全文获取类型
收费全文 | 81篇 |
免费 | 3篇 |
国内免费 | 73篇 |
专业分类
基础医学 | 25篇 |
口腔科学 | 1篇 |
临床医学 | 23篇 |
内科学 | 7篇 |
特种医学 | 1篇 |
外科学 | 3篇 |
综合类 | 81篇 |
预防医学 | 7篇 |
中国医学 | 3篇 |
肿瘤学 | 6篇 |
出版年
2024年 | 1篇 |
2019年 | 1篇 |
2018年 | 1篇 |
2013年 | 1篇 |
2008年 | 2篇 |
2007年 | 4篇 |
2006年 | 3篇 |
2005年 | 5篇 |
2004年 | 14篇 |
2003年 | 22篇 |
2002年 | 23篇 |
2001年 | 18篇 |
2000年 | 27篇 |
1999年 | 6篇 |
1998年 | 4篇 |
1997年 | 5篇 |
1996年 | 6篇 |
1995年 | 1篇 |
1994年 | 6篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 2篇 |
1989年 | 2篇 |
1983年 | 1篇 |
排序方式: 共有157条查询结果,搜索用时 234 毫秒
11.
12.
目的 应用多重聚合酶链反应-单链构象多态性分析(multiple—Polymerase Chain Reaction—Single Strand Conformation Polymorphism,multi—PCR—SSCP)方法,快速、特异地同时检出耐异烟肼(isoniazid,INH)结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG基因的突变情况,并与直接测序(derictsequencing,DS)结果相比较,参照药敏试验,探讨该方法的可行性。 方法 根据结核分支杆菌的aphC启动子序列、inhA序列、katG序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用multi—PCR-SSCP技术,同时检测对结核分支杆菌耐INH起作用的这三个基因的突变情况;同时进行耐药株的测序分析。 结果 对H37Rv标准株、临床分离INH敏感株(23株)及INH耐药株(35株)进行multi—PCR—SSCP分析,突变检出率82.9%(29/35);耐药株测序分析突变检出率为85.7(30/35)。两种方法的符合率为97.1%E(29+5/)/35]。 结论 耐药基因检测指导治疗是一种新探索,multi—PCR—SSCP方法敏感、特异,能同时快速有效地检测结核分支杆菌aphC启动子、inhA、katG三个INH耐药基因的突变,提高检验效率,有望成为临床指导用药的好方法。 相似文献
13.
目的获得人杀菌/通透性增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)N端活性片段蛋白,为BPI结构和功能的研究提供有力的工具。方法提取人外周血多形核白细胞(PMN)总RNA进行逆转录反应,经套式PCR扩增出BPIN端基因片段,将其克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和序列测定,然后亚克隆入质粒pcDNA3构建真核表达载体pcDNA-BPI;重组载体通过脂质体转染CHO细胞并筛选阳性克隆,免疫荧光法鉴定重组BPI的表达和免疫学活性。结果酶切鉴定和序列分析证实重组质粒含有包括信号肽在内的BPI活性片段编码序列,与文献报道的序列相比,有6个核苷酸差异。转染筛选的阳性CHO细胞克隆表达产物能够被抗BPI的单克隆抗体所识别。结论BPI活性片段表达载体的构建及真核表达成功,为BPI功能的研究奠定了基础。 相似文献
14.
目的:研究外源性野生型p53基因对人肺腺癌细胞系GLC-82的生物学作用。方法:将含有野生型p53基因的pDOR-neo逆转录病毒载体,通过lipofectin转染GLC-82细胞,用流式细胞仪、电镜及3H-TdR掺入法,观察野生型p53基因对GLC-82细胞的生物学效应。结果:电镜观察可见,转染野生型p53基因,可使GLC-82细胞出现一些病理现象,如胞浆中有明显的空泡及线粒体肿胀;流式细胞仪分析显示,野生型p53基因可阻止GLC-82细胞周期停止于G1~S区;3H-TdR掺入试验提示,野生型p53基因能够抑制GLC-82细胞DNA的合成。结论:这些结果阐明了野生型p53基因是抑制GLC-82细胞生长的部分机理。 相似文献
15.
16.
目的:检测小鼠腹腔巨噬细胞TLRs表达情况及糖皮质激素甲基强的松龙对TLRs mRNA表达的影响.方法:应用RT-PCR检测正常小鼠腹腔巨噬细胞TLR1-13的表达;并以甲基强地松龙为免疫抑制剂,诱导小鼠免疫抑制后检测腹腔巨噬细胞TLRs mRNA表达变化.结果:已发现的TLR1-13在正常小鼠腹腔巨噬细胞均有表达;小鼠腹腔巨噬细胞经糖皮质激素处理后,部分TLRs在mRNA水平上可被上调.结论:Toll样受体是抗真菌先天免疫的重要组成部分.甲基强的松龙对巨噬细胞有毒性作用,甲基强的松龙注射后可导致小鼠腹腔巨噬细胞明显减少. 相似文献
17.
18.
树突状细胞与超抗原联合诱导抗肿瘤免疫的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的 建立体外培养扩增树突状细胞(DC)的方法,并利用DC和超抗原高聚金葡素(HAS)诱导产生高效特异性抗肿瘤免疫。方法 用GM-CSF和IL-4联合刺激诱导外周血单个核细胞分化为树突状细胞。HAS活化的淋巴细胞称为HASL。将DC与同源淋巴细胞或HASL共培养,分别称为DC-L和DC-HASL。用FCS分析细胞表型,MTT法测定细胞杀伤活性,并观察对裸鼠移植瘤的生长抑制作用。结果 在体外,DC-HASL对GLC-82细胞具有相对特异的杀伤作用,HASL和DC-L则无明显特异性。这三种效应细胞对荷瘤鼠的肿瘤生长都有不同程度的抑制,DC-HASL抗瘤活性最强。结论 将DC和HAS结合可诱导产生一种高效并具有相对特异性的抗肿瘤免疫活性细胞。 相似文献
19.
多重聚合酶链反应检测结核菌耐异烟肼相关基因 总被引:16,自引:4,他引:12
目的:建立耐异烟肼(isoniazid,INH)结核分枝杆菌(M.tuberclasis,MTB)多重聚合酶链反应(multiple PCR,multi-PCR)检测系统,在一次扩增中快速,特异地同时检出aphC启动子,inhA和kagG基因,用于快速初步诊断结核分枝杆菌对INH的耐药性.方法:根据结核分枝杆菌的aphC启动子,inhA和kagG序列,分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物,采用multi—PCR技术,同时检出对结核分枝杆菌耐INH起作用的3个基因.结果:应用multi—PCR反应体系,对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果;multi—PCR扩增的预期结果为:单基因引物出现一条特异性扩增区带,多重基因引物出现2或3条特异性扩增区带,经实验达到预期的扩增结果;对H37Rv标准株、INH敏感株及INH耐药株分别采用常规PCR和multi—PCR进行同时扩增,结果两种扩增方法均能扩增出预期的目的片段,符合率达100%.结论:multi—PCR能有效地为多基因耐药的临床病原体的诊断提供快速、准确的诊断手段,更能提高检验效率。 相似文献
20.
白血病患者酵母样真菌感染的调查 总被引:4,自引:1,他引:3
目的 通过对白血病患者呼吸系统感染酵母样真菌的分离鉴定,掌握其菌群的分布特征,为抗真菌药物的临床应用提供实验室依据。方法 采用VITEK-AMS微生物自动系统YBC鉴定卡,对306 例呼吸系统感染的血液病患者呼吸道分泌物中分离的酵母样真菌进行鉴定。结果 306 例患者中90 例分离出酵母样真菌,感染率为29.41% ,共分离出93 株酵母样真菌,其分属于4 属8 种,其中白色念珠菌的分离率最高为55.91% ,热带念珠菌的分离率为11.82% ;克柔氏念珠菌的分离率为17.20% ;酵母菌的分离率为9.68% ,其它少见酵母样真菌共计为5.29% 。结论 此结果表明在恶性血液疾病患者呼吸系统感染中近30% 为真菌感染,尤以白色念珠菌为主,且感染呈多样性。这些特征对临床选择应用抗真菌药物具有指导意义 相似文献