川赤芍实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

川赤芍与芍药共同作为《中国药典》著名药材赤芍的基原植物,具有重要的药用价值,且在花卉市场的潜力巨大。筛选稳定可靠的内参基因是开展川赤芍分子研究的必要前提。该研究从川赤芍的转录组数据中选取Actin和GAPDH 2个内参基因作为候选基因,利用实时荧光定量技术(qRT-PCR)检测2个候选基因在川赤芍的不同组织(韧皮部、木质部、茎、叶、叶柄、子房)和不同生长时期(萌动期、开花期、休眠期)的表达水平,然后利用geNorm、NormFinder、BestKeeper、ΔCT和RefFinder综合分析2个内参基因表达的稳定性,结果表明Actin和GAPDH在川赤芍不同组织和不同生长时期中的表达模式均稳定。该研究进一步检测川赤芍转录组数据中8个基因(Pv-TPS01、Pv-TPS02、Pv-CYP01、Pv-CYP02、Pv-CYP03、Pv-BAHD01、Pv-UGT01、Pv-UGT02)在不同组织中的表达水平,结果表明,以Actin和GAPDH分别作为内参基因,8个基因在川赤芍不同组织部位的表达趋势均一致,验证了Actin和GAPDH作为川赤芍内参基因的可靠性。综上,该研究发现Actin和...     

u-PAR反义核酸载体的构建与高侵袭人前列腺癌细胞PC-3M亚系的转染

目的:为了特异封闭PC-3M高侵袭亚系尿激酶型纤溶酶原激活物受体(u-PAR)的表达,观察其对侵袭能力的抑制效应。方法: 应用RT-PCR获得u-PAR的cDNA片段,反向插入pcDNA3质粒载体中,构建u-PAR反义核酸载体并导入高侵袭亚系中;借助RT-PCR和免疫组化检测转染细胞u-PAR的表达。 结果:u-PAR反义核酸载体转染株的u-PAR mRNA和蛋白质水平明显低于对照组,抑制率分别为53%和73%,同时其体外侵袭能力亦明显降低,抑制率为79%。 结论: u-PAR反义核酸在PC-3M高侵袭亚系中发挥了特异封闭作用,为进一步观察u-PAR反义核酸抑制高侵袭前列腺癌细胞亚系的侵袭效应提供了细胞模型。     

急性心肌梗塞患者心率变异性的变化

目的：了解急性心肌梗塞（AMI）心率变异性（HRV）的演变特点及其在卫发性室性心动过速(PVT)焊的变化。方法：对60例AMI患者和76名健康成人行24h HRV(时域、频域、散点图）分析,根据AMI后HRV检测先后和合并PVT与否进行分组对比研究,并对12例随访MI患者的HRV行自身对比研究,结果：AMI患者HRV多数指标显著低于对照组（P＜0．05）,其慧星型散点图比例较对照组亦显著降低（P＜0．01）。AMI后早期（＜24h)SDNN,SDANN,SDNNindex, 三角指数、ULF即显著降低,并与TP、VLF、LF一同呈现先降低后不全恢复态势,其测值以24h-7d时段或7d-21d时段为最低,其它指标呈降低趋势,HRV多数指标在4个不同检测时间段的差异无统计学意义,12例AMI患者HVR指标复测时绝大多数较初测时有不同程度提高,SDNN呈显著升高（P＜0．01）,合并短阵室和心肌缺血者除SDNN,SDANN外其它指标测值在分组比较中均相比为最低,但无这显著意义（P＞0．05）,结论：AMI患者HRV显著低于正常对照组,且随时间推移呈逐步恢复的演变,表明AMI患者自主神经受损,AMI后同时存在PVT和心肌缺血者的HRV降低更显著。     

医疗纠纷起因与防范

随着社会的发展和法制化的健全,公民自我保护意识的不断增强,以及医疗保健制度的改革,观念的改变,就诊期望值的增高,医疗纠纷的数量逐年增多,类型复杂,要求赔偿数额越来越高,解决纠纷的难度也越来越大。为了维护患者的利益和医院的正     

阿法骨化醇对去卵巢大鼠骨质疏松症防治作用的实验研究

目的 探讨从骨量、骨结构、骨力学和骨转换等方面研究阿法骨化醇对去卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用。方法 ５３只健康雌性未交配６个月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为６组（１）基线组（Ｂａｓｅ）６个月龄时处死;（２）假手术组（Ｓｈａｍ）;（３）去卵巢（ＯＶＸ）治疗前对照组（ＯＶＸｂ）;（４）ＯＶＸ治疗末对照组（ＯＶＸｅ）;（５）ＯＶＸ后雌激素治疗组（Ｏ＋Ｅ）;（６）ＯＶＸ后阿法骨化醇治疗组（Ｏ＋ＶＤ）ＯＶＸ后６周开     

人血小板生成素的基因克隆及序列分析

目的：为获得人血小板生成素全长ｃＤＮＡ克隆。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术,以特异性寡核苷酸为上、下游引物自胎肝总ＲＮＡ中扩增目的基因。结果：ＰＣＲ扩增产物克隆至ｐＵＣ１８－Ｔ载体,儿得重组质较ｐＵＣＴ－ＴＰＯＭ。结论：序列分析显示,获得的血小板生成素ｃＤＮＡ序列与国外文献一致。     

米索前列醇在人工流产术中的应用

人工流产是一种终止早期妊娠的常用手术方法.在临床工作中发现,人工流产术中部分病人疼痛较严重,不能配合手术,甚至出现人流综合症.     

食道癌术后末段回肠、盲肠、升结肠、横结肠疝入左侧胸腔1例报告

1　病例资料患者 ,女 ,58岁。 1 997年行食道癌切除术 ,1 999年 5月 1 2日晚急诊入我科求治。一周前无明显诱因突感上腹部阵发性疼痛、腹胀 ,肛门停止排气、排便 ,三天前上腹部疼痛加剧 ,频繁呕吐。查体 :体温 37.4℃ ,脉搏 82次 /分 ,呼吸 2 3次 /分 ,血压 1 4/1 0ＫＰａ ,消瘦 ,痛苦病容、呻吟不止 ,右肺下部叩浊 ,未闻及呼吸音 ,心脏正常。腹部膨隆 ,未见胃肠型及蠕动波 ,左上腹压痛明显 ,腹肌略紧张 ,移动性浊音 ( ) ,肠鸣音减弱。腹穿抽出不凝血性腹水 ,脱落细胞学检查未见癌细胞。左胸穿抽出血性胸水。腹部平片可见多个气液平面 ;胸…     

过期妊娠两种引产方法的临床观察

我院1998～1999年对120例过期妊娠进行米索前列醇(米索)及低浓度催产素引产,比较其临床效果及药物对胎儿安全性的影响,现总结如下.     

体外循环心脏直视手术围术期心肌酶的变化

目的：观察体外循环下心脏直视手术患者围术期心肌酶的动态变化。方法：２５例先天性心脏病患者分别于术前、再灌注３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、６ｈ和术后２４ｈ测定患者血清磷酸肌酸激酶（ＣＫ）、同工酶（ＣＫ－ＭＢ）、门冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、羟基丁酸脱氢酶（ＢＨＤＨ）水平。结果：再灌注后各期ＣＫ、ＣＫ－ＭＢ、ＡＳＴ、ＬＤＨ、ＢＨＯＨ活力均逐渐升高;且再灌注酶（ＬＤＨ）、羟基丁酸脱氢酶（