新鲜羊膜与脱细胞羊膜修复腱鞘缺损预防肌腱粘连北大核心

背景:羊膜独有的结构可阻止某些物质通过,能保证包裹内组织正常营养供应,而且具有抗粘连、组织相容性好、炎性反应轻、纤维包裹少及可降解等特性。目的:比较新鲜羊膜及脱细胞羊膜修复腱鞘缺损,预防肌腱粘连和促进肌腱愈合的作用。方法:取60只雄性来亨鸡,制作双足第三足趾制备肌腱及腱鞘损伤模型,随机分为3组修复,新鲜羊膜组采用新鲜人羊膜修复腱鞘缺损,脱细胞羊膜组采用人脱细胞羊膜修复腱鞘缺损,对照组不做腱鞘修复。修复后进行第三足趾组织学观察及生物力学测试。结果与结论:①组织学观察:修复后2周,3组均存在充血水肿及炎症反应,新鲜羊膜组最轻,对照组最严重,3组水肿及炎症反应随时间延长逐渐减轻。修复12周,各组假鞘较修复后4周明显成熟,新鲜羊膜组及脱细胞羊膜组假鞘表面细胞致密层状排列整齐,表面光滑;对照组假鞘表面细胞排列紊乱,结构松散,可见表面纤维组织突出假鞘表面;②生物力学测试:脱细胞羊膜组、新鲜羊膜组修复后4,8,12周的肌腱滑动距离均大于对照组(P<0.05),前2组间比较差异无显著性意义;脱细胞羊膜组、新鲜羊膜组修复后4,8周的肌腱最大拉伸断裂强度高于对照组(P<0.05),且新鲜羊膜组高于脱细胞羊膜组(P<0.05),3组修复后12周的肌腱最大拉伸断裂强度无差异;③结果表明:新鲜羊膜和脱细胞羊膜均可用于重建腱鞘缺损,预防肌腱粘连,新鲜羊膜在促进早期肌腱愈合方面优于脱细胞羊膜。     

连翘苷拮抗环磷酰胺所致小鼠免疫抑制的实验研究

目的:研究连翘苷对环磷酰胺处理小鼠免疫功能的影响。方法:以腹腔注射环磷酰胺法复制小鼠免疫抑制模型,试验组小鼠分别按50、100、150 mg/ kg 剂量灌胃连翘苷,同时设模型组和对照组(等体积生理盐水灌胃),连续处理7 d。常规方法测定胸腺和脾的脏器系数,FITC 微球法测定腹腔巨噬细胞吞噬功能,ELISA 法检测外周血IL-2、IL-4 和外周血淋巴细胞cAMP 含量,分析不同剂量的连翘苷对免疫抑制小鼠上述指标的影响。结果:7 d 后成功建立免疫抑制小鼠模型。连翘苷能够不同程度地提高免疫抑制小鼠的免疫器官指数、巨噬细胞吞噬能力和血清中免疫因子含量,降低外周血淋巴细胞中cAMP 含量。结论:连翘苷能够抵抗环磷酰胺的免疫抑制作用,具有一定的免疫调节功能。     

BCYRN1 调控miR-503 通过Notch1 信号通路对肺癌迁移和侵袭的影响

目的:探讨BCYRN1 调控miR-503 通过Notch1 信号通路对肺癌迁移和侵袭的影响机制。方法:qPCR 检测不同肺癌细胞株中BCYRN1 和miR-503 的表达情况;免疫荧光和qPCR 检测慢病毒BCYRN1+siRNA 转染肺癌细胞的转染效率;双荧光素酶报告基因检测BCYRN1 与miR-503 的相互作用;Transwell 侵袭实验和划痕实验检测沉默BCYRN1 后肺癌细胞侵袭和迁移能力的变化;Western blot 检测沉默BCYRN1 后Notch1 信号通路蛋白的表达情况;裸鼠皮下成瘤检测沉默BCYRN1后肺癌细胞裸鼠体内成瘤能力的影响。结果:在肺癌细胞H1299 中BCYRN1 表达水平最高,miR-503 的表达水平相对较高;免疫荧光及mRNA 水平证明BCYRN1+siRNA 慢病毒可以有效转染进入H1299 细胞内;BCYRN19 能与miR-503 的3’-UTR 特异性结合;沉默BCYRN1 可以抑制肺癌H1299 细胞的侵袭和迁移能力;沉默BCYRN1 后Notch1 通路蛋白表达情况相应下调;与NC 组相比,BCYRN1-siRNA 组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小。结论:BCYRN1 可以靶向调节miR 503 通过Notch1 信号通路影响肺癌H1299 细胞的侵袭和迁移能力。     

酪氨酸和米非司酮对大鼠颗粒细胞膜流动性及线粒体膜电位的影响

应用小剂量孕马血清促性腺激素ＰＭＳＣ处理未成年雌性大鼠建立的卵泡闭锁模型,应用荧光分光光度计和流式细胞仪测定了大鼠颗粒细胞膜流动性、丙二醛（ＭＤＡ）含量和线粒体膜电位：在此基础上,进一步观察酪氨酸（Ｔｙｒ）、米非司酮对它们的影响。结果表明：与发育中的卵泡相比,卵泡闭锁时,颗粒细胞膜流动性明显降低（Ｐ＜０．００２）、膜ＭＤＡ水平明显升高（Ｐ＜０．００１）,线粒体膜电位明显下降（Ｐ＜０．００１）。与实验组相比,酪氨酸使膜流动性升高,ＭＤＡ水平下降,线粒体腹电位升高,但都无统计学意义（Ｐ＞０．０５）;而米非司酮使膜流动性明显下降（Ｐ＜０．０１）,ＭＤＡ水平明显升高（Ｐ＜０．０５）,线粒体膜电位进一步下降（Ｐ＜０．０１）。研究结果表明,颗粒细胞膜ＭＤＡ水平是影响膜流动性的一个重要因素,膜脂质过氧化及线粒体膜电位下降在卵泡闭锁中也起着重要的作用。     

我国河南汉族正常人群凝血因子VII基因MspⅠ多态性观察

目的 研究我国汉族正常人群凝血因子Vll基因MspI多态性的分布特点.方法 利用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析560名河南汉族正常人群凝血因子VII(FVII)基因R353Q突变的分布情况.结果 我国河南汉族正常人群FVII基因R353Q的RR,RQ,QQ,基因型频率分别是0.864,0.132,0.004;R,Q等位基因频率分别是0.930,0.070;与国外其他种族相比,基因型及等位基因频率与日本人差异无统计学意义(χ2=2.475,P＞0.05χ2=0.000,P＞0.05);RQ及QQ基因型明显低于意大利人,差异具有统计学意义(χ2=38.536,P＜0.01;χ2=16.311,P＜0.01);Q等位基因明显低于意大利人,差异具有统计学意义(χ2=50.228,P＜0.01).结论 我国河南汉族正常人群FVII基因R353Q突变的基因型分布不同于国外其它种族,具有种族或地域的差异.     

降钙素基因相关肽通过ERK1/2信号通路对角质形成细胞增殖的影响

目的： 研究降钙素基因相关肽（CGRP）对角质形成细胞增殖活性的影响，并探讨其可能涉及的信号转导通路。方法： ①胸腺嘧啶掺入法（［3H］-TdR）观察CGRP诱导的角质形成细胞株HaCaT细胞增殖，及CGRP受体拮抗剂CGRP8-37、细胞外信号调节激酶ERK1/2特异性抑制剂PD98059对CGRP诱导的增殖活性的影响；②免疫印迹技术观察CGRP诱导后ERK1/2的磷酸化，及CGRP8-37、PD98059对ERK1/2磷酸化的影响。结果： ①CGRP在一定范围内可剂量依赖性地诱导HaCaT细胞增殖，该作用可被CGRP8-37和 PD98059阻断；②CGRP可时间依赖性地诱导HaCaT细胞ERK1/2的磷酸化，CGRP8-37和PD98059可减弱其作用。结论： CGRP可诱导HaCaT细胞增殖，CGRP受体及其相关的ERK1/2信号通路参与其调控机制。     

CD40/CD40L交联在CD4+T细胞诱导肿瘤细胞凋亡中的机制研究

目的探讨CD40/CD40L交联在CIK细胞中CD4 T细胞(CD4 CIK)诱导肿瘤细胞凋亡中的作用机制.方法体外扩增CIK细胞并纯化CD4 T细胞亚群,AnnexinV染色法观察CD4 CIK诱导肿瘤细胞凋亡的作用;半定量PCR、流式细胞法及ELISA法比较CD4 CIK激活前后CD40L的表达变化;将转染质粒pIRES2-EGFP-sCD40L的CHO细胞(CHO-sCD40L)与乳腺癌细胞T47D共孵育,监测24小时后其表面分子Fas的表达变化及对Fas介导凋亡的敏感性.结果CD4 CIK细胞可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡率随孵育时间和效靶比的升高而增加,且肿瘤细胞表面分子Fas水平升高,可从1.98%±0.23%升高到31.62%±7.07%;CD4 CIK细胞被激活后,CD40L表达水平均较激活前明显增加;成功转染的CHO-sCD40L细胞与T47D共培养后,T47D表面分子Fas可被诱导升高,加入CH-11 24小时后可观察到明显T47D细胞的凋亡.结论CD4 CIK可能通过CD40/CD40L交联提升肿瘤细胞表面功能性Fas表达来诱导其凋亡.     

110例鼻内窥镜下经口腺样体切割术后体会

目的探讨鼻内窥镜下经口径路腺样体切割术的疗效及手术技巧。方法110例患者均在鼻内镜下经口将软腭向上牵拉明视下行腺样体切割吸引。结果术后观察6～24个月,全部病例经一次手术术前症状均消失,术后无复发。结论娴熟的内镜操作技术和经口径路腺样体切割结合起来,使腺样体切除手术具有直观、安全、彻底,且不易损伤腺样体周围组织等优点。