早孕因子的研究进展

早孕因子是具有免疫抑制活性和生长调节活性的妊娠相关蛋白,为目前最早确认妊娠的生化指标之一.目前普遍认为它是细胞伴侣蛋白10的类似物,但两者存在的部位及作用方式不同.除妊娠母体血清外,在某些肿瘤组织及再生肝细胞中也存在早孕因子,说明其还具有类似生长因子的活性.近年来随着早孕因子生化特性的逐步明确及其检测方法的改进,使得早孕因子在超早孕诊断、流产预测、某些肿瘤的早期诊断和预后判断及自身免疫性疾病的治疗等方面有了广泛的临床应用前景.     

卵巢内膜异位囊肿恶性变生物学行为的变化

为进一步了解卵巢内膜异位囊肿恶性变情况,本文分析2000～2001年在本院诊治的卵巢内膜异位囊肿恶性变11例患者生物学行为的变化。资料和方法2000年1月～2001年12月本院收治的卵巢内膜异位囊肿恶性变患者共11例。患者手术标本常规4%的甲醛固定,石蜡包埋,常规苏木素-伊红染色,由2位病理科医师检查病理切片,并作出诊断。病理学诊断标准:(1)找到良性子宫内膜异位证据;(2)见到良性子宫内膜异位病灶向恶性移行的证据;(3)找到恶性细胞;(4)排除浸润或转移。用酶联免疫法测定血清CA125,正常标准为<37.5IU/ml。应用免疫组织化学法测定肿瘤细胞雌激素…     

重组人TRAIL促卵巢癌细胞凋亡作用的研究

目的:分析重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)分子诱导卵巢癌细胞的凋亡。方法:观察重组人可溶性TRAIL对卵巢癌细胞直接细胞毒作用,MTT法分析不同浓度TRAIL对卵巢癌细胞3AO、HO-8910的生长抑制率,采用流式细胞技术观察TRAIL作用于3AO后的凋亡率的变化。结果:重组人可溶性TRAIL蛋白可抑制卵巢癌细胞生长,诱导卵巢癌细胞发生凋亡;倒置显微镜下观察细胞呈现圆形固缩形态,细胞凋亡之后存活细胞减少。结论:重组人可溶性TRAIL具有明显诱导卵巢癌细胞凋亡的活性,并具有量效性及时效性。其抑制卵巢癌细胞机制可能与其促凋亡作用有关。     

促卵泡激素通过活性氧途径调控卵巢癌细胞Nrf2蛋白的表达

目的 通过观察促卵泡激素(FSH)、活性氧(ROS)及其特异性抑制剂对卵巢癌细胞中红系衍生的核因子2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)表达的影响,探讨FSH是否通过ROS途径调控卵巢癌细胞Nrf2的表达.方法 (1)采用免疫组织化学方法检测Nrf2在卵巢癌良恶性组织中的表达.(2)用不同浓度的FSH刺激卵巢癌Hey细胞不同时间,采用蛋白质印迹法检测细胞内Nrf2蛋白的表达.(3)采用ROS检测试剂盒检测80 mIU/ml的FSH刺激后不同时间Hey细胞内ROS的生成情况.(4)Hey细胞经不同浓度的H2O2刺激48 h后,或经ROS特异性抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后加入150 mmol/L的H2O2处理48 h,观察细胞内Nrf2的表达.(5)Hey细胞经不同浓度的NAC预处理1h,加入80 mIU/ml的FSH共孵育48 h,观察细胞内Nrf2表达的变化.结果 (1)10例良性卵巢囊肿组织中仅3例有Nrf2蛋白的弱阳性表达,而64例卵巢癌组织中42例(65.6％)有Nrf2蛋白的阳性表达,两组差异有统计学意义(P=0.042).(2)FSH可上调Hey细胞内Nrf2的表达,并呈一定的剂量、时间依赖效应.(3) FSH可促进Hey细胞ROS的产生.(4) H2O2可诱导Hey细胞Nrf2蛋白的表达,且其作用可被NAC阻断.(5)NAC可阻断FSH所诱导的Nrf2蛋白的表达.结论 FSH可促进卵巢癌Hey细胞中ROS产生,上调Nrf2蛋白表达,抑制ROS途径可阻断FSH诱导的Nrf2高表达.提示FSH可能通过ROS途径调控卵巢癌Nrf2的表达,进而促进肿瘤发生.     

子宫内膜同源盒基因A10表达及调控研究

子宫内膜同源盒基因A10(HOXA10)是内膜细胞发育和分化的调控基因,在子宫内膜的表达呈月经周期依赖性,并持续表达于妊娠子宫的蜕膜组织。HOXA10基因的表达与子宫内膜的容受性,胚胎的黏附与着床,母胎界面的免疫耐受、胚胎的生长发育等紧密相关。对HOXA10基因的深入研究将为其在人工流产、不孕不育、辅助生殖技术等方面的临床应用提供可能性。     

妊娠中期SD大鼠压力反射敏感性的变化

目的研究妊娠中期SD大鼠心率变异性（HRV）、血压变异性（BPV）和压力反射敏感性（BRS）的变化。方法在清醒、自由活动状态下测定妊娠SD大鼠和正常对照SD大鼠的HRV、BPV和自发性BRS；静脉注射去氧肾上腺素（5μg/kg）以测定压力反射对心率的控制功能（BRSHR）。结果妊娠大鼠与正常对照大鼠相比HRV高频成分降低，自发性BRS降低（P〈0．05）。结论妊娠中期SD大鼠的迷走神经调节功能下降，压力反射敏感性降低。频谱分析的方法测定自发性压力反射敏感性是可靠的方法。     

Expression of the novel gene NM23-H1B in ovarian cancer

Objective：To study the expression of the human novel gene NM23-H1B in ovarian cancer.Methods: Totally 24 samples from patients with epithelial ovarian tumor at different clinical stages and 4 from normal ovaries were examined for NM23-H1B mRNA expression by RT-PCR and Northern blot. Results: All samples expressed NM23-H1B mRNA through RT-PCR, while the level of expression in ovarian tumor was higher than that of normal ovary. The results of Northern blot showed that NM23-H1B was overexpressed in ovarian cancer while lowexpressed in normal ovary or low malignant potential (LMP).The level of expression at early stage cancer (stage Ⅰ and Ⅱ ) was higher than those in advanced cancer(stage Ⅲ and Ⅳ ). In early stage carcinoma, the expression level was involved in the differentiation of tumor cell, and well-differentiated cancer expressed NM23-H1B mRNA in comparatively higher level. Conclusion: The novel gene NM23 N1B is closely correlated with the ovarian cancer.     

新基因nm23-H1B在卵巢上皮性肿瘤中的表达研究

目的研究人类新基因nm23-H1B与卵巢肿瘤的关系。方法收集2003年4月~2004年2月手术切除各种卵巢肿瘤标本48例,正常卵巢组织8例。采用RT-PCR、Northern杂交、原位杂交检测nm23-H1BmRNA的表达。结果用RT-PCR在所有的标本中均检测到nm23-H1B基因mRNA的表达,其在正常卵巢组织中表达较低,而在所有的卵巢肿瘤中表达均出现明显上调,在早期卵巢癌中的表达高于晚期。Northern杂交显示nm23-H1B基因在正常卵巢组织的表达量较低,交界性肿瘤中的表达则与正常组织中相似,而在卵巢癌组织中表达明显增高,在早期卵巢癌中在分化好的组织中(Ⅰ级)表达量明显高于分化较差(Ⅱ、Ⅲ级)者。原位杂交显示nm23-H1B基因在正常卵巢组织和交界性肿瘤的表达量极低,而在卵巢癌组织中表达明显增高,mRNA表达产物主要位于细胞质内;早期卵巢癌中的mRNA表达量高于晚期卵巢癌。结论nm23-H1B基因与卵巢癌有明显的相关性。     

逆转录病毒介导Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因转导卵巢癌细胞的研究

目的：探讨将Ⅰ型单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）／丙氧鸟苷基因治疗系统应用于卵巢癌的治疗。方法：应用产病毒包装细胞（ＶＰＣ）／ＨＳＶ－ｔｋａ和ＶＰＣ／ＨＳＶ－ｔｋｃ的培养液分别感染卵巢上皮癌细胞系ＡＯ和３ＡＯ，以Ｇ－４１８筛选转导阳性克隆，并以丙氧乌苷杀伤阳性克隆。结果：ＶＰＣ／ＨＳＶ－ｔｋｃ培养液对ＡＯ细胞的感染滴度为９．３×１０００００；以１∶１０００稀释度的ＶＰＣ／ＨＳＶ－ｔｋｃ培养液与以１∶１０稀释度的ＶＰＣ／ＨＳＶ－ｔｋａ培养液作转导所获得的阳性克隆数相近；且所有阳性克隆在含有１０μｇ／ｍｌ丙氧鸟苷的培养液中均发生完全死亡。结论：ＨＳＶ－ｔｋ／丙氧鸟苷系统在卵巢癌治疗中具有良好的应用前景     

缺氧/复氧对卵巢癌SKOV3细胞增殖能力的影响

目的:探讨缺氧/复氧后卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3增殖能力的改变及其相关机制。方法:SKOV3细胞分别缺氧24h及缺氧后复氧培养不同时间。用MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期;Western blot和RT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。用HIF-1α抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)预处理细胞30min后,检测上述各指标的变化。结果:复氧24h细胞增殖率增加(1.38±0.60,P=0.023);复氧48h细胞增殖率恢复为常氧培养水平(0.67±0.28,P=0.48)。流式细胞仪分析显示复氧24h时S期细胞增加[(48.45±1.15)%,P=0.013],G1期细胞减少[(45.71±2.28)%,P=0.044]。常规培养的SKOV3稳定表达HIF-1α,缺氧可使HIF-1α蛋白表达增加(P=0.0045),复氧8h,HIF-1α表达迅速下降。Rapamycin可以使细胞周期停滞于G0~G1期,从而降低细胞的增殖能力。结论:缺氧/复氧可增强卵巢癌细胞株SKOV3的增殖能力,HIF-1α通路可能在其中起重要作用。