理想的电生理学实验平台:急性分离的成年比格犬迷走神经节神经元（英文）

目的建立急性分离成年犬结状神经节神经元(VGN)电生理学研究平台。方法通过急性分离和培养雌雄成年比格犬VGN,利用全细胞膜片钳技术分别记录动作电位,电压依赖性的外向钾电流(I_K)和超极化激活的阳离子电流(I_h)。结果动作电位波形分析结果显示:(1)雌性比格犬VGN不仅可以记录到传统分类中的髓鞘化A型和非髓鞘化C型神经元,还可以记录到雌性特异分布的Ah型神经元;(2)步阶电流除极在诱发相同持续放电频率时,A型所需要的刺激强度最小,Ah型所需要的电流强度与A型近似或轻微增加,而C型需要的刺激强度最大;(3)河豚毒素显著降低Ah型神经元的除极速率和触及阈值;蝎毒素可显著增加A-型的神经兴奋性;(4)所有受试神经元均表达I_K和I_h,且2种电流密度均呈现A型>Ah型>C型;(5)尽管雌雄VGN分布的传入纤维种类有别,已知的A和C型VGN放电差异性并未在本研究中探讨。结论成年比格犬VGN可被成功急性分离,并用于动作电位、I_K和I_h的记录;分类和电生理学特性...     

甲醇对豚鼠单个心室肌细胞动作电位的影响

目的　研究甲醇对正常豚鼠心室肌细胞跨膜动作电位影响 ,旨在探讨甲醇对心肌细胞的电生理作用。方法　酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用全细胞膜片钳技术记录甲醇对豚鼠单个心室肌细胞动作电位的影响。结果　应用 0 .2 %甲醇使豚鼠单个心室肌细胞动作电位复极 5 0 %时程 (APD50 )从给药前 (12 92 .6 8± 2 98.0 3)ms缩短到 (75 0 .2 5± 6 8.0 5 )ms (n =6 ,P <0 .0 5 ) ;动作电位复极 90 %时程 (APD90 )从给药前 (132 8.13± 2 89.91)ms缩短到(783.2 5± 6 3.4 4 )ms (n =6 ,P <0 .0 5 ) ;动作电位幅度 (APA)从给药前 (12 6 .35± 3.2 0 )mV减少到 (113.2 0± 6 .0 8)mV(n =6 ,P <0 .0 5 )。结论　甲醇降低动作电位幅度 ,缩短动作电位时程 ,影响心肌正常工作 ,可能与它对心肌细胞钾通道的作用有关。     

三氧化二砷对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响

 目的研究三氧化二砷(arsen ic trioxide,As₂O₃)对豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨As₂O₃诱导QT间期延长的离子靶点。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术深入研究As₂O₃对豚鼠单个心室肌细胞动作电位时程(APD)、延迟整流钾电流(IK)和内向整流钾电流(I_K1)的影响。结果As₂O₃50和100μmol·L^-1分别使APD50从对照组的(273±78)m s增加到(456±35)m s(P<0.01)和(513±41)m s(P<0.01),使APD90从对照组的(286±82)m s增加到(468±36)m s(P<0.01)和(524±40)m s(P<0.01);实验电压为+70 mV时,50和100μmol·L^-1As₂O₃分别使I_K从对照组的(6.7±1.7)pA/pF减少至(4.9±1.6)pA/pF(P<0.05)和(4.5±1.8)pA/pF(P<0.05);在实验电压为-120 mV时,As₂O₃50和100μmol·L^-1分别使IK1从对照组的(-20±5)pA/pF减少至(-13±3)pA/pF(P<0.05)和(-11±2)pA/pF(P<0.05)。结论As₂O₃诱导QT间期延长的离子机制可能与其扰乱了心肌细胞膜离子通道间的平衡,抑制I_K和I_K1,从而导致APD延长有关。     

槲寄生黄酮苷对大鼠心肌缺血的保护作用及其机制

目的 观察槲寄生黄酮苷对心肌缺血大鼠的保护作用.并进一步明确其对血小板激活因子(PAF)的调控作用.方法 结扎大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,通过观察不同剂量槲寄生黄酮苷(15、75 mg/kg)及PAF受体特异性阻断剂BN52021(10 mg/kg)对梗死范围的影响,对比评价槲寄生黄酮苷对缺血心肌的保护作用;分离正常大鼠心肌细胞,Fluo-3/AM荧光染色.采用共聚焦显微镜技术研究,预先给予不同剂量槲寄生黄酮苷30 min后对PAF(1×10-11mol/L)诱导心肌细胞钙超载的拮抗作用.结果 与模型组比较,槲寄生黄酮苷和BN52021均可缩小大鼠梗死心肌范围.降低心肌梗死大鼠血清乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)水平,提高血清超氧化物歧化酶(SOD)水平,并成剂量效应关系,PAF可直接诱导心肌细胞钙超载,而槲寄生黄酮苷和BN52021可直接对抗这种钙超载作用.结论 槲寄生黄酮苷对心肌缺血具有保护作用,作用机制与其抑制PAF诱导心肌细胞内钙超载有关,PAF信号通路阻断药物可能成为抗心肌缺血药物的研究靶点.     

小檗胺对ROCC介导的血管平滑肌细胞内游离钙的影响

目的　研究小檗胺 (BA)对受体调控性Ca2 +通道介导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞内游离钙 ([Ca2 +]i)的影响。方法　家兔主动脉血管平滑肌以Fluo 3/AM负载 ,通过激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM )测定 [Ca2 +]i。结果　在细胞外Ca2 +存在的条件下 ,BA 30 μmol·L-1不影响静息[Ca2 +]i;但对去甲肾上腺素 (NE) 30mmol·L-1、5 羟色胺 (5 HT) 1μmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高有明显的抑制作用。在无胞外钙时 ,对咖啡因 40mmol·L-1诱导的 [Ca2 +]i 升高没有作用。结论　BA对ROCC激活后的外钙内流有明显的抑制作用 ,对内钙释放没有影响。其作用与维拉帕米相似     

延胡索乙素对豚鼠单个心室肌细胞钾离子通道的影响

目的研究延胡索乙素(dltetrahydropalmatine,THP)对正常豚鼠心室肌细胞钾电流的影响,旨在探讨延胡索乙素抗心律失常作用机制。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录延胡索乙素对豚鼠单个心室肌细胞钾电流的影响。结果延胡索乙素可明显抑制延迟整流钾电流(IK)和内向整流钾电流(IK1),并呈剂量依赖性。结论延胡索乙素抗心律失常作用机制可能与它对心肌细胞钾通道作用有关,THP可抑制IK和IK1,使动作电位时程(APD)和有效不应期(ERP)延长从而发挥其抗心律失常作用。     

阿是止泻胶囊对甲状腺功能亢进性腹泻大鼠杯状细胞的影响

目的 探讨阿是止泻胶囊对甲状腺功能亢进性腹泻(简称甲亢性腹泻)大鼠胃肠道杯状细胞的影响.方法 8周龄的雄性SD大鼠120只,按体质量随机分为对照组(10只)和甲亢性腹泻组(110只).对照组按每只大鼠1ml/d生理盐水灌胃;其余大鼠给予40g/L的甲状腺片混悬液,每只大鼠1 ml/d.根据大鼠血清FT3、FT4水平、体质量和湿粪的数量筛选出40只甲亢性腹泻大鼠.将甲亢性腹泻大鼠按体质量随机分为腹泻对照组、黄连素组,阿是止泻胶囊低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组8只.腹泻对照组:按1 ml/d生理盐水给药;黄连素组:按1.94 g·kg-1·d-1给黄连素片;低、中、高剂量组:分别按0.63、1.26、2.52 g·kg-1·d-1给予阿是止泻胶囊.各组连续灌胃7 d,次日脱颈处死,取十二指肠、空肠、回肠、结肠组织,HE染色,光镜观察组织形态及杯状细胞的计数.细胞计数单位为细胞数/高倍镜下每视野(cells/hpf).结果 在空肠中,除低剂量组[(23.98±2.28)cells/hpf]外,黄连素组、中剂量组、高剂量组杯状细胞数量[(15.32±2.53)、(20.24±1.24)、(14.98±1.10)cells/hpf]均低于腹泻对照组[(25.73±4.55)cells/hpf,P均<0.05];结肠中,黄连素组、低剂量组、中剂量组、高剂量组结肠杯状细胞数量[(18.29 ±1.33)、(20.61±2.12)、(19.38±2.01)、(16.34±1.55)cells/hpf]均低于腹泻对照组[(23.36±3.10)cells/hpf,P均<0.05].空肠和结肠腹泻对照组和高剂量组均低于低剂量组(P均<0.05).十二指肠和回肠中杯状细胞数量组间比较差异无统计学意义(F=2.81、2.67,P均>0.05).形态学观察显示,空场和结肠组织中,腹泻对照组杯状细胞数量明显增多,而随着治疗剂量的增加细胞数量逐渐减少.结论 甲亢性腹泻大鼠空肠和结肠组织中杯状细胞数量明显增多,阿是止泻胶囊能显著降低空肠和结肠组织中杯状细胞数量,减少黏液分泌.     

细胞内游离钙与柯萨奇病毒B3诱导的大鼠培养心肌细胞凋亡

目的 探讨（Ｃａ＾２＋）ｉ在柯萨奇病毒（ＣＶ）Ｂ３诱导心肌培养细胞凋亡中的作用。方法 ＤＮＡ裂点检测法（３′－末端标记）及扫描电镜检测细胞凋亡。Ｆｌｕｏ３－ＡＭ负载心肌细胞,共聚劁业微镜观察（Ｃａ＾２＋）ｉ荧光强度变化。结果：感染２４ｈ,心肌细胞内ＣＶＢ３的浓度达峰值,感染１０ｈ未见凋亡的心肌细胞,１７,２４和３６ｈ凋亡细胞分别为５％,６０％和９０％,感染１７ｈ心肌（Ｃａ＾２＋）ｉ浓度达峰值,电镜     

小檗胺对高钾,去甲肾上腺素及咖啡因引起大鼠心肌细胞内钙动拮？…

AIM: To study the effects of berbamine (Ber) on intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) mobilized by KCl depolarization, norepinephrine (NE), and caffeine. METHODS: [Ca2+]i was measured with fluorescent intensity (FI) by confocal microscope in single cultured cardiomyocytes of newborn rats loaded with Fluo 3-AM 2 mumol.L-1. RESULTS: FI value of [Ca2+]i in control level was 248 +/- 70 in the presence of extracellular calcium 1.5 mmol.L-1 and was not changed by Ber 3-30 mumol.L-1. KCl (60 mmol.L-1)- and NE (30 mumol.L-1)-induced [Ca2+]i mobilizations were inhibited (P < 0.01) by Ber 30 mumol.L-1, similar to that of verapamil (Ver). The inhibitory effect of Ber on [Ca2+]i induced by KCl was further increased (P < 0.05) in the presence of egtazic acid 3 mmol.L-1, but that on [Ca2+]i induced by NE was not changed. The [Ca2+]i mobilized by caffeine 80 and 160 mumol.L-1 in D-Hanks' solution was not affected (P > 0.05) by Ber and Ver. CONCLUSION: Ber possessed the antagonistic effects on [Ca2+]i increases via voltage-dependent Ca2+ channel and receptor-operated Ca2+ channel in newborn rat cardiomyocytes, but without effect on intracellular Ca2+ release.     

细胞信号传递和基因转录的调控

关于生长因子、细胞因子和激素所产生的信号是如何改变哺乳动物基因表达的，最近有了更深入的理解。现已确定从细胞表面到细胞核的信号传递存在三个基本系统，即：细胞质激酶的活化和易位到核，引起转录因子功能的改变；通过磷酸化直接活化细胞质内潜在的转录因子；从细胞质的固有蛋白中释放出转录因子。这些信号系统可以相应地通过有丝分裂原活化蛋白（ＭＡＰ）激酶途径以及转录蛋白和核因子ＫＢ（ＮＦ－ＫＢ）的信号转导和活化表现