肝移植术后早期白细胞分类计数与CD4^＋T细胞ImmuKnow法ATP值的相关性研究

目的探讨临床常用的白细胞（WBC）分类计数与ImmuKnow法检测CD4^＋T细胞内的腺苷三磷酸（ATP）值的相关性,为临床提供一种快速判断细胞免疫功能的方法。方法选择50例行经典原位肝移植术受者术后1周至1个月内的样本,进行WBC分类计数并采用ImmuKnow法检测CD4＋T细胞内ATP值,分析两者的相关性。随机选择5例肝移植受者于术后1、2、3、4、5周分别重复检测上述指标,进一步验证两者动态变化的相关性。结果 50例行肝移植受者ImmuKnow法ATP值为446.7±219.1μg/L,WBC总数为（8.08±3.62）×109/L,与ImmuKnow法ATP值的相关系数（r）为0.659（P〈0.001）;中性粒细胞计数为（6.07±3.07）×109/L,与ImmuKnow法ATP值的r为0.593（P〈0.001）;单核细胞计数为（0.53±0.25）×109/L,与ImmuKnow法ATP值的r为0.371（P=0.006）。淋巴细胞计数为（1.13±0.69）×109/L,与ImmuKnow ATP值无相关关系（r=0.138,P=0.135）。5例肝移植受者术后重复检测,WBC总数的变化与ImmuKnow法ATP值的变化呈正相关,r均〉0.5,但由于样本量较少,仅有1例差异有统计学意义。结论肝移植术后早期WBC计数与CD4^＋T细胞ImmuKnow法ATP值具有一定的正相关性,WBC计数的变化可以在一定程度上反映ImmuKnow法ATP值的变化。     

TNFSF9在原发性胆汁性肝硬化的表达及其临床意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清TNFSF9的浓度变化及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例PBC患者及与之配对的健康人血清中TNFSF9水平,并分析PBC患者血清TNFSF9与TBIL、γ-GT的关系。结果 PBC患者血清TNFSF9水平(1102.45±294.48)ng/L比健康对照组(123.67±62.60)ng/L显著增高,且与TBIL呈显著正相关(γs=0.549,P=0.000),但与γ-GT的相关性没有统计学意义(γs=0.291,P=0.062)。结论 TNFSF9可能参与了PBC的发病机制,可能是一个潜在的治疗靶点。     

流式细胞术检测抗核抗体

抗核抗体(ANA)泛指各种核成分的抗体,是自身免疫性疾病重要的血清学诊断指标.临床上检测ANA的经典方法为间接免疫荧光法(IFA).该方法操作繁琐,不能定量,且需操作者有丰富的经验.流式细胞术(FCM)具有简单、快速、重复性好、灵敏度高、可以定量分析等优点.本研究利用FCM检测抗核抗体,并初步应用于临床检测,取得了比较满意的结果. 　　1 材料与方法 　　1.1 血清标本阴性对照组38例经IFA检测ANA均为阴性.阳性组89例经IFA检测ANA为阳性,其中31例荧光核型为混合型,30例为颗粒型, 8例为周边型,13例为均质型,7例为核仁型. 　　1.2 细胞培养 Hep-2细胞(本院自供)培养条件为37℃, 5%CO2,培养液为含10%小牛血清的RPMI-1640.使用时细胞生长良好,存活细胞≥98%,用胰酶消化液消化对数生长期的细胞. 　　……     

流式细胞术检测冠心病患者外周血白细胞唾液酸黏附素的表达及临床意义

目的观察唾液酸黏附素（Siglec-1）在冠心病（CHD）患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其在冠状动脉粥样硬化发病过程中的作用。方法流式细胞术检测57例CHD患者及38名正常对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞Siglec-1的百分率;生化常规测定所有人选者血脂水平。结果流式细胞仪检测发现,Siglec-1在正常对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞Siglec-1阳性率为（12．74-2．4）％,显著高于正常对照组[（1．0±0．3）％,P〈0．01],而CHD血脂正常组和血脂异常组的Siglec-1阳性率差异无统计学意义。结论作为单核巨噬细胞激活的标志,Siglec-1在外周血淋巴细胞和中性粒细胞上不表达,在正常人单核细胞上表达很低。CHD患者单核细胞Siglec-1表达明显升高,提示CHD患者外周血单核细胞已经激活,发生巨噬细胞化,Siglec-1在单核细胞黏附血管内皮及CHD的发病过程中可能起重要作用。     

临床免疫学与免疫新技术在临床应用的机遇与挑战

临床免疫学是免疫学的一个重要分支,是架起免疫学和临床医学的桥梁.近年来,固有免疫理论、Th17细胞的概念和意义、调节性细胞理论等临床免疫学理论的突破,以及各种临床免疫学新技术--芯片技术、组学技术、酶联免疫斑点、流式细胞术及相关临床免疫学新技术的发展,促进了多学科的交融,也推动临床免疫学技术向自动化、智能化、高通量方向发展的进程.同时,亦给临床检验工作的提高和发展带来前所未有的机遇与挑战.     

186例消化系统恶性肿瘤患者UGT1A1*6、UGT1A1*28基因多态性的检测和分析

目的：检测和分析消化系统恶性肿瘤患者UGT1A1^*6、UGT1A1^*28基因多态性。方法：收集186例消化系统恶性肿瘤患者血液标本,采用焦磷酸测序方法对UGT1A1^*6、UGT1A1^*28基因多态性进行检测,并对基因多态性频率进行统计分析。结果：186例消化系统恶性肿瘤患者样本具有群体代表性。UGT1A1^*6基因多态性为野生型G/G占比63.4%、杂合型G/A占比32.8%、突变纯合型AA占比3.8%;UGT1A1^*28基因多态性为野生型TA6/TA6占比75.8%、杂合型TA6/TA7占比21.5%、突变纯合型TA7/TA7占比2.7%;UGT1A1^*6和^*28基因多态性为野生型G/G且TA6/TA6占比48.9%,单点变异型G/G且TA6/TA7占比12.4%、G/A且TA6/TA6占比23.1%,双点变异型G/G且TA7/TA7占比2.2%、G/A且TA6/TA7占比9.1%、A/A且TA6/TA6占比3.8%,三点变异型G/A且TA7/TA7占比0.5%。患者UGT1A1^*6与UGT1A1^*28基因多态性频率分布之间具有显著性差异（P<0.05）。3个不同年龄段患者之间,胃癌、结直肠癌、其他消化系统恶性肿瘤患者之间的UGT1A1^*28、UGT1A1^*6和^*28基因型分布具有显著性差异（P<0.05）。结论：消化系统恶性肿瘤患者应用伊立替康时,应联合检测UGT1A1^*6和UGT1A1^*28基因多态性,同时密切关注患者的肿瘤类型以及年龄差异。     

凝血块中淋巴细胞的分离

临床上研究细胞免疫功能经常面临的一个问题是怎样获得足够量的外周血淋巴细胞。测定体液免疫的抗体时,所取之血常无需抗凝处理,而分离淋巴细胞检查细胞免疫功能时却不可缺少抗凝剂如肝素等。为解决以上问题,作者介绍了一种新的方     

去唾液酸糖蛋白受体与慢性肝病自身免疫

去唾液酸糖蛋白受体 (AsialoglycoproteinReceptor,ASGPR)是肝细胞的一种重要且高效的内吞受体 ,主要分布于肝小叶门静脉周围肝细胞的窦面膜上 ,又名肝凝集素 (liverlectin)。近年来研究发现该受体除了在肝脏基因定向转移、靶向药物治疗当中具有较高的应用价值之外 ,还相继在自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化 (PBC)、病毒性肝炎等慢性肝病患者血清中检测到其相应的自身抗体 ,从这些患者外周血、肝活检组织分离到ASGPR特异性的T淋巴细胞。由于ASGPR的肝脏特异性与其在肝脏的特殊分布位置和某些慢性肝病的组织病理学特征极…     

乙型肝炎病毒前S1抗原与e抗原、乙型肝炎病毒DNA的相关性分析

目的:探讨乙肝病毒(HBV)前S1(Pre-S1)抗原与e抗原(HBeAg)、HBV DNA含量的相关性,以评价Pre-S1抗原检测HBV复制的临床应用价值.方法:临床采集乙肝表面抗原阳性标本363例,以ELISA法检测Pre-S1抗原,时间分辨免疫荧光法检测HBeAg,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测HBV DNA含量,并对Pre-S1抗原、HBeAg和HBV DNA检测结果进行相关性分析.结果:Pre-S1抗原与HBeAg值之间存在关联性(χ2=94.4,P＜0.01),关联系数为0.45;Pre-S1抗原与HBV DNA亦有关联(χ2=198.58,P＜0.01),关联系数为0.59.Pre-S1抗原阳性率随HBV DNA含量的增加而增加.当HBV DNA拷贝数的对数值＞3时,Pre-S1抗原的诊断敏感度84.5%,特异性91.2% ,准确性87.0%,阳性预测值94.1%,阳性似然比9.6,优势比56.8;HBeAg诊断敏感度50.4%,特异性94.9%,准确性67.2%,阳性预测值94.2%,阳性似然比9.8,优势比18.9.结论:Pre-S1抗原与HBV DNA具有相关性,Pre-S1抗原较HBeAg能更敏感、更准确地反映HBV复制情况,三者联合检测互相补充,更有助于临床疾病的诊治.