病例教学法在生物化学教学中的评价

第三军医大学近年在临床医学、预防医学和检验医学等不同专业五年制本科的生物化学教学中进行了病例教学法尝试和探索。通过 2 0 0名学生的问卷调查 ,结果表明 :绝大多数学生认为病例教学能激发学习兴趣 ,提高能力 ,并能引导将生化理论与临床问题相联系 ;约有 65%的学生认为病例教学不能提高学习效率。进一步分析发现 ,上述结果在不同专业的五年制学生之间没有明显差异。     

PDP—PEG2000-DSPE修饰的长春新碱脂质体的制备及其包封率测定

目的研制载有长春新碱并用PDP-PEG2000-DSPE对脂质体膜修饰的脂质体并且测定其包封率。方法采用薄膜蒸发超声分散法制备长春新碱脂质体,并用PDP-PEG2000-DSPE对脂质体膜修饰。应用激光电位粒度仪Zeta3000,以去离子水为分散介质测定样品的体积平均粒径。以高效液相色谱法测定其含量和包封率。结果长春新碱脂质体的平均体积粒径大约150nm左右,包封率40%。结论薄膜蒸发超声分散法适用于制备长春新碱脂质体;高效液相色谱法操作简单,准确,重复性好,可用于测定长春新碱脂质体的含量和包封率。     

Bcl-2表达受抑可增加单核白血病细胞系对TNFα的敏感性

 目的　探讨Bcl-2反义基因在单核白血病细胞系U937细胞中的作用,以期丰富Bcl-2及其反义核酸调控肿瘤细胞凋亡的资料。方法　将反义Bcl-2基因转染于U937细胞,建立U937/as-bcl2细胞模型,经流式细胞技术检测模型细胞Bcl-2的的表达水平,通过细胞计数观察模型细胞在正常培养条件下和有重组人肿瘤坏死因子α(rhTNFα)存在时的生长和存活特性变化。结果　① U937/as-bcl2模型细胞的Bcl-2蛋白表达水平明显下降,但其在正常培养条件下的生长和存活能力无明显变化。② 在rhTNFα的作用下,模型细胞的存活率较对照细胞者明显下降。结论　① 单独反义bcl-2基因转染可明显抑制U937细胞Bcl-2的表达,但对细胞在正常培养条件下的生长和存活能力无明显影响。② 反义Bcl-2基因转染可增加U937细胞对TNFα的敏感性。     

程序性细胞死亡的哺乳类基因调控

程序性细胞死亡（ＰＣＤ）是一种与“坏死”不同的主动性“细胞自杀”过程。其调控机制重要而复杂，是一个由多基因参与的系统工程。其中ＰＣＤ的哺乳类基因调控是目前生命科学中的一个研究重点。本文简要综述了近年来发现的与ＰＣＤ调控相关的主要哺乳类基因的可能作用机制，并对其诱导或抑制ＰＣＤ的生物学意义进行了初步探讨，。     

运用3'RACE验证LongSAGE文库构建后白念珠菌不同菌相的差异表达基因

目的鉴定从LongSAGE文库筛选到的白念珠菌不同菌相表达基因差异表达标签JMD8和JSW10所代表基因.方法诱导白念珠菌菌丝相的表达后,运用3'RACE技术扩增白念珠菌差异表达基因标签基因片段,纯化回收后,T/A连接,经氯化钙法转化大肠杆菌, X-gal/IPTG诱导表达,在阳性菌株中抽提质粒后酶切、测序.结果两个片段均能在GenBank中找到同源序列,Score值小于40,Evalue小于0.5.结论鉴定了白念珠菌LongSAGE标签JMD8和JSW10代表的基因分别为EFT2和SHMI I.     

教学方法改革在提高生物化学教学质量中的探讨

教学方法改革是本校推进人才培养模式转型的重要举措。生物化学是高校医学专业的必修课程,是进行教学方法改革的重要学科。为进一步提高生物化学教学质量,本研究在不同层次学生的生物化学教学中选择合适的教学方法,进行课堂教学方法改革,取得了理想的教学效果,从而为教学方法改革的应用积累了一定的经验。     

人层粘连蛋白α4链LG4-5组件的原核表达及多克隆抗体制备

目的利用基因工程技术克隆、表达人层粘连蛋白α4链LG4-5组件(human laminin alpha4 LG4-5 module,hLNα4LG4-5)蛋白并制备其特异性多克隆抗体.方法采用RT-PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG4-5的cDNA片段,T/A克隆法将其插入pMD-18T载体进行测序.采用DNA重组技术构建原核表达载体pET-28a-LG4-5,用BL21(DE3)/pET系统表达hLNα4LG4-5融合蛋白,以SDS-PAGE鉴定所表达的融合蛋白.用含融合蛋白的聚丙烯酰胺凝胶颗粒免疫家兔,制备抗hLNα4LG4-5多克隆抗体,Western印迹法检测抗体的特异性.结果成功克隆了hLNα4LG4-5的cDNA片段,12%SDS-PAGE电泳检测显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET28a-LG4-5总蛋白中出现一条分子质量为42×103的新蛋白带,制备了效价为1:10 240的hLNα4LG4-5多克隆抗体,Western印迹分析证实可检测到特异性目的蛋白带.结论克隆并原核表达了hLNα4LG4-5蛋白,制备了特异性抗hLNα4LG4-5的多克隆抗体,为进一步研究LG组件在疾病发生中所起的作用打下了基础.     

类法尼醇X受体在巨噬细胞中下调单核细胞趋化蛋白1的表达

目的研究小鼠巨噬细胞株ANA-1中类法尼醇X受体的表达情况,并进一步研究类法尼醇X受体天然配体鹅脱氧胆酸在ANA-1中对单核细胞趋化蛋白1表达的影响,以探讨类法尼醇X受体在动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应检测类法尼醇X受体在ANA-1细胞中的表达,及鹅脱氧胆酸处理后单核细胞趋化蛋白1的转录水平,Westernblot检测类法尼醇X受体的表达及其激活后对自身蛋白表达的调节,以及单核细胞趋化蛋白1蛋白的表达水平。结果类法尼醇X受体在ANA-1中表达,并依赖鹅脱氧胆酸浓度自我上调,鹅脱氧胆酸能显著下调单核细胞趋化蛋白1的表达水平(P<0.05)。结论类法尼醇X受体在小鼠巨噬细胞株ANA-1中组成型表达并呈配体浓度依赖性自我上调,类法尼醇X受体激活后可通过直接或间接方式下调单核细胞趋化蛋白1的表达。     

创伤性MODS患者血可溶性白细胞分化抗原14与内毒素比值变化

目的 探讨创伤多器官功能不全综合症（MODS）患者血浆可溶性白细胞分化抗原14与内毒素比值（sCD14／LPS）变化及其临床意义。方法 测定正常对照组，创伤MODS生存组和MODS死亡组血浆sCD14和IPS的摩尔浓度含量，并计算sCD14和IPS比值。观察创伤MODS患者血浆sCD14／IPS变化及其与主要器官功能受损指标的关系。结果 创伤性MODS各组血浆sCD14，LPS均明显高于正常对照组（P〈0．01），且创伤MODS死亡组LPS明显高于创伤MOIYS生存组（P〈0．01），但sCD14与创伤MODS生存组没有显著差别。创伤MODS生存组sCD14／IPS与正常对照组无显著差异，MODS死亡组sCD14／IPS明显低于MODS生存组（P〈0．01）。创伤MODS患者血sCD和IPS水平均与血谷丙转氨酶、肌酐和二氧化碳分压明显正相关（P〈0．01），但sCD14／IPS与血谷丙转氨酶、肌酐和二氧化碳分压明显负相关（P〈0．01）。sCD14／IPS与血谷丙转氨酶、肌酐和二氧化碳分压相关系数绝对值最大。结论 创伤性MODS患者血sCD14浓度升高幅度不如IPS。sCD14／LPS比值可能作为判断MODS患者器官功能不全程度及预后转归的预警指标。