脊柱侧凸胸椎椎弓根形态学分型

目的研究脊柱侧凸胸椎椎弓根的畸形发生率和畸形特征,并提出形态学分型系统。方法应用Siemens Somatom Sensation 64CT,对60例不同类型脊柱侧凸1440个胸椎椎弓根进行CT轴位扫描。在Lenke椎弓根分型的基础上对其进行量化和适当补充,将椎弓根形态分型为：A型（正常型）;B型（狭窄型）;C型（峡部硬化型）;D型（完全硬化型）,D-Ⅰ型（凹陷硬化型）,D-Ⅱ型（平直硬化型）;E型,椎弓根缺如。按照上述分型标准,对影像学资料进行测量、分析并分型。结果各种类型脊柱侧凸胸椎椎弓根形态分型A、B、C、D-Ⅰ、D-Ⅱ及E型分别占62.12%、24.72%、5.94%、2.75%、3.18%及1.29%,胸椎椎弓根的畸形发生率为37.88%。各种类型脊柱侧凸间胸椎椎弓根的畸形发生率差异有统计学意义（P〈0.05）,其中神经纤维瘤病性脊柱侧凸胸椎椎弓根的畸形发生率高达60.83%。结论各种类型的脊柱侧凸普遍存在胸椎椎弓根畸形,以狭窄型较为常见。     

一期全麻下轴向牵引复位结合前路手术治疗伴有关节突交锁的下颈椎脱位

目的探讨应用全身麻醉下轴向牵引结合前路手术治疗伴有关节突交锁的下颈椎脱位。方法对18例伴有关节突交锁的下颈椎脱位采用全麻下轴向牵引复位结合前路手术治疗,无椎间盘突出患者行前路植骨融合内固定;伴有椎间盘突出患者,采用了前路减压复位,植骨融合内固定进行治疗。结果对于四肢不完全瘫患者,神经功能有不同程度改善,所有脱位颈椎恢复正常序列。结论对于伴有不伴有后方结构骨折的关节突交锁的下颈椎损伤,全身麻醉下轴向牵引结合一期前路手术是一种简便、安全、有效的治疗方法。     

某包装物厂职业病危害控制效果评价

目的探讨某厂塑料编织袋和塑料包装容器生产装置的职业病危害因素控制效果,确保作业人员的生产安全和身体健康。方法通过职业卫生现场调查、职业卫生检测等方法收集数据和资料,并结合职业病防护设施、个人职业病防护水平和定量分级结果,对试运行期间的作业人员的职业病危害因素接触水平及职业健康影响进行评价。结果本项目存在的职业病危害因素中化学物质有丁醇、二甲苯、甲苯、乙苯、邻苯二甲酸二丁酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯、一氧化碳、甲醛;粉尘有聚乙烯粉尘、聚丙烯粉尘;物理因素为噪声,共计12种。检测结果表明,部分工种甲苯、聚乙烯粉尘超过国家卫生标准。对其防护设施进行改造后,各工种接触甲苯、聚乙烯粉尘的浓度均符合标准要求。结论本项目职业病防护设施改造前职业病危害严重,对职业病防护设施进行改造后,作业场所作业人员接触职业病危害因素的浓（强）度均符合国家卫生标准。     

Green fluorescent protein as marker in chondrocytes overexpressing human insulin-like growth factor-l for repair of articular cartilage defects in rabbits

Objective： To label the primary articular chondrocytes overexpressing human insulin-like growth factor （ IdGF-1 ） with green fluorescent protein （GFP） for repair of articular cartilage defects in rabbits. Methods： GFP cDNA was inserted into PeDNA3.1- hlGF-1 to label the expression vector. The recombinnnt vector, pcGI, a mammalian expression vector with multiple cloning sites under two respective cytomegalovirus promoters/enhancers, was transfected into the primary articular chondrocytes with the help of lipofectamine. After the positive cell clones were selected by G418, G418- resistant chondrocytes were cultured in medium for 4 weeks. The stable expression of hlGF-1 in the articular chondrocytes was determined by in situ hybridization and immunocytochemical analysis and the GFP was confirmed under a fluorescence microscope. Methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） and flow cytometer methods were employed to determine the effect of transfection on proliferation of chondrocytes. Gray value was used to analyze quantitatively the expression of type lI collagen. Results： The expression of hlGF-1 and GFP was confirmed in transfected chondrocytes by in situ hybridization, immunocytochemical analysis and fluorescence microscope observation. Green articular chondrocytes overexpressing hlGF-1 could expand and maintain their chondrogenic phenotypes for more than 4 weeks. After the transfectton of IGF-1, the proliferation of chondrocytes was enhanced and the chondrocytes could effectively maintain the expression of type lI collagen. Conclusions： The hlGF-1 eukaryotic expression vector containing GFP marker gene has been successfully constructed. GFP, which can be visualized in real time and in situ, is stably expressed in articular chondrocytes overexpressing hlGF-1. The labeled articular chondrocytes overexpressing hlGF-1 can be applied in cell-mediated gene therapy as well as for other biomedical purposes of transgenic chondrocytes.     

急性心肌梗死患者冠状动脉造影与心电图相应导联S-T段改变结果比较

发生急性心肌梗死(AMI)时,大部分病例的心电图梗塞部位对应导联(相反方向导联)上常常出现S-T段降低.本文作者对21例AMI患者早期行冠状动脉造影,并与心电图对应导联的S-T段改变进行了对照分析,现报道如下.     

某企业乙丙橡胶技术改造项目职业病危害预评价

目的识别和分析乙丙橡胶生产过程中可能产生的职业病危害因素及其主要环节,预测可能造成的职业病危害及程度,确定建设项目的职业病危害类别。方法依据该建设项目的职业病危害特点,采用类比法、检查表分析法等进行综合分析、定性和定量评价。结果通过对拟评价项目相似工程的职业卫生调查、相关技术资料的分析,本项目存在的职业病危害因素为正己烷、甲醇、氨、氯化氢、氢氧化钠及噪声,类比企业各工种工作日内甲醇、正己烷等有害物质TWA（甲醇0.156～0.569 mg/m^3、正己烷1.48～5.48 mg/m^3）、STEL（甲醇1.87～4.10mg/m^3、正己烷1.73～65.80 mg/m^3）均符合国家卫生标准要求。各工种工作日内接触生产性噪声等效连续A声级计算值均〈85 dB,符合国家卫生标准要求。结论本项目属职业病危害严重项目。本项目在落实职业卫生专项投资、落实可研报告中提出的各类职业病预防措施、落实控制职业病危害的补充措施、加强职业卫生管理的前提下,拟建项目在职业病危害控制方面是可行的。     

胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒构建及在大鼠脊髓内的表达

目的：构建胰岛素样生长因子1的真核细胞表达质粒，分析pcDNA3．1-hIGF-1体内转基因的町行性。方法：实验于2004—06／09在吉林大学基础医学院动物实验室完成。①选取清洁级成年雄性Wistar大鼠12只，随机数字表法分为胰岛素样生长因子1组、模型对照组、正常对照组，4只／组。②聚合酶链法从人的肝细胞cDNA文库中克隆出胰岛素样生长因子1cDNA，然后定向插入真核细胞表达载体pcDNA3．1中，酶切电泳和基因测序鉴定插入质粒的人源性胰岛素样生长因子基因序列。③胰岛素样生长因子1组应用直接注射法将阳离子脂质体和pcDNA3．1-hIGF1混合后转染至大鼠胸段脊髓组织中；模型对照组注射等剂量pcDNA3．1和阳离子脂质体混合液。正常对照组未作任何处理。1周后应用免疫组化法观察人源性胰岛素样生长因子在大鼠脊髓中的表达。结果：实验选取清洁级成年雄性Wistar大鼠12只，全部进入结果分析。①聚合酶链反应片段鉴定结果：琼脂糖电泳显示，扩增带大小与预期的人源性胰岛素样生长因子cDNA相同。②重组的真核表达质粒的鉴定结果：酶切鉴定显示，重组的真核细胞表达质粒pcDNA3．1-hOGF-1所含的IGF—1cDNA序列和插入方向均正确。③基因转染后各组胰岛素样生长因子1免疫组化测定结果：基因转染1周后，胰岛素样生长因子1组脊髓组织内阳性细胞数明显高于模型对照组和正常对照组（48．2&;#177;5.3,29．3&;#177;4．2，23．8&;#177;8．3，P〈0．01）。结论：阳离子脂质体介导pcDNA3．1-hIGF1体内转基因的方法是可行的。     

转基因同种异体组织工程软骨修复兔膝关节全层缺损

目的：观察转人胰岛素样生长因子Ⅰ基因同种异体组织工程软骨对兔膝关节软骨全层缺损的修复作用。 方法：实验于2004～08／2005—08在军事兽医研究所病毒室及长春生物制品研究所实验室完成。①取出生28d新西兰白兔的关节软骨，采用机械分离及Ⅱ型胶原酶消化法获得分离的兔软骨细胞，用单层培养扩增。②用脂质体法使胰岛素样生长因子Ⅰ基因转染兔关节软骨细胞。③以经过转染的兔关节软骨细胞作为种子细胞，牛Ⅰ型胶原作为支架，体外构建转基因同种异体组织工程软骨。④5个月龄的新西兰白兔80只制备关节软骨缺损模型，分别移植入不同组别的移植物：空白对照组、单纯支架组、单纯软骨细胞附和支架组、经过转染的软骨细胞附和支架组、自体软骨移植组，分别于术后4，8，16，24周处死各组动物4只取材，观察兔膝关节软骨全层缺损的修复情况。结果：①G418培养液筛选结果：通过G-418对于兔关节软骨细胞的最小致死剂量的测定得出，G418对软骨细胞的最小致死剂量为0．4g／L。转染后软骨细胞经0．4g／L G418筛选，2周后得到抗G418的阳性细胞克隆，而未转染细胞在含G418的培养液中逐渐全部死亡，初步证明人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的转染成功。②原位杂交检测结果：转染软骨细胞胞浆中有氯化镍紫蓝色颗粒阳性杂交信号说明有人胰岛素样生长因子1mRNA的表达；未转染细胞则未见阳性信号。③免疫组织化学检测结果：在转染的软骨细胞胞浆中有棕黄色颗粒样阳性信号，说明有Ⅱ型胶原蛋白表达，证明稳定表达人胰岛素样生长因子Ⅰ的转染软骨细胞保持Ⅱ型胶原的表达。④软骨缺损修复后的组织学评价结果：在试验所观察的24周内，软骨基本稳定，而且转胰岛素样生长因子Ⅰ基因组织工程软骨显示出强烈的软骨基质分泌能力。转胰岛素样生长因子Ⅰ基因的同种异体组织工程软骨对软骨缺损的修复效果明显优于空白对照组和单纯软骨细胞附和支架组[空白对照组、单纯支架组、单纯软骨细胞附和支架组、经过转染的软骨细胞附和支架组、自体软骨移植组修复软骨的组织学评分：术后4周为（12．00&;#177;0．79），（11．00&;#177;0．81），（8．10&;#177;0．90），（5．80&;#177;1．03），（5．20&;#177;0．46）分；术后8周为（10．20&;#177;0．96），（10．10&;#177;1．19），（7．10&;#177;1．34），（4．90&;#177;1．15），（4．00&;#177;0．58）分；术后16周为（8．00&;#177;1．24），（8．50&;#177;1．79），（5．20&;#177;1．88），（4．00&;#177;1．82），（2．00&;#177;1．96）分；术后24周为（7．00&;#177;0．90），（6．50&;#177;2．13），（4．30&;#177;2．00），（3．00&;#177;2．13），（1．20&;#177;0．78）分，P〈0．05]. 结论：人胰岛素样生长因子Ⅰ基因转染兔关节软骨细胞后可以在细胞中表达，而且转胰岛素样生长因子Ⅰ基因的同种异体组织工程软骨对兔关节软骨全层缺损的修复效果明显。为进一步转基因组织工程软骨实验提供了依据。     

细胞因子及基因治疗椎间盘退行性变的研究动态

椎间盘退行性变主要是由于各种原因导致的细胞因子减少、致炎因子增多并降解细胞外基质,细胞赖以生存的环境被破坏,从而导致椎间盘退行性变.椎间盘为一免疫豁免部位,为椎间盘的细胞因子及其基因治疗提供了有利条件.近年来细胞因子及其基因治疗作为可望从根本上逆转椎间盘退行性变的新方法备受关注.多种细胞因子及其转导入椎间盘的基因可以不同程度的促进细胞外基质合成,从而延缓或逆转椎间盘退行性变.目前的研究还多处于实验阶段,如何延长转入基因表达时间,如何选择一种高效且低毒性的载体等问题将成为以后研究的重点.     

IGF-1诱导神经干细胞向少突胶质细胞分化的机制

目的 IGF-1重组表达载体转染大鼠脊髓源性神经干细胞.方法 采用Western印迹和RT-PCR方法,检测ERK及即早基因c-fos、c-jun表达变化.结果 IGF-1开始表达后,神经干细胞中磷酸化ERK表达量逐渐增高,其特异性抑制剂PD98059可阻断这种增高作用；即早基因c fos、c-jun的表达及对抑制剂PD98059的反应与ERK变化一致.结论 MAK-ERK信号途径在神经干细胞向少突胶质细胞分化过程中起重要作用.