用PEEP改善单肺通气时低氧血症的临床研究

用ＰＥＥＰ改善单肺通气时低氧血症的临床研究１０００４４北京医科大学人民医院王天龙于德水李绯乔青武立民杨志斌关键词单肺通气；低氧血症；ＰＥＥＰ血流动力学中国图书资料分类号Ｒ３３２．２单肺通气会影响病人的通气功能、通气－灌注（Ｖ／Ｑ）值以及血流动力学状态...     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后c-fos及HSP 70表达的影响

目的:探讨大剂量甲基强的松龙(MP)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后c-fos及热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法:选用48只大鼠建立ASCI模型,应用免疫组化方法和图像分析技术研究MP组和NS组在伤后1,3,6h和1,2,3d脊髓组织中c-fos、HSP70的表达。结果:MP组与NS组脊髓损伤组织中存在c-fos、HSP70的阳性表达。ASCI后c-fos表达增加,3h最为显著,MP组在伤后1,3,6hc-fos的表达明显低于NS组(P<0.05);ASCI后HSP70表达增加,1d最为显著,MP组在伤后6h(P<0.05)、1d(P<0.01)、2d(P<0.01)HSP70的表达明显高于NS组。结论:MP可以抑制c-fos和促进HSP70的表达,对ASCI的治疗有效。     

缺氧诱导因子1α对人羊膜间充质干细胞耐受缺氧能力影响的实验研究北大核心CSCD

目的通过瞬时转染缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因,观察缺氧处理后人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)成活及凋亡情况,探讨HIF-1α对hAMSCs耐受缺氧能力的影响。方法取健康剖宫产产妇自愿捐赠的羊膜组织分离、培养hAMSCs,通过倒置相差显微镜观察细胞形态及免疫荧光法检测干细胞标志物OCT-4、NANOG表达,对培养细胞进行鉴定。取第3代hAMSCs进行缺氧处理(200μmol/L CoCl_2)后,按以下分组瞬时转染对应质粒:A组为hAMSCs空白组,B组为pcDNA3.1阴性对照组,C组为shRNA阴性对照组,D组为shRNA-HIF-1α干扰组,E组为pcDNA3.1-HIF-1α过表达组。缺氧处理后12、24、48 h采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测各组细胞成活率;24 h采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,并采用Western blot检测HIF-1α、VEGF、B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma2,Bcl-2)、Bax、活化型半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3,C-Caspase-3)蛋白表达。结果 CCK-8法检测示,缺氧处理后各时间点与A、C组比较,D组细胞成活率明显降低(P<0.05);与A、B组比较,E组细胞成活率明显升高,其中24 h组间比较差异有统计学意义(P<0.05);E组内24 h时细胞成活率明显高于12、48 h时(P<0.05)。流式细胞仪检测示,与A、C组比较,D组细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与A、B组比较,E组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。Western blot检测示,与A、C组比较,D组细胞中HIF-1α、VEGF、Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax、CCaspase-3蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);而E组结果相反,与A、B组比较,E组细胞中HIF-1α、VEGF、Bcl-2蛋白表达明显增加,Bax、C-Caspase-3蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIF-1α基因过表达能够明显改善hAMSCs耐受缺氧能力,其机制可能与上调VEGF和Bcl-2表达及下调Bax和C-Caspase-3表达作用相关。     

骨髓基质细胞移植对大鼠脊髓损伤后环氧化酶-2和血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells,BMSCs）移植对大鼠脊髓损伤后环氧化酶-2（cyclooxygenase-2, COX-2）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白表达的影响。方法大鼠随机分为3组：A为假手术组,B为细胞培养基（DMEM）对照组,C为BMSCs移植组。B组和C组大鼠进行脊髓压迫损伤模型制作。脊髓损伤后, B组和C组大鼠分别给予DMEM培养液或BMSCs脊髓损伤周围区注射。术后应用Western Blot方法检测COX-2、VEGF蛋白在损伤脊髓组织中的表达变化。结果 COX-2、VEGF蛋白在A组大鼠未损伤脊髓组织中均低水平表达。B组与A组相比,脊髓损伤后COX-2蛋白表达水平明显增加（P＜0.01）,VEGF蛋白表达水平则短暂显著增加（P＜0.05）。C组与B组相比, COX-2和VEGF蛋白表达水平均显著增加。结论 BMSCs移植能够增加脊髓损伤后COX-2、VEGF蛋白的表达。     

VEGF121转染对诱导后血管内皮细胞增殖的影响

目的 探讨VEGF基因转染对VEGF诱导后血管内皮细胞生物学功能的影响,为组织工程血管构建提供血管内皮细胞的可能性.方法 应用VEGF体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向诱导分化成血管内皮细胞后,再通过脂质体介导的方法将pCDI/VEGF121转染分化后的血管内皮细胞,通过MTT及流式细胞仪检测转染前后细胞的增殖与凋亡能力.结果 诱导培养2周后兔骨髓基质细胞转化为血管内皮细胞,VEGF基因转染血管内皮细胞后表达VEGF蛋白,转染后细胞增殖能力增加,凋亡能力下降.结论 转染VEGF是促进VEGF诱导血管内皮细胞增殖的有效途径,可望为组织工程血管构建提供血管内皮细胞衬层,为人工血管内皮化开辟一种新的途径.     

镁测定影响因素及在妊娠期测定的临床意义

目的血清镁的检测在妊娠期和产科疾病治疗和监测中具有重要临床意义,我们针对镁测定不稳定的影响因素进行观察和探讨。方法根据本实验室的实际情况（Ca、Mg、Fe为一常规的组合项目）对镁测定的影响因素进行了实验观察。结果影响镁的测定因素并非三个组合项目检测顺序的安排上有问题。结论血清镁的检测在妊娠期和产科疾病治疗和监测中具有重要临床意义,为了提高检测结果的准确性,镁测定影响因素要尽量去避免和解除。     

基于网络的PBL教学法在肿瘤科留学生见习教学中的应用研究

目的研究基于网络的以问题为基础的教学法(WPBL)在肿瘤科留学生见习教学中的应用价值。方法将2012级参加肿瘤科见习的学生100名作为研究对象,将其随机平均分成观察组和对照组。对照组应用传统教学法,观察组应用WPBL教学法,课后进行专业知识及学习能力考核和调查问卷,了解学生知识掌握、学习能力及对新教学方法的认可度。结果观察组在专业知识掌握、学习能力提高方面优于对照组,更加认可新的教学方法,差异具有统计学意义(P0.01)。结论 WPBL教学法在留学生肿瘤科见习教学中效果较好。     

脊髓缺血再灌注损伤对大鼠CaMKIV基因及蛋白表达的影响

目的 分析大鼠脊髓缺血再灌注损伤（SCII）后钙调蛋白依赖性蛋白激酶4（CaMKIV）基因 及蛋白表达的变化。方法 雄性SD 大鼠84 只,按随机数字表法分为假手术组、SCII 0 d 组、SCII 1 d 组、 SCII 3 d 组、SCII 7 d 组、SCII 14 d 组、SCII 28 d 组,每组12 只。假手术组仅暴露肾动脉下腹主动脉,不阻 断。SCII 各组采用Naslund 法阻断腹主动脉,复制SCII 模型。采用免疫组织化学法、Western blot、实时荧光 定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测各组大鼠CaMKIV 蛋白及基因的表达,BBB 评分评价大鼠后肢运动功 能。结果 免疫组织化学法结果显示,假手术组CaMKIV 蛋白表达很少,SCII 组CaMKIV 蛋白高表达于神经 元的细胞浆和细胞核;在伤后3 d,CaMKIV 阳性细胞数最多,且高于假手术组（P <0.05）。Western blot 结果 提示,CaMKIV 蛋白表达在再灌注0 d 即高于假手术组（P <0.05）,于再灌注3 d 达峰值后逐渐降低;至28 d, CaMKIV 蛋白表达量与假手术组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。qRT-PCR 结果表明,CaMKIV 基因表 达在再灌注0 d 开始增加,与假手术组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,于3 d 达峰值后降低,至28 d 仍 高于假手术组（P <0.05）。BBB 评分显示,SCII 各组大鼠后肢功能随再灌注时间延长有所改善,但至28 d 时 仍差于假手术组。结论 SCII 早期可快速诱导CaMKIV 基因表达上调和蛋白合成,CaMKIV 在SCII 中可能发 挥重要作用。     

尼卡地平控制性降压的效应及其对内分泌系统的影响

目的：观察尼卡地平控制性降压的效能及对内分泌系统的影响。方法：选择２０例择期手术的骨肿瘤病人，在手术开始后，经中心静脉通路推注单次剂最Ｎｉｃａｒ ０．０１－０．０２ｍｇ／ｋｇ，继以１－４μｇ．ｋｇ＾－１．ｍｉｎ＾－１滴注维持。结果：Ｎｉｃａｒ控制性降压期间，循环指标稳定，降压期间Ｎｉｃａｒ的调节次数为１．５±０．７次／小时，达到目标血压仅需４７±３１秒，停药后血压恢复至降压前所需时间为４０±１６分     

缺氧诱导因子1α对人羊膜间充质干细胞耐受缺氧能力影响的实验研究

目的通过瞬时转染缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因,观察缺氧处理后人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)成活及凋亡情况,探讨HIF-1α对hAMSCs耐受缺氧能力的影响。方法取健康剖宫产产妇自愿捐赠的羊膜组织分离、培养hAMSCs,通过倒置相差显微镜观察细胞形态及免疫荧光法检测干细胞标志物OCT-4、NANOG表达,对培养细胞进行鉴定。取第3代hAMSCs进行缺氧处理(200μmol/L CoCl_2)后,按以下分组瞬时转染对应质粒:A组为hAMSCs空白组,B组为pcDNA3.1阴性对照组,C组为shRNA阴性对照组,D组为shRNA-HIF-1α干扰组,E组为pcDNA3.1-HIF-1α过表达组。缺氧处理后12、24、48 h采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测各组细胞成活率;24 h采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,并采用Western blot检测HIF-1α、VEGF、B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma2,Bcl-2)、Bax、活化型半胱天冬酶-3(cleaved Caspase-3,C-Caspase-3)蛋白表达。结果 CCK-8法检测示,缺氧处理后各时间点与A、C组比较,D组细胞成活率明显降低(P0.05);与A、B组比较,E组细胞成活率明显升高,其中24 h组间比较差异有统计学意义(P0.05);E组内24 h时细胞成活率明显高于12、48 h时(P0.05)。流式细胞仪检测示,与A、C组比较,D组细胞凋亡率明显升高(P0.05);与A、B组比较,E组细胞凋亡率明显降低(P0.05)。Western blot检测示,与A、C组比较,D组细胞中HIF-1α、VEGF、Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax、CCaspase-3蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P0.05);而E组结果相反,与A、B组比较,E组细胞中HIF-1α、VEGF、Bcl-2蛋白表达明显增加,Bax、C-Caspase-3蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HIF-1α基因过表达能够明显改善hAMSCs耐受缺氧能力,其机制可能与上调VEGF和Bcl-2表达及下调Bax和C-Caspase-3表达作用相关。