年来,由于γ-闪烁照相术(gamma scintigraphy)的发展和一些抗肿瘤高纯度抗体的制备,才促进了这类研究的较快发展.特别是单克隆抗