科学评估与指导儿童疫苗的预防接种

【摘要】 疫苗是儿童健康预防保健的核心，也是过去半个世纪公共卫生领域取得的最突出的成就之一。我国实施儿童国家免疫规划以来，不断扩大疫苗免疫覆盖服务范围，取得了举世瞩目的成就。经过三十载的发展，单一的预防保健门诊体系已不能满足多层次多种需求的国内儿童疫苗接种现况。探索多学科、多部门协作特殊群体疫苗接种解决之道，开展我国自己的疫苗免疫研究，包含特殊人群疫苗预防疾病的发病情况，预防接种与成本效益分析是今后努力的方向。本文就评估和指导儿童疫苗预防接种作一述评。     

宫颈癌根治术后下肢淋巴水肿患者自我护理审查指标的制定及障碍因素分析

目的 根据宫颈癌根治术后下肢淋巴水肿自我护理的最佳证据，制定审查指标，并分析障碍因素和促进因素，为促进证据的临床转化提供参考。方法 总结宫颈癌根治术后下肢淋巴水肿自我护理的21条最佳证据，在此基础上确定审查指标、审查方法，并进行障碍和促进因素分析。结果 共制定15条质量审查指标，其中6条审查指标执行率低于60%，障碍因素主要为缺乏规范化管理流程、证据应用配合度不高、健康教育落实不到位、延续护理服务有待提升、自我护理重要性认知不足等。结论 临床科室应用证据时，需要结合促进因素及障碍因素、患者意愿及偏好等有针对性地采取措施，利于最佳证据的临床实践。     

磁性纳米颗粒Fe34@SiO2的制备及在全血DNA提取中的应用

摘要：目的：自制Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒并评价在全血样本中DNA提取效果,进一步研究开发磁珠法检测HBV DNA的技术。 方法：采用溶剂热法自制Fe₃₄磁性纳米颗粒,并用表面化学修饰法制备Fe₃₄@SiO₂磁性复合颗粒;利用该颗粒经吸附、洗涤、洗脱等步骤提取全血样本中DNA,并通过电泳、PCR扩增等传统技术检测DNA提取效果,与煮沸法提取血清DNA样本的效果进行对比。 结果：成功制备出直径约550 nm的Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒,该颗粒分散均匀;自制的磁性纳米颗粒可用于全血DNA提取与纯化,实验操作简便。自制磁性纳米颗粒提取全血DNA浓度为150.56 ng/μL,纯度为1.53;该提取方法与传统煮沸裂解法对96份样本进行对照研究,证实其灵敏度有较大提高。 结论：利用自制的Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒和合适的缓冲液体系,可成功地提取纯度较高的DNA,通过PCR扩增及对比实验表明,该磁性纳米颗粒及其提取工艺经优化后,可用于传染病的体外分子诊断研究。     

补充维生素A对儿童感染性疾病发病率与死亡率的影响

目的了解补充维生素A(维A)对儿童感染性疾病的发病率和死亡率的影响.方法计算机检索Cochrane Library(2004年第1期)、MEDLINE(1966～2004.3)、The PedsCCM Evidence-Based Journal Club(1992～2002),收集补充维A与儿童感染性疾病的发病率与死亡率的系统评价和随机对照试验.结果共获得107篇文献,从中筛选出相关系统评价或随机对照试验13篇.所获证据显示,研究对象的基础营养状况与研究结果密切相关.补充维A能降低维A缺乏儿童腹泻的发病率和麻疹的死亡率,而补充维A对儿童的呼吸道感染无影响,对营养充足的儿童补充大剂量维A反而使腹泻和呼吸道感染的发病率增加.结论儿童的基础营养状况与一些感染性疾病的发病率和死亡率相关,儿童补充维A前应了解其营养状况和血清维A水平.     

骨折后深静脉血栓形成患者的内源性抗凝能力评价

目的观察骨折后下肢深静脉血栓形成(DVT)患者的内源性抗凝能力及其在DVT形成中的作用。方法选择北京积水潭医院骨折后下肢DVT患者95例作为DVT组,体检健康者100例作为健康人对照组。收集患者术后第3天枸橼酸钠抗凝血浆标本,检测纤维蛋白降解产物(FDP)和D-二聚体(DD);用Thrombopath发色底物显色法检测内源性抗凝能力指标Protac凝血抑制率(PICI);收集患者血清检测高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。结果 DVT组FDP、DD均高于健康人对照组,差异均有统计学意义(P均0.01),DVT组PICI(%)低于健康人对照组(82.8±7.2 vs 87.8±3.6,P0.01);DVT组≥65岁患者较65岁患者PICI下降约4.8%(P0.05);当PICI的cut-off值为84.2%时,卡方检验显示,DVT与健康人对照组PICI阳性率差异有统计学意义(P0.01);相关性分析显示PICI与FDP、DD呈负相关,与HDL-C呈正相关(r分别为-0.318、-0.336和0.284,P均0.01);Logistic回归分析显示PICI是静脉血栓的危险因素,OR值为1.243(P0.01)。结论骨折后血栓患者的内源性抗凝能力降低。     

人乳头瘤病毒16和18型核酸检测用质控品制备及其应用

目的制备可模拟真实临床标本的HPV-16和HPV-18核酸检测用质控品,并用于上海地区临床实验室的室间质量评价。方法分别选择整合有HPV-16和HPV-18 L1基因的宫颈癌细胞系(Siha和Hela)进行培养,收集细胞后用HPV国际标准品定值并分装,对其均匀性和稳定性进行评价,然后将样本盘发送至参评实验室,对回报结果进行分析评价。结果均匀性评价结果显示质控品间均匀性良好,稳定性评价结果表明质控品检测结果随时间延长无明显趋势变化。参评实验室对高浓度样本的检测符合率较高,低浓度样本的检测符合率较低。对于不分型项目,26%参评实验室由于上报假阴性结果导致出错。对于分型项目,不同检测方法的结果间没有显著差异,样本检测出错主要是因为错检或漏检某一亚型所致。结论制备的核酸检测用质控品的均匀性和稳定性良好,可有效用于临床实验室室间质量评价。质评结果显示上海地区参评实验室HPV核酸检测质量整体较好,个别实验室检测能力尚需提高。     

低浓度5-氟尿嘧啶对胃癌细胞生物学特性的影响

目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平,平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。结果5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为(28.82±1.25)和(23.95±1.34);低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)处理后,胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强,差异具有统计学意义(P0.05);平板克隆形成实验结果表明,经低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)作用后胃癌细胞的增殖能力变强,形成的克隆数增多,差异有统计学意义(P0.05);但5-FU浓度为2μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱,且克隆形成能力也有下降。结论低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。     

微囊化转心房肽基因细胞分泌心房肽近日节律的体外研究

目的：研究人心房肽(hANP)cDNA转染细胞的微囊化技术中心房肽分泌的近日节律；通过人工调控，改变心房肽分泌的近日节律，达到有效治疗高血压或心力衰竭的目的。方法：将人心房肽基因(cDNA)转染人中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamsterovary，CHO)，然后将细胞包被在聚己内酯管内形成微囊，并检测转基因CHO细胞长时间存活情况和分泌的心房肽。检测微囊化转基因细胞分泌心房肽的生物节律，并用褪黑素进行调整。结果：在培养期间，长度20mm，直径2mm的聚己内酯管内转染CHO细胞在2mL培养基中24h分泌的心房肽水平可达210．3ng／L；心房肽的分泌呈近日节律性变化，日间高，而夜间低；近日节律变化的时相是4：15，用褪黑素处理，近日节律的时相移至7：55。结论：心房肽cDNA转染的CHO细胞包被在聚己内酯管内并能向管外分泌心房肽，将来可能适于植入人体。此项研究为心房肽治疗高血压或心力衰竭提供了一条新途径。     

同位素稀释质谱法在美国CDC-CRMLN计划中的比对结果分析

目的总结并回顾性分析同位素稀释质谱法在美国疾病预防控制中心(CDC)胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)中的比对结果,为我国血脂测定提供质量保证。方法采用我国建立的同位素稀释液相色谱串联质谱(ID-LC/MS/MS)测定血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的方法参加CRMLN比对。2016年之前每3个月1次,每次4种样品,测定2批。2016年之后每半年比对1次,每次4种样品,测定2批。每次测定中至少同时测定2个有证标准物质作为质控品。结果 15次TC比对结果显示,本血脂参考实验室(以下简称"本室")平均CV为0.43%,CDC各参加实验室间CV为0.42%,本室与实验室间总体均值的偏移为0.22%,与CDC靶值的偏移为0.58%。15次TG比对结果显示,本室平均CV为0.62%,本室测定TG的结果与实验室间均值的偏移为-0.98%,与CDC靶值的偏移为-0.80%。TC和TG各60个比对结果中,98%(59/60)的TC测定CV满足CDC的精密度要求,70%(42/60)的测定满足TC准确度要求(TC:CV≤1%,偏移≤1%);92%(55/60)的TG测定准确度满足CDC的要求(TG:偏移≤2.55%)。结论 ID-LC/MS/MS测定血清TC和TG的方法在CRMLN比对中数据良好,与CDC及各网络实验室测定结果一致,有望在我国血脂标准化中发挥重要作用并为参考测量比对计划提供经验和技术支持。     

美国CLSI M52商品化微生物鉴定和药敏试验系统的验证后质量保证

全面的质量保证活动有助于确保系统性能,提供高质量的检测结果。尽管商品化微生物鉴定和药敏试验系统的验证过程所建立的系统性能参数令人满意,但实验室还需执行质量保证活动以保证系统在一段时间内的性能。美国临床和实验室标准化协会(CLSI)文件M52为商品化微生物鉴定及药敏试验系统的验证后质量保证活动提供了指导性的建议,保证系统可接受水平的质量保证活动包括:不间断的质控、能力验证、人员培训及仪器软件维护、异常结果复查,以及与临床疗效相关的结果及意见调查。现介绍以上内容,为制定商品化微生物鉴定及药敏试验系统验证后质量保证计划提供一些参考。