31例肾结石并发肾盂肿瘤诊治体会

目的：提高肾结石并发肾盂肿瘤的诊治水平。方法：回顾性总结我院1972年2月-2000年11月收治31例此类临床病例。结果：31例肾结石并发肾盂肿瘤患者平均病史9.5年，占同期肾盂肿瘤146例的21.7%，其中移行上皮癌11例，鳞状细胞癌10例，腺癌4例，其他6例，术前诊断9例，其中6例由CT诊出，共随访23例，存活5年以上的9例，而随访的9例鳞癌患者均于1年内死亡。结论：肾结石并发肾盂肿瘤临床表现无特异，术前诊断率低。CT有助于提高诊断，结石病史长，反复合并感染者应警惕肾盂肿瘤，鳞状细胞癌恶性度高，预后差。     

超声引导经直肠前列腺穿刺活检个体化方案的探讨

目的探讨个体化前列腺直肠径路穿刺活检方案的可行性。方法回顾性分析325例疑为前列腺癌患者首次穿刺的临床资料。采用系统12针组合穿刺方案,对可疑病变处补充1～2针,根据穿刺结果,分析穿刺阳性率与针数、体积的关系。结果126例患者确诊为前列腺癌。6、8、10针最大阳性率分别与12针穿刺阳性率比较,差异均有统计学意义。3个不同体积组比较,体积〈40ml组8针与10针阳性率差异无统计学意义,而40.1～60ml组8针与10针,〉60ml组10针与12针阳性率差异均有统计学意义。结论根据前列腺体积和超声表现制定个体化穿刺方案是可行的,体积〈40ml前列腺采用8针,40.1～60ml采用10针和〉60ml采用12针穿刺是合适的。     

前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E在外周血的定量表达

【目的】检测分析前列腺特异性膜抗原（PSMA）及其新型剪接变异体（PSM．E）在前列腺癌（PCA）及良性前列腺增生（BPH）患者外周血中的表达,探讨其意义。【方法】通过实时荧光定量PCR方法对PSM—E、PSMA在前列腺癌（53例）和前列腺增生（79例）两组患者外周血中定量表达,分析其差异。【结果】PSM．E相对表达量在PCA组（-8．22±0．32）高于BPH组（-9．99±0．41）,P〈0．001;PSMA相对表达量在PCA组（-12．514-0．31）高于BPH组（-13．72±0．48）,差异有统计学意义,P〈0．05;PCA组和BPH组内PSMA与PSM—E相对表达量有相关性（r=0．36,P〈0．05;r=0．65,P〈0．01）,与血清PSA均不相关。【结论】外周血定量检测PSM—E表达差异可用于区分良性前列腺增生和前列腺癌;与PSMA相比PSM．E表达量更高,其检测的灵敏度更高,PSM—E诊断前列腺癌的敏感性和特异性更好。     

前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E 在外周血的定量表达

 【目的】 检测分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)及其新型剪接变异体(PSM-E)在前列腺癌(PCA)及良性前列腺增生(BPH)患者外周血中的表达,探讨其意义&#65377; 【方法】 通过实时荧光定量PCR方法对PSM-E&#65380;PSMA在前列腺癌(53例)和前列腺增生(79例)两组患者外周血中定量表达,分析其差异&#65377; 【结果】 PSM-E相对表达量在PCA组(-8.22 ± 0.32)高于BPH组(-9.99 ± 0.41),P < 0.001;PSMA相对表达量在PCA组(-12.51 ± 0.31)高于BPH组(-13.72 ± 0.48),差异有统计学意义,P < 0.05; PCA组和BPH组内PSMA与PSM-E相对表达量有相关性(r = 0.36,P < 0.05; r = 0.65,P < 0.01),与血清PSA均不相关&#65377; 【结论】 外周血定量检测PSM-E表达差异可用于区分良性前列腺增生和前列腺癌;与PSMA相比PSM-E表达量更高,其检测的灵敏度更高,PSM-E诊断前列腺癌的敏感性和特异性更好&#65377;     

大蒜素诱导人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的研究

【目的】探讨大蒜素对人膀胱癌细胞株BIU87细胞凋亡的影响。【方法】MTT法检测大蒜素对BIU87细胞生长的影响：倒置显微镜、TUNEL法观察细胞形态变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期的变化；半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2，bax，caspase-3 mRNA表达的变化，比色法测定caspase-3活性变化。【结果】大蒜素能明显抑制BIU87细胞的生长，与大蒜素的浓度和作用时间有关，5mg／L大蒜素作用5d可以杀死50％以上的细胞；可诱导BIU87细胞凋亡，细胞周期阻滞在S-和G2期；凋亡相关基因bcl-2表达减少，bax无明显变化，caspase-3表达及活性增高。【结论】诱导细胞凋亡是大蒜素发挥抗瘤效果的一种重要机制；凋亡发生可能与细胞周期阻滞、bcl-2和caspase-3基因表达及活性变化有关。     

新型前列腺特异膜抗原剪接变异体的发现及临床意义初步探讨

目的:探讨前列腺特异膜抗原（PSMA）及其与前列腺癌发生、发展的关系，寻求更为特异的前列腺癌诊断和治疗的靶点。 方法:采用RT-PCR和DNA测序技术，克隆PSMA基因新的剪接变异体，并根据其序列信息，设计特异性引物，检测其在不同病变前列腺组织及不同组织来源肿瘤细胞中的表达。 结果:发现了一种新的PSMA剪接变异体，其在前列腺癌、前列腺增生及正常前列腺组织中的表达率分别为92.6％、78.8％及10.0％，且特异表达于前列腺癌LNCaP细胞株，而在前列腺癌PC3细胞株、膀胱癌、肾癌、肝癌细胞株中均不表达。 结论:发现了一种新型PSMA剪接变异体（定名为PSMA5），并证实该变异体与前列腺癌及前列腺增生有明显相关性，为研究前列腺癌的发生机制和寻求前列腺癌特异性诊治靶点提供了新的线索。     

抗前列腺特异性膜抗原膜外区多肽单克隆抗体的研制及初步应用

目的建立前列腺特异性膜抗原（PSMA）膜外区多肽杂交瘤细胞株，并对其分泌的PSMA单克隆抗体进行初步鉴定，为PSMA的功能研究和人源化抗体的制备奠定基础，以求进一步用于前列腺癌的诊断和治疗。方法使用人工合成多肽免疫BABL／c小鼠，采用PEG融合技术建立杂交瘤细胞株，制备单克隆抗体。通过免疫荧光法、酶联免疫吸附法及斑点金标法确定单克隆抗体的交叉反应性、亲和力及免疫球蛋白的类型和亚类。结果获得两株可稳定分泌PSMA单克隆抗体的杂交瘤细胞，4F4为IsG1类，1F1为IgC3类。两株单抗均能识别LNCap细胞表达的PSMA蛋白，与不表达PSMA的PC-3、SP2／0等细胞无交叉反应。杂交瘤细胞株1F1培养上清效价为1：40。腹水效价为1：6400；而杂交瘤细胞株4F4培养上清效价为1：80。腹水效价为1：8000。结论成功地制备出两株抗PSMA单克隆抗体，均具有良好的特异性和亲和力，为进一步建立免疫分析方法。进行PSMA相关研究奠定了基础。     

RNAi沉默PSMA基因对前列腺癌LNCaP细胞生物学行为的影响

目的：构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体，探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用。方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链，退火形成双链，连接入含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的pSilencer 2.1-U6-neo真核表达载体，双酶切及测序鉴定。使用脂质体转染的方法将重组质粒导入LNCaP细胞，G418筛选后RT-PCR、Western blotting检测其对PSMA基因干扰作用，并观察对LNCaP细胞生物学行为的影响。结果:经酶切及测序鉴定，成功构建shRNA真核表达载体p-shRNA1,2,3转染LNCaP后，对细胞PSMA mRNA表达抑制率分别为33.15%、9.26%、41.97%，Western blotting结果显示对PSMA蛋白表达的抑制率分别为26.26%、6.47%、40.69%。选择抑制效率较高的p-shRNA3进行体外生长及侵袭力实验，发现干扰后对LNCaP细胞侵袭力增强, 但是对细胞生长影响不大。结论:成功构建了人PSMA基因的RNAi的真核表达载体，并在LNCaP细胞中有效地发挥了对PSMA基因表达的干扰作用，初步发现PSMA在前列腺癌的侵袭中起负向调节作用，为进一步研究PSMA的生物学功能，探索前列腺癌的发病机制奠定一定的实验基础。     

腹腔镜与开放手术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤安全性的比较

目的:比较肾上腺嗜铬细胞瘤腹腔镜术与开放手术治疗的安全性,探讨保证和提高腹腔镜手术安全性的方法。方法:使用腹腔镜技术治疗肾上腺嗜铬细胞瘤26例,与同期26例开放手术进行比较。结果:两组手术均获成功,随诊未见复发。结论:有丰富腹腔镜肾上腺瘤的手术经验,在肿瘤体积、手术空间的创建、判断肿瘤的位置、肾上腺血管的处理、暴露和游离肿瘤等几方面遵循一定的原则,选择直径小于3.5 cm的肾上腺嗜铬细胞瘤开展腹腔镜手术的安全性不低于开放手术。     

前列腺特异膜抗原剪接变异体的基因结构和多态性分析

目的:了解PSMA剪接变异体的结构及其多样性，探讨前列腺癌的发生机制。 方法:应用cDNA末端快速扩增（RACE）的方法扩增剪接变异体5和3末端，并进行序列测定，分析前列腺癌组织PSMA剪接变异体的结构及其多样性。 结果:从前列腺癌组织中发现4种新的PSMA剪接变异体，与已往报道的PSMA剪接变异体相比，新发现的变异体在不同位点存在不同程度的插入及缺失。 结论:本研究所发现的新PSMA剪接变异体证实和丰富了PSMA剪接变异体的多样性，为寻求前列腺癌特异性的诊断标志物和治疗靶点提供了新的线索和思路。