糖尿病大鼠肾小管P选择素和MCP-1的表达及调节机制探讨

目的:观察糖尿病大鼠肾小管p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、NF-κB、Ⅰ-κB、P选择素和MCP-1表达的动态变化,探讨相互间关系及在糖尿病性肾病(DN)发生发展中的作用.方法:链佐星(链脲佐菌素)诱导大鼠糖尿病,并随机分为3 d、1周、2周、4周和8周组,每组设鼠龄匹配的正常对照组.免疫组化法检测肾小管P选择素、MCP-1、p38MAPK、NF-κB和纤连蛋白(FN);Western印迹测肾皮质Ⅰ-κB和p38MAPK蛋白;PAS染色,光镜观察肾组织形态;生化法测血糖和尿蛋白.结果:糖尿病3 d组可见肾脏指数大于正常组,出现蛋白尿.糖尿病1周组肾小管p38MAPK、NF-κB、P选择素和MCP-1表达明显增加,糖尿病2周组肾小管间质FN阳性表达增加,并且都随着糖尿病病程发展而增加,而肾皮质Ⅰ-κB蛋白从糖尿病1周开始逐渐减少.糖尿病4周,P选择素和MCP-1表达十分显著,并且与p38MAPK、NF-κB、FN、蛋白尿及肾脏指数呈正相关.结论:p38MAPK和NF-κB可能介导了糖尿病大鼠肾小管P选择素和MCP-1表达上调,并参与DN肾小管-间质病变的发病机制.     

肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1表达和细胞外胶原沉积及中药抗肝纤维化治疗影响

目的 探索中药丹芍化纤胶囊治疗CCl4肝纤维化大鼠对肝组织转化生长因子β1（transfotruing growing factor TGF-β1）、间质胶原蛋白（COL）Ⅰ、Ⅲ表达的影响。方法以CCl4复合因子刺激8周制备Wistar大鼠肝纤维化模型后,予丹芍化纤胶囊治疗8周,收集血、尿及肝组织标本,测定血尿羟脯氨酸（Hyp）、血清谷丙转氨酶（ALT）及透明质酸（HA）;观察肝组织纤维化程度、TGF-β1及COLⅠ、Ⅲ的表达水平。结果模型组、自然恢复组及治疗组动物肝组织出现不同程度肝纤维化病变,TGF-β1和COLⅠ、Ⅲ表达水平升高,其中模型组各指标升高最明显。丹芍化纤胶囊治疗组各项指标虽高于正常对照组,但与模型组比较有明显改善。结论丹芍化纤胶囊可能通过降低肝组织TGF-β1的表达水平,减少细胞外基质中COLⅠ、Ⅲ的沉积,同时通过促进其降解而起到治疗肝纤维化的作用。     

胃癌组织TGF-β1、TGF-βRⅡ、p27^kipl的表达水平及临床意义

目的探讨胃癌组织TGF-βRⅡ及p27kipl表达水平与临床病理因素间的关系。方法采用免疫组化EnVision二步法对胃癌组织、切端胃粘膜组织进行GF-βRⅡ及p27kipl染色,图像分析系统测定癌组织、邻癌粘膜组织及切端粘膜组织的实质细胞数和阳性细胞数,计算阳性细胞比率。结果癌组织TGF-β1表达水平高于切端粘膜组织,p27kipl及GF-βRⅡ的表达水平低于切端粘膜组织。p27kipl与GF-βRⅡ两者间表达水平呈正相关。p27kipl表达水平与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关GF-βRⅡ表达水平与肿瘤的浸润深度相关。结论胃癌组织TGF-βRⅡ、p27kipl表达显著降低,并与胃癌的一些临床病理因素相关;TGF-β1表达增高并可能通过GF-βRⅡ、p27kipl等对肿瘤的生物学行为产生影响,对相邻上皮细胞的恶性转化可能也有促进作用。     

糖尿病大鼠肾小管PKCα和CTGF表达的动态变化

 目的：观察糖尿病大鼠肾小管蛋白激酶Cα（PKCα）、结缔组织生长因子(CTGF)和纤维连接蛋白（FN）表达的动态变化，探讨相互间的关系及其在糖尿病肾病发病中的作用。方法：随机将SD大鼠分为正常对照组(A组)、糖尿病2周组（B组）、糖尿病4周组（C组）、糖尿病8周组（D组）、糖尿病12周组（E组）。用免疫组织化学方法检测CTGF、PKCα、FN的表达；用Western印迹法检测CTGF蛋白表达水平； PAS染色，光镜观察肾组织的形态改变；生化方法测定血糖、血肌酐、甘油三酯、总胆固醇及24 h尿蛋白。 结果：随着糖尿病病程的进展，出现肾小管和间质病变，肾小管表达PKCα和CTGF增多，表达部位一致，与此同步，小管间质FN表达也增加，三者之间呈显著正相关。 12周组大鼠血糖高于其余糖尿病组，血脂和血肌酐明显高于正常对照组；蛋白尿十分显著，并且与CTGF和PKCα呈显著正相关。结论：糖尿病状态促进CTGF分泌增多从而使肾小管间质FN等细胞外基质沉积增多，使肾脏肥大和纤维化，而PKCα参与该过程的信号转导。     

组织蛋白酶C和肿瘤坏死因子α在人冠脉组织中的表达及其与冠心病的相关性研究

目的:检测组织蛋白酶C(CTSC)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在人冠状动脉组织中的表达,并探讨两者在冠心病中的可能作用机制。方法:收集贵州医科大学法医司法鉴定中心2018年10月～2019年12月的52例冠心病死亡案例的冠状动脉作为冠心病组,以同期25例无任何心脏疾病的意外死亡案例作为对照组。通过病理组织学检查冠状动脉管腔狭窄情况和血管内膜斑块形成情况;采用Western blot法检测CTSC和TNF-α的蛋白表达;免疫组织化学染色方法检测CTSC及TNF-α在细胞内的表达及定位。结果:HE染色见对照组冠状动脉内膜光滑平整、无增厚,管腔未见狭窄;冠心病组中血管内膜不规则增厚、粥样硬化斑块形成,中膜明显受压变薄,管腔呈不同程度偏心性狭窄(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,CTSC和TNF-α在冠心病组中的表达显著升高(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,CTSC和TNF-α均在泡沫细胞胞质中表达,且其阳性表达均显著高于对照组(P<0.05)。Pearson积矩相关分析结果显示,CTSC和TNF-α在冠心病中的表达呈正相关(r^...     

人冠状动脉粥样硬化病灶内CD40L水平与病灶结构变化的关系

目的观察人冠状动脉粥样硬化病灶结构变化、CD40L、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,探讨CD40/CD40L信号在人冠状动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法收集不同程度粥样硬化的人冠状动脉血管60例作为实验组,以12例无病变的人冠状动脉为对照组,常规HE染色观察两组人群冠状动脉的组织结构并用图像分析软件检测病灶结构的相关指标,免疫组织化学染色检测CD40L、MMP-9蛋白表达水平,分析CD40L、MMP-9表达水平与动脉硬化病灶结构变化之间的关系。结果发生粥样硬化的冠状动脉CD40L表达均增强,其表达主要分布于斑块肩部和底部的泡沫细胞。同时病灶内MMP-9表达水平增高并与CD40L水平、病灶大小尤其是坏死灶的大小呈正相关,MMP-9表达水平与纤维帽厚度无明显相关性。随着MMP-9水平增高,纤维帽厚度/内膜最大厚度比值降低。结论人冠状动脉粥样硬化病灶内CD40L、MMP-9表达水平明显增强,CD40L可能通过促进MMP-9表达,使血管病灶内细胞外基质分解加强,从而促进病变的进展及坏死灶的扩大,使粥样病灶稳定性下降。     

人冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40、CXCL2、IFN-γ的表达及其与冠心病猝死的关系

目的 探讨YKL-40及其下游炎症信号分子γ干扰素(interferon-γ, IFN-γ)、CXCL2在人冠状动脉粥样硬化斑块内的表达及其与冠状动脉粥样硬化斑块结构、冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)引起猝死的关系。方法 筛选尸检案例库中心脏冠状动脉标本66例，分为3组：CHD组24例、CHD猝死组24例、对照组18例。测量冠状动脉内膜(含病灶)厚度、纤维帽厚度、坏死灶厚度及血管腔狭窄程度4个形态学指标综合评价血管结构；检测冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40及其下游信号分子CXCL2、IFN-γ的表达水平及分布特点；分析冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40表达与冠状动脉粥样硬化斑块结构指标间的相关性，探讨其与SCD的关系。结果 同对照组比较，CHD组和CHD猝死组冠状动脉粥样硬化病灶的内膜厚度和坏死核心增厚、纤维帽变薄、血管狭窄程度增高(P<0.01)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉血管YKL-40、CXCL2及IFN-γ的蛋白表达量明显高于对照组，而CHD猝死组高于CHD组(P<0.01)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉内膜...