35例成人急性淋巴细胞白血病免疫表型分析

３５例成人急性淋巴细胞白血病免疫表型分析李智萍乔振华刘秀娥王椿张金梅马艳萍冉家彦近年来，ＡＬＬ的疗效有了提高，儿童ＡＬＬ完全缓解率达９０％～９５％，存活率约为５０％。而成人ＡＬＬ的疗效较差，这可能反映成人ＡＬＬ的许多生物学特征与儿童ＡＬＬ者不同［１］...     

急性白血病p170流式细胞仪检测及临床意义

为评价初治急性白血病ｐ１７０表达的临床意义，用流式细胞仪检测了２０例患者ｐ１７０的表达率，结果发现：难治与复发组ｐ１７０的表达率（３０．９８±１４．２３％）明显高于初治敏感组（１６．４７±１．４８％），二者差异有显著性意义，提示：ｐ１７０的高表达与临床耐药密切相关。     

伴有8号染色体四体异常的t(15;17)急性早幼粒细胞白血病实验诊断及临床分析

目的:报告首例伴有8号染色体四体(四体8)异常的t(15;17)急性早幼粒白血病(AML-M3a),并研究其形态学、细胞遗传学、免疫学及临床特点。方法:外周血及骨髓标本直接涂片观察其形态学改变;采用骨髓细胞24h短期培养法制备染色体标本,RHG显带技术进行核型分析;以筑巢式逆转录聚合酶链反应(nested-RT-PCR)技术检测PML-RARa融合基因转录本;以流式细胞术检测免疫表型。结果:外周血涂片中早幼粒细胞占65%,可见中晚幼粒细胞。骨髓涂片显示有核细胞增生明显活跃,粒系83.6%,其中早幼粒细胞占72.4%,胞浆内可见大量紫红色颗粒。染色体核型分析揭示核型为48,XY,+8,+8,t(15;17)(q22;q12)[16]/47,XY,+8,t(15;17)(qxx:q12)[3]/46,XY,t(15;17)(q22;q12)[1]。RT-PCR检测PML-RARa(+),白血病细胞免疫表型检测显示CD13(96.2%)、CD33(55.9%)、CYMPO(93.5%)阳性,其余抗原包括淋系抗原在内均为阴性。本例患者生存期只有10d。结论:本例四体8是t(15;17)的继发性改变,可能是三体8克隆进展的结果。伴有四体8的t(15;17)AML-M3预后差。     

急性白血病MDR_1与分化抗原关系及其临床意义

目的 :探讨急性白血病 MDR1 / CD34 表型的临床意义。方法 :采用流式细胞仪及对碘硝基四唑盐(INT)细胞毒检测法 ,分析了 5 1例初治及 17例复发急性白血病患者细胞的表面分化抗原及 MDR1 基因编码的p170阳性率 ,并用 INT法的体外药敏试验进行对照。结果 :MDR1 与 CD34 有显著相关性 (r =0 .842 ,P <0 .0 1) ,而与 CD1 3、CD1 4 、CD1 5 、CD33、HL A- DR等其它髓系抗原无关 ;MDR1 / CD34 表型细胞较 MDR1 - / CD34-表型细胞缓解率、生存期、缓解期显著缩短。结论 :急性白血病 MDR1 / CD34 表型可作为白血病预后不良的指标。     

FLT3-ITD突变在儿童急性髓性白血病中的表达及其与多药耐药的关系

为了研究FLT3内部串联重复序列（FLT3-ITD）突变在儿童急性髓系白血病（AML）中的表达、该类患儿的临床特征及其与多药耐药基因mdr1表达的关系,应用RT—PCR技术检测81名初发儿童AML骨髓标本,FLT3-ITD突变及mdr1基因的表达,并分析患儿骨髓细胞遗传学及免疫表型。结果表明：在AML患儿中FLT3-ITD突变率为9．88％（8／81）,均为杂合突变。突变患儿年龄较无此突变者明显偏大,但与性别、细胞免疫分型等无关。突变组就诊时白细胞数及骨髓原始细胞数较无突变组显著升高（P=0．001和P=0．041）,且突变组患儿表现为正常染色体居多。突变组患儿预后较差,首次诱导缓解率仅为25．00％,而无突变组为76．71％。RT—PCR法检测mdr1基因显示,27名患儿表达该基因,但在FLT3-ITD阳性的8名患儿中只有3人是同时表达mdr1基因,此结果提示FLT3-ITD发生与多药耐药基因的表达无相关性。结论：FLT3-ITD突变是儿童AML中发生频率较高的一类突变,但突变率较成人为低,此类患儿预后差,首次诱导缓解率低,但FLT3-ITD突变与多药耐药基因的表达无相关性,提示耐药调节剂可能对该类患儿无效。     

非清髓异基因造血干细胞移植术后荧光STR-PCR血细胞嵌合体定量检测

非清髓异基因造血干细胞移植（allo—NST）后，明确判定残余宿主细胞与供者细胞嵌合状态对于疗效评估及供者淋巴细胞输注（DLI）时机的把握是至关重要的。由于短片段串联重复（STR）的核心序列短小，不易受DNA降解及优势扩增的影响，因而STR可作为异基因造血干细胞移植后嵌合体检测的灵敏度高，且易于操作的技术方法。我们对29例allo—NST后供一受者的嵌合体分析，研究嵌合体与微量残留病（MRD）、疾病复发、移植物抗宿主病（GVHD）等的相关性。     

异基因骨髓间充质干细胞对类风湿关节炎患者主要细胞因子分泌的影响

目的 探讨在体外环境中,异基因骨髓间充质干细胞( Allo-BM-MSCs)对类风湿关节炎(RA)患者的白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α和转化生长因子(TGF)-β1分泌的影响。方法 采集健康供者的骨髓标本,经密度梯度离心分离、纯化获得其骨髓间充质干细胞(bMSCs),进行体外培养扩增。同时采集RA患者的外周血,分离单个核细胞。将来源于健康供者的bMSCs分别与来源于RA患者的单个核细胞和健康供者的单个核细胞在体外进行共培养,用酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测bMSCs与淋巴细胞混合培养液中细胞因子IL-1、TNF-α和TGF-β1的变化。采用方差分析和相关性分析进行统计学分析。结果 经bMSCs与RA淋巴细胞共培养7d后,培养液中IL-1浓度(6.2±1.0) ng/L和TNF-α浓度(4.6± 1.2) ng/L低于单独RA组浓度(38.4±0.5)和(29.4±1.3) ng/L,差异均有统计学意义(P＜0.05);但是单独正常淋巴细胞和bMSCs与正常淋巴细胞共培养后,培养液中IL-1浓度(4.4±l.3)和(4.4±1.1) ng/L及TNF-α浓度(5.3±1.7)和(5.0±1.7) ng/L之间比较差异均无统计学意义（P＞0.05）;经bMSCs与RA淋巴细胞共培养7d后,培养液中TGF-β1浓度(22.5±2.2) ng/L高于单独RA组(2.6± 1.0) ng/L,差异有统计学意义(P＜0.05);单独正常淋巴细胞和bMSCs与正常淋巴细胞共培养后,培养液中TGF-β1浓度(4.8±1.4)和(10.5±1.2) ng/L比较差异有统计学意义(P＜0.05)。IL-1与TNF-α呈正相关（r=0.896,P=0.000）,TGF-β1 与TNF-α呈负相关（r=-0.356,P=0.019）,TGF-β1与IL-1呈负相关（r=-0.380,P=0.000）。结论 AlloBM-MSCs在体外可以特异性调节RA患者细胞因子的分泌。bMSCs可能在RA发病和发展中起一定的作用,有希望用于RA治疗。     

血清透明质酸和甘胆酸测定在白血病的意义

对６０例不同临床阶段的白血病患者和２Ｏ例正常人进行了血清透明质酸和甘胆酸测定，同时测定了抗—ＨＣＶＩｇＭ。结果示：常规肝功能检查正常的初发组、复发组和完全缓解组的血清透明质酸和甘胆酸均高于正常，以复发组为甚（Ｐ＜０．０１）；复发组和完全缓解组抗ＨＣＶ—ＩｇＭ阳性者分别占１８％和２０％。表明血清透明质酸和甘胆酸测定白血病人肝功较灵敏，白血病复发者及完全缓解者丙型肝炎感染者较多。     

SAG3基因在造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断中的应用

目的探讨造血干细胞移植患者弓形虫感染的快速、特异、敏感的诊断方法。方法以弓形虫SAG3基因为靶基因，采用聚合酶链反应法(PCR)对56例造血干细胞移植受者及20名正常对照者进行检测，同时以酶联免疫吸附试验(ELISA)进行弓形虫抗体IgG、IgM的血清学检测。结果以PCR和ELISA检测弓形虫SAG3基因片段和其抗原，阳性分别为10例及7例，阳性率分别为17．9％和12．5％，其中PCR检测阳性、而ELISA检测阴性的3例，经病原学检测，均证实有弓形虫感染；20名正常对照者的检测结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫SAG3基因的方法诊断弓形虫感染具有准确、快速、特异和敏感的优点，可作为造血干细胞移植患者弓形虫感染的诊断方法之一。