PKH26标记的人脐带间充质干细胞在大鼠化疗性卵巢早衰模型中的卵巢迁移

目的:人脐带间充质干细胞用PKH26标记,探讨人脐带间充质干细胞在大鼠化疗性卵巢早衰模型中的卵巢迁移示踪。方法:提取并培养人脐带间充质干细胞,按PKH26标记程序进行细胞标记,透射电镜观察标记组和未标记组细胞的超微结构,测定细胞增殖、周期、凋亡情况。荧光显微镜下观察PKH26标记的人脐带间充质干细胞移植后的卵巢情况。结果:标记后细胞的形态无明显差别,均为成纤维细胞样,细胞增殖未见明显影响,细胞生长状态良好,PKH26标记阳性的细胞主要存在卵巢血管中。结论:PKH标记技术可用于人脐带间充质干细胞移植治疗化疗所致卵巢早衰中的归巢、分化、增殖的研究。     

宫腔粘连的诊治现状

宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)是指宫腔肌壁和(或)宫颈管的全部或部分闭锁[1]。任何子宫手术都有可能导致宫腔粘连的形成[2],而产后刮宫术被认为是引起IUA最常见的原因[3]。IUA患者的临床表现与IUA的部位、面积及程度有一定关系,但两者之间不完全一致,主要的临床症状为月经量过少、闭经、继发性不孕、周期性下腹痛、反复流     

靶向核因子κB p65siRNA促人血管内皮细胞EAhy926的凋亡

背景:作者前期工作已经证实,子宫内膜异位症患者的在位、异位内膜中核因子κBmRNA和蛋白均表达升高,核因子κB参与了子宫内膜异位症细胞黏附、侵袭和血管形成的病理过程.目的:观察RNA干扰技术(RNAi)靶向抑制核因子κB p65基因对人血管内皮细胞(EAhy926)增殖的影响.方法:10 μg/L血管内皮生长因子刺激下培养EAhy926细胞,给予转染核因子κB p65 siRNA,同时设立对照组,分别是阴性对照siRNA转染组、空白脂质体组及正常对照组(不给予其他任何处理),48 h后分别采用Heochst 33342荧光检测法、MTT法及流式细胞仪术检测细胞的增殖抑制与凋亡情况.结果与结论:与正常对照组比较,核因子κB p65 siRNA组的细胞增殖抑制率及细胞凋亡率均明显升高(P＜0.05);而阴性对照siRNA转染组及空白脂质体组的细胞增殖抑制率及细胞凋亡率则差异无显著意义.结果证实,核因子κB p65 siRNA能显著抑制人血管内皮细胞增殖,促进内皮细胞的凋亡发生.     

扭胞凋亡与子宫内膜异位症的研究进展

细胞凋亡又称程序性细胞死亡,指有核细胞在一定条件下通过启动内部机制,经过一连串的细胞变性,最终发生的主动死亡过程。细胞凋亡是组织生长、更新以及清除异常细胞的重要手段。子宫内膜异位症(内异症)是子宫内膜出现在子宫腔以外,是一种同不孕有关的常见病,且发病率呈上升趋势,占妇女人群的10％左右,引起腹痛、痛经、性交困难和不孕等。近年研究表明细胞凋亡在子宫内膜异位症的发生、发展和治疗中具有重要的意义,现就细胞凋亡与子宫内膜异位症的研究进展综     

腹腔镜手术前后联合曲谱瑞林治疗IV期子宫内膜异位症的比较分析

目的：探讨腹腔镜手术与曲谱瑞林联合治疗Ⅳ期子宫内膜异位症（EM）的最优方式。方法：对62例Ⅳ期EM患者行回顾性分析,32例于腹腔镜术后肌注曲谱瑞林,3．75mg,每月1次,连续3月;30例先使用3个月曲谱瑞林后再手术,用法同前。比较二者围手术期情况和远期预后。结果：两组手术时间分别为（126±29）min和（79±26）min,出血量为（390±32）ml和（180±60）ml,差异均有显著性（P〈0．05）。随访2～5年,其妊娠率、复发率及盆腔疼痛缓解率差异均无显著性（P〉0．05）。结论：与术后使用GnRH—a类药物相比,腹腔镜手术前用药疗效相似,但更有利于手术的实施。     

shRNA转染对异位内膜细胞survivin基因的靶点抑制作用

目的 构建靶向人survivin基因的短发夹状RNA(shRNA)慢病毒载体,观察其对异位内膜细胞survivin基因的抑制作用.方法 设计干扰人survivin基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核酸后克隆到pGCL-GFP载体,PCR鉴定和测序分析及阳性克隆质粒抽提,在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助质粒和survivin基因重组慢病毒载体导入293T细胞包装病毒,测定病毒滴度.感染人异位子宫内膜细胞,采用RT-PCR测定细胞中survivin mRNA的表达,并与未转染及空转染细胞进行比较.结果 慢病毒载体PCR和测序结果与预期结果一致,经包装产生的病毒滴度为8×10 8U/ml.Survivin shRNA慢病毒载体感染人异位内膜细胞后,Survivin mRNA水平为0.15±0.03,明显低于阴性对照组0.42±0.06和空白对照组0.48±0.08(P<0.01);而阴性对照组与空白对照组相比无统计学差异.结论 成功构建针对survivin基因的shRNA慢病毒载体,体外感染人异位内膜细胞后可有效抑制survivin基因的表达,为研究子宫内膜异位症分子病冈和基因治疗提供了新的平台.     

人重组内皮抑素基因的克隆与融合表达

目的构建人内皮抑素(endostatin)融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中表达。方法用反转录多聚酶链反应(RT—PCR)得到人内皮抑素全基因,连接PGEM—T载体,测序确认,定向克隆重组入pTRX表达载体,转化大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导表达。结果经SDS—PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,大小与预期相符合。结论人内皮抑素基因在原核细胞表达载体pTRX中获得成功表达,为应用内皮抑素进行肿瘤的抗血管生成治疗奠定了基础。     

子宫输卵管弹力节育器(UTED)的研制及临床应用

<正> 本文介绍一种新型节育器(UTED)的研制和使用过程,其特点是置入宫腔后可自动堵塞双侧输卵管口,并兼有含铜节育器的作用。自1984年12月到1988年8月放置1061例,共使用妇女     

广东地区妇女子宫平滑肌瘤遗传易感性与HLA-DRB1、DQA1、DQB1相关性的研究

目的分析子宫平滑肌瘤与ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＤＱＡ１、ＤＱＢ１等位基因的相关性,从而探讨子宫平滑肌瘤患者的遗传易 感性。方法　用ＰＣＲ－ＳＳＰ及ＰＣＲ－ＳＳＯ技术对５１例外科手术后病理证实为子官平滑肌瘤患者和５０例正常妇女进行 ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ＤＱＡ１、ＤＱＢ１等位基因的基因分型。结果　ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０２,ＤＱＡ１＊０６０１在子宫平滑肌瘤组明显高于对照 组（Ｐ＜０．０５,ＲＲ＝５．３７８,１５．４）,而ＤＲＢ１＊０１、＊０７,ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０ｌ０２却表现为对照组增高（Ｐ＜０．０５,ＲＲ＝０．２２５,０．３７５, ０．３２９）。结论ＤＲＢ１＊０２、＊０１、＊０７,ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０６０１、＊０１０２基因与子宫平滑肌瘤的遗传易感性相关联。