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目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组:野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(shMR)组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果:(1) MR shRNA能明显抑制RAW 264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2) 从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组(P<0.05),说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3) WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期比例明显下降,增殖指数下降(P<0.05)。(4) WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。 相似文献
52.
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金人伊 《国际输血及血液学杂志》1980,(2)
作者用直接胎儿镜在宫内取胎儿血作Ⅷ因子测定,对血友病作出了正确的产前诊断。观察组6孕妇经Ⅷ因子凝血活性,相关抗原,凝血抗原或基因分析4例肯定为血友病携带者,2例不能排除。例1,2,5及6家中的先证者的Ⅷ因子凝血活性均<1单位/100毫升(u/d1),凝血抗原均<8u/d1。重症血友病的凝血抗原均<3u/dl。方法Ⅷ因子凝血抗原测定用Lazarchick,noyer放射免疫法。相关抗原测定用Hoyer液相放射免疫法。凝血活性测定用Pool,Robinson改良法。正常混合血浆中以100u/dl为标准。结果对照组Ⅷ因子相关抗原50~155u/dl,凝血抗原17~94u/dl,凝血抗原:相关抗原均 相似文献
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苯丙酮尿症(PKU)是由于苯丙氨酸羟化酶(PAH)缺乏而致的隐性遗传性代谢性疾病。由于患儿苯丙氨酸(Phe)含量增高,影响脑组织发育,导致智力下降。为此,《中华人民共和国母婴保健法》已将其列为法定筛查项目之一。本院筛查中心从2002年9月~2006年12月对江苏省扬州地区新生儿70905例,进行了PKU筛查,现报告如下。 相似文献
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57.
目的 评价不同脂肪乳剂预先给药对罗哌卡因致老龄大鼠心血管毒性的影响.方法 健康雄性SD大鼠24只,月龄18月,体重400~550 g,随机分为3组(n=8):生理盐水组(NS组)、长链脂肪乳剂组(LLE组)和中/长链脂肪乳剂组(MLE组).腹腔注射氯胺酮100 mg/ks麻醉,监测ECG、BP和HR,气管插管后行机械通气,潮气量2 ml/100 g,通气频率60次/min.静脉注射维库溴铵0.5 mg维持肌松.NS组、LLE组和MLE组分别经颈静脉输注0.9%氯化钠注射液、20%长链脂肪乳剂注射液和20%中/长链脂肪乳剂注射液,输注速率均为3 ml·ks~(-1)·min~(-1);5 min后均静脉输注0.75%盐酸罗哌卡因注射液10 mg·ks~(-1)·min~(-1),直至出现心跳停止.记录出现心律失常时、BP较基础值下降20%时和心跳停止时罗哌卡因的用量.结果 与NS组比较,LLE组和MLE组出现心律失常时、血压较基础值下降20%时和心跳停止时罗哌卡因的用量增加(P<0.05);LLE组和MLE组出现心律失常时、BP较基础值下降20%时和心跳停止时罗哌卡因的用量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 长链脂肪乳剂和中/长链脂肪乳剂预先给药可减轻罗哌卡因致老龄大鼠心血管毒性. 相似文献
58.
目的 了解两种不同毒力结核杆菌的纯化蛋白衍生物刺激下人单核-巨噬细胞(THP-1)凋亡的差异及其与Toll样受体-2(TLR-2)的相关性.方法 分别用等浓度的高毒力结核杆菌衍生蛋白(H37Rv-PPD)和低毒力结核杆菌衍生蛋白(BCG-PPD)在3、8、15和24 h刺激分化成熟的THP-1细胞;Hochest染色后观察细胞凋亡及坏死情况.流式细胞仪检测细胞Annexin V蛋白以判定凋亡及TLR-2表达情况;加入TLR-2阻断剂后,再用流式细胞仪测定细胞表面TLR-2的阻断效果及凋亡情况.结果 BCG-PPD刺激下细胞以凋亡多见,而H37Rv-PPD刺激下细胞核则多呈坏死状.凋亡率随时间升高,第24小时凋亡比例高达30.2%,而同时间点TLR-2的比例为8.8%;应用TLR-2阻断剂后,每个时间点TLR-2表达比例均在3%以下,对应时间点凋亡比例下降,第24小时凋亡比例仅为10.5%.H37Rv-PPD可引起TLR-2高表达,第24小时TLR-2表达率为17.2%,该时间点凋亡率仅为7.7%;TLR-2阻断后,其表达率在对照波动范围内,但凋亡率与TLR-2未阻断前相比变化不大.结论 BCG-PPD主要诱导THP-1的凋亡,且与TLR-2有一定的相关性;而H37Rv-PPD主要诱导THP-1的坏死.Abstract: Objective To study the cell death in macrophages (THP-1) stimulated with different agonists (H37Rv-PPD or BCG-PPD) and to investigate the relationship between Toll like receptor (TLR)-2 and THP-1 apoptosis. Methods H37Rv-PPD and BCG-PPD were used to stimulate THP-1 cells for 3 h, 8 h, 15 h and 24 h, respectively with or without TLR-2 blockade. Cells were analyzed by flow cytometry to detect the TLR-2 expression. Annexin V staining and Hochest staining were performed to evaluate apoptosis. Results The apoptosis cells were increased when stimulated with BCG-PPD and the percentage was 30.2% at 24 h, which were confirmed by Hochest staining.However, the expression of TLR-2 did not increase simultaneously with percentage of 8.8% at 24 h.Nevertheless, most cells presented with necrosis form when stimulated with H37Rv-PPD and the expression of TLR-2 remained at high level with the percentage of 17.2% at 24 h, while the percent of apoptosis rate was only 7.7%. Under treatment of TLR-2 antibodies, the percentage of apoptosis decreased to 10.5% at 24 h of BCG-PPD stimulation and TLR-2 expressions were down-regulated to less than 3% at all time points; but after H37Rv-PPD stimulation, the percentage of apoptosis and TLR-2 expression did not changed obviously. Conclusions The attenuated BCG-PPD induces THP-1 apoptosis predominately, which is partially correlated with TLR-2 expression. While virulent H37Rv-PPD induces THP-1 necrosis predominately. 相似文献
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目的:本研究旨在厘清大量抗生素耐药性(Antimicrobial Resistance,AMR)领域内以人类为主题的研究所揭示的研究经验和未来趋势,并分析主要科研合作关系,为中国未来开展抗生素耐药性领域的研究提供参考。方法:以Web of Science 为检索数据库,检索获取1990—2021年的研究文献,根据全球相关重要政策和行动计划,划分三个时间阶段,使用Citespace、Hiscites 和 VOSviewers软件进行文献计量分析。结果:1990年至今,AMR领域内以人类为主题的研究同全球AMR治理行动的发展方向基本一致。研究形式上,表现为多学科交叉程度不断增加。研究内容上,表现为流行病学的相关研究的重要性持续上升、基因层面研究纵深发展的特点。同时,国家间的研究合作网络逐渐扩大。近10年来我国的发文量快速增长,但对外合作程度仍然相对较低。该领域的研究发展趋势方面,可能会继续维持强化多学科、多部门和多国合作的发展方向,重点关注高质量流行病学数据收集与分析的研究。结论:未来应继续重视“One Health”理念在AMR领域的治理和研究中的重要性,加强我国国内研究和治理能力的同时,与各国开展更有针对性地合作,提升我国在全球AMR治理行动中的参与。 相似文献
60.
目的探讨ⅠA期肺腺癌经肺泡腔内气道播散(STAS)的危险因素。方法回顾性收集2020年11月至2021年12月于新疆医科大学第一附属医院胸外科完成解剖性肺切除术且病理诊断为ⅠA期肺腺癌患者的临床资料。根据病理结果分为STAS阳性组和STAS阴性组。采用单因素分析及二元Logistic回归分析ⅠA期肺腺癌发生STAS的危险因素。结果纳入肺腺癌患者254例, 年龄(58.02±10.11)岁, 单因素分析结果显示, STAS阳性组患者CT肿瘤直径>STAS阴性组[(19.47±4.65) mm比(16.64±6.21) mm, t=-2.620, P<0.05]、肿瘤实性成分比例(CTR)(0.66比0.27, Z=-6.692, P<0.01), STAS阳性组与STAS阴性组之间分叶征(χ2=22.899)、空泡征(χ2=5.798)、胸膜牵拉(χ2=5.670)、血管集束征(χ2=23.534)、病理低分化(χ2=20.601)、微乳头(χ2=70.179)、乳头(χ2=17.875)、实性亚型(χ2=10.378)、癌胚抗原(CEA)阳性(χ2=20.601)、C... 相似文献