腺病毒介导人内皮抑素感染视网膜色素上皮细胞的可行性研究

目的探讨以腺病毒为载体对体外培养的人视网膜色素上皮（human retinal pigment epithelial，hRPE）细胞进行人内皮抑素（human endostatin，hES）感染，获得高效表达hES转基因细胞的可行性。方法常规培养hRPE细胞，传代至第3～第5代后．应用携带有绿色荧光蛋白（green fluorescent protein．GFP）的hES重组腺病毒按感染复数30进行感染。培养24h后，在荧光显微镜下计数培养的hRPE细胞的GFP表达阳性率：用免疫组织化学法观察hES在已感染hRPE细胞中的表达情况；提取hRPE细胞总RNA，采用RT—PCR技术对产物行琼脂糖凝胶电泳：用Western blot法检测感染hRPE细胞培养上清液中hES的表达水平。结果hES重组腺病毒感染后，hRPE细胞形态正常，感染后24h，GFP即呈100％表达．弥漫整个胞质；免疫组织化学法观察可见，hRPE细胞浆内呈棕黄色的阳性反应．而在感染空载腺病毒的对照组中细胞胞浆无染色；RT—PCR反应可见，细胞裂解产物中有hES阳性条带：Western blot法检测结果表明，培养上清液中有hES蛋白的表达。结论hES重组腺病毒载体能有效感染体外培养的hRPE细胞．并稳定表达hES蛋白。     

应当密切关注由颈动脉阻塞引起的视网膜血循环障碍

临床上可以见到越来越多的人发生颈动脉阻塞，据统计大约 69% 的颈动脉阻塞的患者的临床首发症状是眼缺血综合征。但是由于眼缺血综合症的症状较为隐蔽，因此临床上经常发生漏诊、误诊。诊断眼缺血综合征的最佳手段是眼底荧光素血管造影，密切注意观察眼底荧光素血管造影的早期像，可以帮助早期发现、诊断由颈动脉阻塞引起的眼缺血综合征。 （中华眼底病杂志，2008，24：79-81）     

组织因子在脉络膜黑色素瘤中的表达及意义

目的探讨组织因子（TF）在脉络膜黑色素瘤（CM）细胞株及人CM组织中的表达,为CM的治疗提供新的思路和方法。方法体外培养人CM细胞株（OCM-1）,应用免疫组织化学染色法观察TF在OCM-1中的表达。对人CM眼球标本行免疫组织化学染色检测TF在CM组织中的表达。结果OCM-1细胞中TF蛋白主要表达在细胞质,阳性细胞率为（85．33±5．47）％。CM组织中TF蛋白主要表达在细胞质,少部分表达于CM细胞膜及CM组织内血管内皮细胞的细胞质。CM组织切片中,TF表达阳性细胞率为（41．60±14．17）％,正常人眼脉络膜组织中TF表达阳性细胞率为（5．65±4．26）％,差异有统计学意义（t=5．433,P〈0．01）。CM组织切片阳性细胞积分光密度（IOD）值为33853．67±16445．30,正常人眼脉络膜组织切片平均IOD值为426．43±316．62,差异有统计学意义（t=4．460,P〈0．01）。结论TF在OCM-1细胞及CM组织中呈特异性表达,可作为CM的一个特异性免疫治疗靶点,为CM的治疗提供了新的思路。     

内皮抑素对视网膜新生血管中血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的:观察内皮抑素(endostatin,ES)对视网膜新生血管中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:通过缺氧的方法建立小鼠视网膜新生血管模型36只,随机分为高氧组及ES治疗组。ES治疗组小鼠在出氧箱后12,36h,玻璃体腔内注射ES1μL。另将生活在正常氧环境中的18只同龄小鼠作为正常对照。提取3组小鼠视网膜总RNA,通过RT-PCR方法定量检测VEGF在3组小鼠视网膜中的表达。结果:氧致视网膜病变视网膜中VEGF的表达升高,与正常对照组比较有统计学意义(高氧组与正常对照组比较P<0.05);ES作用后VEGF的表达减少,与给氧组比较有统计学意义(ES治疗组与高氧组比较P<0.05)。结论:ES作用机制可能是通过抑制VEGF mRNA基因的表达来抑制视网膜新生血管的形成。     

黄斑囊样水肿

黄斑囊样水肿 (cystoid macularedema,CME)是眼底的常见病 ,但它不是一种独立的特发性疾病 ,而是很多眼底疾病在黄斑区的表现。引起黄斑囊样水肿最常见的疾病有 :视网膜静脉阻塞、糖尿病性视网膜病变、视网膜血管炎、黄斑区视网膜前膜、视网膜毛细血管扩张症、视网膜色素变性、葡萄膜炎、白内障或其它内眼手术后、黄斑区脉络膜的新生血管 ,以及少见的特发性黄斑囊样水肿、烟酸中毒、青年性视网膜劈裂、Gold-mann- Favre综合症等多种疾病。Gass指出 :在正常的生理情况下 ,眼内的液体和电解质是从玻璃体通过视网膜和脉络膜引流到血循环中的…     

吡咯烷二硫氨基甲酸酯抑制大鼠视网膜新生血管的实验研究

目的 检测大鼠视网膜新生血管形成中核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）的表达，探讨抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate, PDTC) 对视网膜新生血管的抑制作用。 方法 通过相对缺氧的方法建立大鼠视网膜新生血管病变模型，用荧光素眼底血管造影(fluorescein fundus angiography, FFA)的方法观察大鼠视网膜 新生血管；免疫组织化学染色法检测视网膜新生血管大鼠和正常对照组大鼠NF-κB在视网膜的表达；视网膜新生血管大鼠腹腔内注射PDTC，观察对视网膜 NF-κB 表达以及新生血管形成的影响。 结果 相对缺氧组10只大鼠的20只眼中13只眼FFA检查显示视网膜中纬部有毛细血管无灌注区、荧光渗漏、新生血管形成，残存视网膜的大血管均纡曲、扩张；3只眼玻璃体积血，无法检查眼底。免疫组织化学染色显示NF-κB从视网膜内核层、神经纤维层的胶质细胞和内皮细胞的细胞浆向细胞核转移。PDTC干预组10只大鼠的20只眼中2只眼FFA检查显示新生血管形成及荧光渗漏；1只眼玻璃体积血；17只眼未见新生血管形成及荧光渗漏。免疫组织化学染色显示NF-κB主要在细胞浆表达。 结论 视网膜新生血管的生成与NF-κB的活化密切相关。PDTC能有效阻止NF-κB的活化以及从视网膜内核层、神经纤维层的胶质细胞和内皮细胞的细胞浆向细胞核的转移，抑制视网膜新生血管的形成。 （中华眼底病杂志，2003，19：201-268）     

鼠视网膜光化学损伤中的主要组织化学改变

目的：观察大鼠视网膜光化学损伤的主要组织化学改变。方法：对动物模型进行视网膜超微结构观察、丙二醛含量测定、细胞色素氧化酶及镁激活三磷酸腺苷酶活性的组织化学观察。结果：超微结构发现光照后6小时，光感受器细胞核肿胀，内节线粒体肿胀，外节水肿，视网膜色素上皮(retinal pigment epithelitis,RPE)顶端微绒毛消失，溶酶体增多，6天反应加重。14天光感受器细胞及内节已基本正常，外节再生但盘膜排列稀疏，RPE顶端出现微绒毛。观察到光照后6小时及６天，视网膜细胞色素氧化酶及镁激活三磷酸腺苷酶活性下降，丙二醛含量增高，至１４天均有所恢复。结论：脂质过氧化使光感受器细胞膜系统损伤崩解，引起细胞超微结构及酶活性改变，可能与视网膜光化学损伤的发病有关。 (中华眼底病杂志,1998,14:38-40)     

大鼠晶体上皮细胞在实验性糖性白内障形成中的改变及作用

利用链脲菌佐素诱发ＳＤ大鼠糖尿病模型，动态观察其糖性白内障形成过程中不同时期晶体上皮细胞形态学改变，检测糖尿病３０天时晶体上皮细胞ＮａＫＡＴＰ酶活性。结果表明：在大鼠糖性白内障形成中，最早发生改变的是晶体上皮细胞，表现为细胞肿胀，细胞内外出现空泡及内质网池扩张等，白内障出现在晶体上皮细胞改变之后；醛糖还原酶抑制剂ＡＬ１５７６可防止上述改变；白内障形成早期，晶体上皮细胞ＮａＫＡＴＰ酶活性升高。提示晶体上皮细胞的改变在糖性白内障发生中起了关键性的作用。     

眼眶平滑肌瘤1例报告

眼眶平滑肌肉瘤极为罕见,我院32年来经病理确诊者仅此一例,临床和病理诊断均较困难,现报告如下。罗××男 20岁住院号 274510。因左眼球前突、疼痛并复视2月余于1974年4月30日住院。