不同稀释介质对乙型肝炎病毒表面抗原定量检测的影响

目的 确定在乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）定量检测中影响稀释结果的主要物质成分,为HBsAg稀释液的选择提供思路。方法 分别使用生理盐水,50 g/L小牛血清白蛋白（BSA）、15 g/L小牛血清球蛋白（BGG）以及阴性血清对101份HBsAg阳性样本进行3倍稀释,计算稀释带来的偏差。分别将BSA和BGG配制成不同浓度稀释液,对10份HBsAg阳性样本进行3倍稀释,分析稀释后检测结果差异。分别使用生理盐水,50 g/L的BSA、15 g/L的BGG以及阴性血清对15例HBsAg阳性样本进行3倍稀释,然后分别将反应总时间控制在32 min、62 min、77 min和92 min,分别计算62 min、77 min和92 min检测结果相对于32 min检测结果的比值（即增幅）,比较不同稀释组在92 min时的增幅。结果 15 g/L的BGG稀释所得的回收率偏差最小。BSA不同浓度之间的稀释结果无明显差异,而BGG不同浓度之间稀释结果成负相关。15 g/L的BGG稀释组在92 min相对于32 min的检测浓度的增幅最大。结论 15 g/L BGG作为HBsAg稀释液效果较为理想。     

乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA与HBV DNA、HBsAg和HBeAg定量关系的分析

目的定量检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）、HBV DNA、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）并分析其相互关系,探讨定量检测血清中HBV cccDNA的临床应用价值。方法随机选取HBV感染者83例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测血清中HBVcccDNA及HBV DNA,同时采用化学发光法定量检测血清中HBsAg和HBeAg。结果 83例患者中HBV DNA阳性62例,其中HBV DNA载量≥105拷贝/mL者40例,血清HBV cccDNA阳性28例（70.00%）;HBV DNA载量〈105拷贝/mL者22例,血清HBV cccDNA阳性2例（9.09%）,不同DNA载量组HBV cccDNA差异有统计学意义（P〈0.01）。HBeAg阳性组和阴性组HBV cccDNA阳性率分别为70.00%（28/40）和4.65%（2/43）,两组差异有统计学意义（P〈0.01）。HBV cccDNA定量值与HBV DNA、HBsAg呈正相关（P〈0.01）。结论血清中HBV cccDNA水平可同时反应血清HBV DNA和HBsAg水平,血清HBV cccDNA含量可作为观察HBV复制情况和评价抗病毒疗效的相关血清指标。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞亚群的分析

目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者不同时期外周血Treg和Th1、Th2、Th17细胞以及中性粒细胞上CD64的表达水平,及它们与RA的活动性指标和自身抗体的相关性.方法 采集78例RA患者和21例健康人外周静脉血,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群(Treg,Th1、Th2、Th17细胞)的变化.结果 RA的CD3+ CD4+T细胞和CD4+ CD25+T细胞增多,活动期RA组Treg比率高于缓解期RA组和健康对照组,缓解期RA组Th2细胞减少,RA中Th1,TH17细胞与健康对照组相比无统计学意义,Treg和Th1、Th2、Th17细胞与RA的活动性指标(ESR,CRP和PLT)均无关联.结论 CD4+T细胞亚群数量异常可能与RA疾病发展有关.     

脑脉通联合骨髓干细胞动员对脑缺血大鼠神经细胞凋亡及Bax、Bcl-2表达的影响

目的 观察脑脉通联合骨髓干细胞(BMSCs)动员对脑缺血大鼠神经细胞凋亡的作用,并从对凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达及Bax/Bcl-2变化的影响探讨其可能的作用机制.方法 大鼠随机分组.线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)动物模型.动员组和联合组大鼠分别于术前3 d和术后2 d皮下注射人重组粒细胞集落刺激因子(rG-CSF);脑脉通灌胃用药.术后2、3、7、14 d取材,测定外周血和脑组织CD34+细胞;观察脑组织病理改变;检测神经细胞凋亡;测定脑组织Bax、Bcl-2表达,计算Bax/Bcl-2比值.结果 模型组大鼠外周血和脑组织CD34+细胞增加,分别于3 d和7 d达到峰值;各治疗组尤其联合组脑组织CD34+增强明显.缺血后7 d大鼠脑组织损伤明显,动员组14 d和各联合组的损伤减轻.各模型组神经细胞凋亡增多、Bax表达增加、2 d和3 d的Bax/Bcl-2增高.各联合组神经细胞凋亡减轻、Bax表达减弱,7 d及14 d的Bcl-2表达增强,各时间点的Bax/Bcl-2降低.联合组较动员组2 d和3 d的凋亡细胞、各时间点的Bax表达减轻和Bax/Bcl-2降低,7 d及14 d的Bcl-2表达增强.结论 脑缺血可引起BMSCs进入外周血及向脑组织归巢,达到峰值的时间存在差异,脑脉通可使动员后的骨髓干细胞增多;脑缺血引起的神经细胞凋亡与Bax表达上调相关,脑脉通可使BMSCs动员抑凋亡的作用增强并延长,其作用可能与早期(2 d、3 d)下调促凋亡基因Bax和后期(7 d、14 d)上调Bcl-2表达有关.     

急诊患儿血清C-反应蛋白检测分析的临床意义

目的 探讨血清C-反应蛋白(CRP)检测在儿童急性疾病的诊断、鉴别诊断和疗效判断中的意义.方法 对该院2010年398例急性就诊患儿及50例健康体检儿童行外周血CRP和血常规检测,对入院治疗患儿分成轻症、重症两组,并将感染组入院治疗患儿分成细菌感染和病毒感染两组,观察24 h CRP和血常规变化.结果 急症门诊患儿感染组CRP水平高于健康对照组,且细菌感染组高于病毒感染组(P<0.01),中毒和外伤组尽管阳性率略高于健康对照组(P<0.05),但均值之间差异无统计学意义.入院24 h后,感染、中毒、外伤重症病例CRP水平较轻症组明显升高(P<0.01).结论 检测急诊患儿血清CRP 水平对于临床早期诊断、鉴别诊断、病情评估与疗效判断有重要价值.     

不同细胞系对胃癌来源外泌体的吸收差异北大核心CSCD

目的：分析不同细胞系对胃癌细胞外泌体的摄取差异。方法：使用荧光蛋白融合hCD63分子标记外泌体，并筛选标记的稳定细胞株。使用超速离心收集外泌体，电镜观察荧光蛋白标记外泌体外形。标记的外泌体与不同细胞系细胞孵育后，使用流式细胞术分析细胞携带荧光的差异。结果：通过流式细胞分析证明荧光蛋白在hCD63分子的羧基端进行标记，可以获得最大的荧光强度。不同细胞系对MGC-803外泌体的摄取存在差异。结论：单核细胞样的THP-1细胞摄取胃癌细胞外泌体的能力强于其他组织来源的细胞系。     

miR-107靶向FGFRL1/AKT通路抑制胃癌耐药细胞迁移

目的 检测胃癌敏感和耐药细胞迁移能力的强弱，探究miR-107靶向成纤维细胞生长因子受体样蛋白(FGFRL)1/蛋白激酶B(AKT)通路调节胃癌耐药细胞迁移。方法 利用划痕和transwell小室实验验证胃癌敏感和耐药细胞的迁移；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR),Western印迹检测敏感和耐药胃癌细胞中miR-107、FGFRL1/AKT通路活性及迁移相关蛋白[E-钙黏附蛋白(Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶(MMP)9]的表达；利用荧光素酶报告实验鉴定miR-107与FGFRL1之间的靶向关系；将胃癌细胞耐药株分为mimic NC组、miR-107 mimic组、NC组和siFGFRL1组，荧光定量PCR、Western印迹检测胃癌耐药细胞中FGFRL1 mRNA表达水平、FGFRL1/AKT通路活性及迁移相关蛋白表达水平；划痕和transwell小室实验测定胃癌耐药细胞迁移能力的变化。结果 与胃癌敏感细胞相比，胃癌耐药细胞迁移能力更强，且miR-107呈明显低表达，FGFRL1 mRNA和蛋白水平显著高表达，AKT活性(p-AKT水平)与Vime...