胶质瘤干细胞趋化神经干细胞迁移及其机制研究

目的 观察神经干细胞( NSC)向胶质瘤干细胞(GSC)及其分化细胞的迁移能力,探讨其趋化机制。方法 干细胞条件培养U251和3例原代胶质瘤干细胞,以流式细胞术和Western blot对其鉴定;Transwell小室法检测GSC和其分化细胞条件培养液(CM)对NSC迁移的趋化能力;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测CM中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的分泌水平,并以表皮生长因子(EGF)、bFGF为对照分析CM对NSC的化学趋化作用;进一步以Dio和Dil分别标记NSC和GSC,体外混合培养观察NSC向GSC的迁移、以及对肿瘤干细胞球生长的影响。结果 干细胞培养条件下的胶质瘤干细胞球,高表达干细胞标志物Nestin和/或CD133( 11.02％～ 33.55％);分化后干细胞标志物表达下降,分化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达增加(P＜0.05);GSC与其分化细胞比较,分泌高水平的趋化因子VEGF和bFGF(P ＜0.05),并对NSC有高度趋化能力;体外混合接触培养也显示NSC向肿瘤干细胞球的迁移和包绕,并且能够显著抑制肿瘤干细胞球的生长(P＜0.05)。结论 GSC体外可趋化NSC向其迁移,其趋化作用较分化的肿瘤细胞更为显著,并且与其分泌高水平的生长因子有关;向肿瘤干细胞球迁移的NSC可抑制其体外生长。     

CD133剪接变体在脑胶质瘤中的表达研究

目的 判断CD133剪接变体的表达与AC133抗原决定簇的关系.方法 对AC133阳性和阴性胶质瘤细胞中剪接变体的表达进行了对比,并进行了AC133阳性胶质瘤干细胞诱导分化下CD133剪接变体的表达研究.以RT - PCR针对性的扩充CD133 mRNA条件外显子集中序列,并通过DNA测序确定其条件外显子,同时以实时荧光定量PCR进行了条件外显子表达的定量分析.结果 AC133阳性和阴性细胞均表达相同的CD133 mRNA剪接变体,剪接变体的表达与CD133蛋白的亚细胞分布无关联.AC133阳性胶质瘤干细胞诱导分化过程中,含3号条件外显子的剪接变体的表达显著上调(P＜0.05).结论 在脑胶质瘤中,未能证实与AC133抗原决定簇表达呈特异关联的剪接变体,含3号条件外显子的剪接变体表达与胶质瘤细胞的分化表型相关联.     

生理氧环境下CD133分子在脑胶质瘤干细胞的表达

目的通过对生理氧环境下CD133表达的研究,判断脑胶质瘤中CD133mRNA、CD133蛋白以及糖基化CD133即AC133表达与胶质瘤干细胞表型的相关性。方法将CD133阳性胶质瘤干细胞由含20%O2的大气氧环境转换至含1.5%O2的生理氧环境下培养,持续3d。实时荧光定量PCR检测CD133mRNA水平的表达,Western blot检测CD133蛋白水平的表达,流式细胞学检测细胞表面及细胞内AC133的表达,ELISA检测培养液上清中AC133的表达。结果生理氧环境下CD133阳性胶质瘤干细胞NCH421k,NCH441及NCH440细胞表面AC133的表达相对于大气氧环境均显著上调(均P<0.05),其蛋白荧光表达强度分别由(2 381.07±649.76)、(20 787.90±2 200.24)、(406.99±167.99)增加至(7 685.06±1 170.69)、(30 499.43±9 013.76)、(2 692.38±516.67)(n=3)。AC133的上调是转录水平和翻译后水平调控共同作用的结果。结论 AC133相对于CD133mRNA和蛋白更敏感地标记了胶质瘤干细胞。     

DNAH1基因突变引起精子鞭毛多发形态异常的不育患者辅助生殖助孕结局分析

目的探讨DNAH1基因突变引起的精子鞭毛多发形态异常(multiple morphological abnormalities of the sperm flagella, MMAF)不育患者行卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕后的临床结局。方法回顾性队列研究分析2018年2月至2020年1月期间在河南省人民医院生殖中心就诊的39例MMAF不育患者的临床资料和基因检测结果, 12例由DNAH1突变引起的MMAF患者为DNAH1阳性组, 27例未提示DNAH1突变的MMAF患者为DNAH1阴性组, 选择同一时期男女双方年龄匹配进行ICSI助孕治疗的100例精子形态正常的男性不育症患者作为对照组, 观察并分析3组不育夫妇进行辅助生殖助孕的治疗结局。结果 39例MMAF患者均行全外显子组测序检测, 其中12例患者检测到DNAH1基因突变, 分别为10例复合杂合突变和2例纯合突变, 另27例患者未检测到目前已知的引起MMAF的基因突变。3组患者夫妇均行ICSI助孕治疗, DNAH1阳性组、DNAH1阴性组和对照组在获卵数和MI...     

喉大细胞神经内分泌癌1例

原发喉细胞神经内分泌癌是耳鼻咽喉部非常少见的恶性肿瘤,大细胞神经内分泌癌(large cell neuroendocrine carcinoma,LCNEC)是神经内分泌癌的重要亚型,临床上更为罕见。现报告我科收治的1例喉大细胞神经内分泌癌并结合文献复习,讨论其分型、临床表现、治疗及预后。     

癫痫外科治疗新进展

癫痫是危害较大的常见病症 ,约 2 0 %的病人长期药物治疗无效〔1〕,其中部分可经外科治疗缓解。近 2 0年来 ,随着各种检查手段的发展和高科技在临床的运用 ,癫痫的外科治疗取得了长足的进步。癫痫外科治疗的适应证包括药物难治的顽固性癫痫、局灶性癫痫以及引起癫痫症状并可切除的脑病变。手术目的是切除致痫灶 ,阻断癫痫放电的传导途径 ,强化脑的抑制机构和切除病变组织。1　一般外科手术治疗目前治疗局灶性癫痫最基本的方法为病灶切除术。引起癫痫的常见病灶包括肿瘤、ＡＶＭ、外伤后脑膜脑粘连、结核球、寄生虫等 ,通过对这些病灶的切除…     

Effect of thyrotropin-releasing hormone on cerebral free radical reactions following acute brain injury in rabbits

Tｈｅｒｅｉｓｎｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｐｒｉｍａｒｙｃｅｒｅｂｒａｌｌｅｓｉｏｎａｆｔｅｒｃｒａｎｉｏｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｊｕｒｙｙｅｔａｎｄｗｈａｔｃａｎｂｅｄｏｎｅｉｓｔｏｐｒｅｖｅｎｔａｎｄｔｒｅａｔｓｅｃｏｎｄａｒｙｂｒａｉｎｉｎｊｕｒｙ .Ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｅｒｅｂｒａｌｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎｓａｆｔｅｒｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｊｕｒｙｉｓｏｎｅｏｆｔ…     

TRH对兔急性颅脑损伤后早期脑血流的影响

目的 :探讨TRH对急性颅脑损伤后早期脑血流的影响。方法 :采用自由落体打击法致伤家兔 ,致伤力80 0× 80g·cm。 2 2只家兔随机分 2组。TRH治疗组 ,n =10 ,伤后 0 .5h开始静脉注射TRH ,此后每 0 .5h注射 1次 ,至伤后 4h。对照组n =12 ,按上述方法给予等量生理盐水。测量颅内压 (ICP)、脑组织含水量 ,应用经颅多谱勒超声 (TCD)测量舒张期末血流速度 (Vd)和脉动指数 (PI)。结果 :伤后 3h ,TRH治疗组Vd值显著增加 ,PI值降低 (P <0 .0 1) ;给药后ICP递增速度明显减慢 ,伤后 1.5h ,ICP显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;脑组织含水量明显低于对照组(P <0 .0 1)。结论 :TRH能够显著增加颅脑损伤后的脑血流量 ,改善脑血流 ,降低ICP ,减轻脑水肿     

17β-雌二醇联合5-氮胞苷上调前列腺癌22RV1细胞p75NTR表达并促进凋亡的研究

目的 探讨17β-雌二醇(E2)联合DNA去甲基化试剂5-氮胞苷(5-AzaC)对雄激素非依赖性前列腺癌22RV1细胞生长抑制和凋亡的影响及作用机制. 方法 应用17β-E2和/或5-AzaC 处理前列腺癌22RV1细胞,并检测细胞生长抑制率、凋亡率以及雌激素受体2(ESR2)和p75神经生长因子受体(p75NTR)的表达情况. 结果 17β-E2或5-AzaC呈时间及浓度依赖性抑制22RV1细胞增殖,17β-E2和5-AzaC 48 h IC50分别是0.2 μmol/L和4.0 μmol/L.17β-E2(0.2 μmol/L)+5-AzaC(4.0 μmol/L)对22RV1细胞的增殖抑制及凋亡表现出协同作用,17β-E2或5-AzaC均能上调ESR2和p75NTR的mRNA及蛋白的表达,且联合应用时效果更明显. 结论 联合应用 17β-E2和5-AzaC上调ESR2和p75NTR的表达可能是雄激素非依赖性前列腺癌治疗的一个潜在的治疗策略.