兔脂肪干细胞的分离培养鉴定及诱导分化研究

目的:分离培养家兔脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ASCs),观察体外培养生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法:无菌条件下切取家兔腹股沟处脂肪组织,0.25%Ⅰ型胶原酶消化,分离培养原代细胞,取第3代ASCs做实验,用HE染色观察细胞形态,MTT比色法测定细胞生长曲线;用流式细胞仪检测其细胞表面标志物;用油红O染色和茜素红染色鉴定成脂和成骨诱导分化。结果:从家兔脂肪组织中分离获得的ASCs形态为长梭形,成纤维细胞样,生长活力旺盛,具有较强的增殖能力;流式细胞仪分析CD29呈阳性表达,CD31呈阴性表达;成脂诱导的细胞油红O染色阳性,成骨诱导的细胞茜素红染色阳性。结论:本实验分离培养的细胞为ASCs,具有成脂和成骨分化潜能。     

微小RNA调节骨骼肌发育与损伤修复的作用及其机制

microRNAs是一类非编码小RNAs分子,新近发现其具有重要的调节基因表达的功能,它能通过抑制翻译和降解靶mRNA来负性调控转录后水平的基因表达,miRNAs已经被证实在肌肉发育和肌细胞增殖和分化的调节中具有重要作用。最近研究发现,肌肉特异性转录因子控制一些microRNAs的表达,通过多种机制调节肌肉发育和功能。结合信息学、生物化学和遗传基因学方法,不仅将阐明骨骼肌microRNAs调控网络,更好地理解肌肉组织的调节,还将通过鉴定候选microRNAs的潜在临床应用靶点,增加肌肉营养不良的治疗干预的新机会。     

非O1群霍乱弧菌感染腹泻的分布及耐药性分析

为了解本地区非Ｏ１群Ｖ．ｃｈｏｌｅｒａｅ（霍乱弧菌）感染腹泻的流行状况，对我院肠道门诊腹泻病患者的粪便标本，进行了连续两年致病性弧菌的监测，并对非Ｏ１群霍乱弧菌感染的流行病学因素，进行了综合分析，结果报告如下。１材料和方法１．１标本来源１９９８年至１９９９年急性腹泻病患者的粪便标本３１６５份；患者全部为１４岁以上的成年人，年龄从１４岁至８９岁；男性患者１６８５例，女性患者 １４８０例。１．２培养基增菌及分离培养基购自北京市东城区卫生防疫站，ＭＨ琼脂购自生物梅里埃公司。新鲜脱纤维羊血和兔血本实验室…     

髂筋膜间隙阻滞术后镇痛对老年股骨近端骨折患者应激水平及凝血功能的影响分析

目的:分析髂筋膜间隙阻滞术后镇痛对老年股骨近端骨折患者应激水平及凝血功能的影响.方法:随机抽取60例本院自2016年3月至2017年4月收治的股骨近端骨折老年患者,所有患者均实施手术治疗,在此基础上根据随机数字表法将其分为对照组(n=30)、观察组(n=30),对照组术后给予常规镇痛,观察组术后给予髂筋膜间隙阻滞镇痛,分析两组疼痛程度、应激水平及凝血功能.结果:疼痛程度对比:观察组低于对照组(P<0.05);应激水平及凝血功能对比:观察组优于对照组(P<0.05).结论:给予老年股骨近端骨折手术患者术后髂筋膜间隙阻滞镇痛,具有较高的镇痛效果,对改善患者应激水平及凝血功能具有重要作用,值得临床推广应用.     

新生儿惊厥的临床研究进展

新生儿惊厥是新生儿神经系统疾病中最常见的一种,通常需要及时的治疗。但是目前与新生儿惊厥治疗有关的临床随机对照试验却很缺乏,使得临床诊治工作的循证医学证据不足。尽管如此,对于新生儿惊厥发作的患儿进行连续长期视频脑电图的监测仍是必要的,它是诊断新生儿惊厥的金标准。同时了解惊厥的病因也很重要,这有利于医生更好的认识惊厥的病程和指导治疗。新生儿惊厥的治疗手段并不多,目前仍以药物治疗为主,一线药物为苯巴比妥,二线药物有苯妥英钠、苯二氮卓类(地西泮、劳拉西泮、氯硝西泮和咪达唑仑等)、左乙拉西坦、利多卡因、托吡酯、布美他尼。另外,亚低温治疗也可以作为一种辅助治疗方案。     

ACL的构建及其对结直肠癌HCT116细胞增殖和迁移的作用

目的探讨miR-363-5p靶向三结构域蛋白14(TRIM14)对3种乳腺癌细胞系凋亡的影响。 方法采用实时荧光定量PCR法比较不同化疗药物诱导3种乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-435、MCF-12A)中miR-363-5p和TRIM14 mRNA表达水平,采用免疫组化法检测不同亚型乳腺癌组织TRIM14表达情况。采用Western blotting检测TRIM14蛋白表达。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。应用生物信息学方法预测miR-363-5p与TRIM14的结合位点,通过干扰miR-363-5p和TRIM14研究miR-363-5p对3种乳腺癌细胞中TRIM14的调控作用。Pearson相关分析各亚型乳腺癌组织中miR-363-5p与TRIM14的相关性。 结果3种化疗药物均能促进细胞凋亡,化疗药物处理3种亚型乳腺癌细胞后miR-363-5p表达上升,TRIM14 mRNA表达下降。荧光素酶报告基因实验发现TRIM14是miR-363-5p的靶基因。过表达miR-363-5p后,3种亚型乳腺癌细胞凋亡率上升,TRIM14蛋白和mRNA下降。敲低TRIM14后3种亚型乳腺癌细胞凋亡率上升,过表达TRIM14后3种亚型乳腺癌细胞凋亡率下降。3种亚型乳腺癌组织miR-363-5p与TRIM14表达呈负相关。 结论化疗药物诱导3种亚型乳腺癌细胞后miR-363-5p表达上升,miR-363-5p靶向抑制TRIM14表达,促进3种乳腺癌细胞系凋亡。     

肺小结节定位研究进展

随着CT技术的发展和体检的普及,肺部小结节的检出率不断提高。其中部分肺小结节不能排除恶性肿瘤的可能,治疗首选手术切除。因此,如何在术中对肺小结节精确定位、并在最大限度保护肺功能的前提下精准切除结节,是胸外科医师面临的重要课题。目前,肺部小结节术前辅助定位的核心是置入标志物,临床常用的定位方法主要有带钩金属丝定位法、微弹簧圈定位法、亚甲蓝穿刺注射定位法以及生物胶定位法等。本文简要综述现有定位方法的发展现状、适用范围及优缺点等,为临床应用及后续研究提供参考。     

末梢血化学灭活抗链球菌溶血素“O”胶乳法的实验探讨

抗链球菌溶血素“O”胶乳试验,简便、受干抗因素少,但需静脉采血,血清56℃30分钟灭活,我们用氯化乙酰胆碱化学灭活,末梢微量采血,结果与原胶乳法一致,且快速、稳定,特予介绍。一、试剂1.稀释液:NaCl(AR)0.85g,氯化乙酰胆碱150mg,加蒸镏水100ml,溶解置冰箱保存。2.     

湿片封片技术在临床微生物镜检中的应用

目的寻找一种简单实用可长期保存各类湿片的方法。方法采用双层套封片法和改良Huber聚乙烯醇封片法进行封片,观察封片效果。结果经长达14年的持续观察,采用双层套封片法保存的湿片,染液、菌体以及镜检效果与初制时无异,但只能在低倍和高倍镜下观察,不能用油镜;改良Huber聚乙烯醇封片法封片后可以进行油镜观察,经固定的真菌结构可保存不变。结论两种封片方法的封片效果相当。双层套封片法适用范围更广。改良Huber聚乙烯醇封片法保存丝状真菌的效果最好,但进口试剂价格昂贵,短期内普及使用尚有困难。     

合并糖尿病对后循环短暂性脑缺血发作患者脑干听觉诱发电位的影响

目的使用诱发电位仪检测后循环短暂性脑缺血发作（transient ischemic attack,TIA）患者脑干听觉诱发电位（Brainstem auditory evoked potential,BAEP）的变化,探讨合并糖尿病（DM）的后循环TIA患者受损部位的特点。方法入组后循环TIA病例共58例,其中合并糖尿病组20例,无糖尿病组38例,使用诱发电位仪分别检测其BAEP的变化。结果2组后循环TIA患者的Ⅲ波、Ⅴ波波峰潜伏期（Peaklatency,PL）,Ⅰ～Ⅲ波、Ⅲ～Ⅴ波峰间潜伏期（Interpeak latency,IPL）均较正常值延长,其中合并DM组Ⅲ波PL、Ⅰ～Ⅲ波IPL与无DM组的Ⅲ波PL、Ⅰ～Ⅲ波IPL比较有显著性差异（P〈0.05）,而无DM组的Ⅲ-Ⅴ波IPL与合并DM组的Ⅲ～Ⅴ波IPL比较有显著性差异（P〈0.05）。结论合并DM的后循环TIA患者听神经及脑桥下段较无DM的TIA患者更容易受到缺血性损伤。