肾病综合征患儿肾活检组织miRNA检测及意义

目的分析肾病综合征患儿肾活检组织miRNA的表达水平,并探讨其作为区分肾病病理亚型潜在标志物的可能性。方法收集肾病综合征患儿肾组织活检标本41例,包括系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)22例、微小病变(MCD)8例和毛细血管内增生性肾小球肾炎(ECPGN)11例,以8例无肾功能不全的成人肾组织为对照组。RT-q PCR检测各组肾组织中miR-191、miR-151-3p、miR-150、miR-19b和miR-30a-5p的表达水平,并分析其与肾功能相关临床指标的相关性。结果与正常肾组织相比,肾病综合征患儿肾组织中miR-191明显上调(P0.01),miR-151-3p明显下调(P0.01)。此外,MCD组miR-150表达水平明显低于对照组、Ms PGN组和ECPGN组(P均0.05)。miRNA在肾组织中的表达与临床血清学指标Ig G、TP和Cr均呈正相关,与TC呈负相关(P均0.05)。结论 miRNA在肾病综合征患儿肾组织中的表达与病理分型有关,miR-150具有潜在区分肾病患儿MCD型与其他亚型的鉴别诊断价值。     

通过参加美国病理学家学会能力验证活动提高实验室寄生虫检验水平

目的通过参加美国病理学家学会(College of American Pathologists,CAP)能力验证(proficiency testing,PT)活动,评价临床实验室寄生虫检验水平并改进检验质量。方法将CAP寄生虫PT标本按常规标本分析,在10个工作日内通过互联网向CAP报送结果,根据回报结果分析临床实验室寄生虫检验水平。结果 2011至2015年75份PT标本中5份鉴定错误,错误率为6.3%;15份因未能获得80%一致的结果,CAP未给予评价结果。结论临床实验室寄生虫检验水平有待提高。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在CIK细胞诱导中的表达及其功能

目的探讨肿瘤患者自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)诱导过程中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及其功能。方法应用血细胞分离机采集22例肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),诱导培养CIK细胞,用流式细胞仪动态监测其CD4~+CD25~+Foxp3~+表型,并分析Tregs细胞负性调控分子转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)和IL-10的表达水平,采用细胞增殖抑制试验测定Tregs细胞免疫学功能。结果诱导的CIK细胞中存在CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs,其表达量分别为第1天(0.30±0.15)%、第3天(4.48±1.72)%、第5天(3.83±2.12)%、第9天(2.37±1.17)%、第11天(1.65±0.99)%、第14天(1.04±0.76)%。诱导第14天时的Tregs细胞免疫调控负性分子TGF-β1的表达水平为(97.2±2.1)%、CTLA-4为(96.2±3.5)%、IL-10为(4.2±2.3)%。细胞增殖抑制试验中空白对照组、条件对照组以及实验组的增殖细胞表达量分别为(8.55±2.38)%、(42.66±7.32)%、(57.04±7.49)%。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs细胞可作为潜在的CIK细胞质量评价指标。     

结核菌素抗体对儿童结核病的诊断价值

目的评价体液结核菌素(PPD)抗体在小儿结核病中的诊断价值。方法回顾性分析126例行PPD检查的住院患儿,其中确诊结核病22例。利用临床流行病学方法分别计算体液PPD抗体检测对结核病的特异性、敏感性、似然比、预测值及不同患病率下的验后概率。结果体液PPD抗体检测对小儿结核病的敏感性和特异性分别为45．45％和 91．35％,阳性和阴性似然比分别为5．25和0．597,阳性预测值为52．63％,阴性预测值为88．79％。患病率为15％时,验后概率为48．09％。结论体液PPD检测对小儿结核病的诊断价值有限,临床医师应谨慎对待体液 PPD检测阳性结果,其诊断价值与所处医院患儿结核病患病率有关。     

诃子HPLC指纹图谱及模式识别研究

目的 研究诃子的质量控制方法。方法 采用高效液相色谱建立诃子药材的HPLC指纹图谱,收集了12批样品进行测定,并使用主成分分析对指纹图谱进行了模式识别研究。采用HPLC-MS技术对色谱峰进行了初步归属。结果 通过主成分分析可知,诃黎勒酸为其中比较重要的指标。结论 本方法为诃子质量控制及综合评价奠定了基础。     

重视上市后药物安全性评价

近年来,注射用中药提取物的不良反应及儿童用药的安全性问题引起社会各界的关注。药物作为临床医生的重要治疗手段之一,除重视疗效,也更应关注药物的安全性。20世纪50年代,临床因发现氯霉素可引发再生障碍性贫血引起了人们对药物不良反应的重视。1961年,曾给人类带来灾难的＂沙立度胺（反应停）事件＂警醒了WHO和各国政府须加强对临床应用药物的安全性进行监测。     

长链多不饱和脂肪酸与足月儿智能和精神运动发育关系的Meta分析

目的对添加长链多不饱和脂肪酸（LCPUFAs）配方奶喂养足月儿的智能和精神运动发育进行评价。方法使用相关的检索词检索Cochrane图书馆、PubMed、EMBASE、中国生物文献数据库和中文科技期刊全文数据库,获取添加LCPUFAs配方奶喂养的相关RCT文献,由2名评价者进行资料提取和文献质量评价,对同质资料运用RevMan4．3．2软件进行Meta分析。结果共6项研究（n=894）符合纳入标准进入Meta分析。根据随机方法、分配隐藏、盲法和随访情况评分,文献质量A级5篇,B级1篇。按年龄分为12月龄和18月龄亚组。Meta分析结果显示：①对智力发育指数的影响：12月龄亚组加权均数差值（WMD）：-1．66（95％CI：-4．09～0．76,P=0．18）,18月龄亚组WMD=-0．70（95％CI：-2．90～1．51,P=0．54）,两亚组合并分析,合并WMD=-1．13（95％CI：-2．76～0．50,P=0．17）;②对精神运动发育指数的影响：12月龄亚组WMD=-1．14（95％CI：-4．39～2．12,P=0．49）,18月龄亚组WMD=0．70（95％CI：-0．88～2．27,P=0．39）,两亚组合并分析：合并WMD=0．35（95％CI：-1．07～1．77,P=0．63）。提示添加LCPUFAs配方奶喂养足月儿的智力发育指数和精神运动发育指数与未添加LCPUFAs配方奶组的差异均无统计学意义。结论现有的证据显示,添加LCPUFAs的配方奶对足月儿智能及精神运动发育无积极或消极影响。     

重组共表达载体pSNAV2.0 HSV1tkIREShIL1Ra的构建及其在滑膜细胞中的表达

   目的引入内部核糖体进入位点（IRES）,构建HSV1 tk与hIL 1Ra双基因共表达AAV重组载体并检测其在滑膜细胞中的表达。方法PCR扩增HSV1 tk、IRES及hIL 1Ra基因片段,分别与pMD18 T simple载体连接,测序后,hIL 1Ra与HSV1 tk先后插入pMD IRES,构建重组质粒pMD HSV1 tk IRES hIL 1Ra,酶切出HSV1 tk IRES hIL 1Ra片段,克隆至AAV载体质粒pSNAV2.0上,构建成重组共表达质粒pSNAV2.0 HSV1 tk IRES hIL 1Ra,酶切鉴定后,用脂质体转染上述质粒至原代骨关节炎（OA）滑膜细胞,RT PCR法鉴定共表达质粒在滑膜细胞中的表达。结果酶切鉴定证实重组共表达质粒构建正确;RT PCR检测到转染后的OA滑膜细胞中表达HSV1 tk与hIL 1Ra。结论成功构建了重组共表达质粒pSNAV2.0 HSV1 tk IRES hIL 1Ra;重组质粒转染OA滑膜细胞后,能表达HSV1 tk与hIL 1Ra。这为OA的基因治疗研究提供了理论依据。     

手足口病的研究进展

手足口病（hand foot and mouth disease,HFMD）是由肠道病毒感染导致的临床症候群,患病人群以婴幼儿为主,大多数临床症状轻微,主要表现出发热和手、足、口腔等部位皮疹或疱疹等症状,预后良好。个别重症HFMD患儿病情进展快,死亡率高。     

爆发性宋内氏痢疾杆菌型食物中毒的流行病学与临床特征分析

目的探讨爆发性宋内氏痢疾杆菌致食物中毒大便培养阳性患儿的临床与流行病学特征。方法对245例住院患儿依照《全国细菌性痢疾监测方案》进行病原学、流行病学、临床表现、细菌学检查、毒力基因鉴定结果、药敏试验分析。结果从食堂凉拌肉标本以及患儿大便标本中均培养出宋内氏痢疾杆菌,经鉴定均含有ipa毒力基因,药敏结果显示对第三代头孢菌素敏感。此次暴发性起病急进展快,有93．1％的患儿在初次暴露后2—3天内发病,无死亡病例。结论宋内氏痢疾杆菌是本次爆发流行的病原菌,传染源是变质的凉拌菜,传播途径是直接进食凉拌菜,没有第二代患者的产生,但是有患者的大便培养由阴性转为阳性。