猴肾vero细胞中MNNG诱发非定标性点突变的序列特异性分析

我们以穿梭质粒ｐＺ１８９作为探针已在猴肾ｖｅｒｏ细胞中证实了非定标性突变的存在。本实验进一步对突变子质粒中的靶基因ｓｕｐＦ ｔＲＮＡ基因作序列分析，以揭示非定标性突变的序列特异性。结果表明：８９％（２４／２７）的碱基置换发生在Ｇ：Ｃ碱基对，５９％（１６／２７）为颠换，４１％（１１／２７）为转换，主要为Ｇ：Ｃ→Ｔ：Ａ颠换和Ｇ：Ｃ→Ａ：Ｔ转换；４８％的碱基置换发生在ｓｕｐＦ ｔＲＮＡ基因的６个位点中，     

DNA低甲基化不是化学致癌启动过程的必经途径

曾有一种观点认为化学致癌启动过程的外造传机制中DNA去甲基化是很重要的。根据有:一些化学致癌物可抑制DNA甲基化酶活性(体外),可引起细胞DNA甲基化水平降低:DNA低甲基化与基因表达改变有关。但证据尚不充分。 本文通过HPLC直接测量致癌物处理细胞DNA中的5-甲胞嘧啶含量及用限制性内切酶分析DNA中-CCGG-序列的甲基化状态观察DNA的甲基化水平。为了把研究对象严格局限于新合成DNA中,在后一方法中,被研究的细胞DNA在收获前24h用3~H-TdR标记,分析电泳谱中的放射活性分布。     

c─k─ras反义寡核苷酸抑制Hce─8693细胞生长的序列特异性研究

ｃ─ｋ─ｒａｓ反义寡核苷酸抑制Ｈｃｅ─８６９３细胞生长的序列特异性研究钱瑛，董海涛，余应年，陈星若（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）原癌基因的突变激活和抑癌基因的失活是恶性肿瘤发生发展的分子生物学基础。选择性抑制突...     

茶多酚对FL细胞EROD活性及细胞CPYIA1mRNA水平影响的研究

茶多酚对ＦＬ细胞ＥＲＯＤ活性及细胞ＣＰＹＩＡ１ｍＲＮＡ水平影响的研究冯磊，余应年，陈星若（浙江医科大学病理生理学教研室及医学生物学实验室杭州３１００３１）茶多酚是茶叶提取物的主要成份。许多研究表明它具有抑制亚硝胺类和ＡＦＢ１等致癌物对动物的致癌作用。...     

Ames沙门氏菌诱变性试验补篇

在我室1978年发表“方法”及1982年发表“小结”的基础上,吸取了近年来国外在Ames试验基础同实际工作中的发展,加上我室在具体实践中积累的经验,就以下4个方面,如新测试菌株组,培养基成份和在制备过程中的影响,菌株培养条件和在不同生长期的影响,试验结果的统计学问题等,加以叙述,作为Ames试验的补篇。     

FL细胞中AHH的诱导及其在UDS试验中的应用

实验证明在基础芳烃羟化酶活性很低的人FL细胞系中该酶活性可因去甲肾上腺素,β-萘黄酮及3-甲基胆蒽的诱导而明显升高。基础及诱导的芳烃羟化酶具有细胞色素P-448依存性混合功能氧化酶的性,即依赖于还原型辅酶Ⅱ,对CO敏感和可被7,8-苯黄酮抑制。在诱导剂自培养基中撤除后,至少在24～36小时内芳烃羟化酶活性仍维持在较高水平。应用芳烃羟化酶经过诱导的细胞,用非程序性DNA合成(UCS)试验捡测前诱变剂/前致癌剂证明,黄曲霉毒素B_1、3-甲基胆蒽及苯并(a)芘等前诱变剂/前致癌剂可在经β-萘黄酮诱导的细胞中诱发很明显的UDS反应,而在未经诱导的细胞中为阴性或仅有轻微反应。上述结果表明这种新设计对前诱变剂/前致癌剂的检测是可行的,但尚需进一步研究以完善之。     

N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍诱发的vero细胞蛋白酪氨酸磷酸化改变

为了研究细胞信号转导通路在致突变物 N-甲基 - N′-硝基 - N-亚硝基胍 ( MNNG)致非定标性突变作用中的地位 ,猴肾 vero细胞在 MNNG处理后 0 ,6,1 2 h制备全细胞抽提液 ,用 Western印迹法观察细胞蛋白质酪氨酸磷酸化的变化 .结果发现 0 .2μmol· L-1MNNG处理 2 .5h后再经 0 h和 1 2 h,45ku蛋白质酪氨酸磷酸化程度增强 ,经 6h时还有62 ku蛋白质酪氨酸磷酸化程度增强 ,1 mg·L-1蛋白合成抑制剂环己米特 ( CHM)处理 vero细胞 1 2 h也可引起 45ku蛋白质酪氨酸磷酸化程度增强 .提示 MNNG处理可能诱发应激相关信号转导通路的激活 .