糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶Cα表达与肾病发病关系的研究

目的:观察四氧嘧啶诱发的糖尿病大鼠肾小球中蛋白激酶Cα(PKCα)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的动态变化, 探讨3者之间相互关系以及与肾损害之间的关系。方法:将大鼠随机分为正常对照组(A组), 糖尿病1周组(B组), 糖尿病1月组(C组)和糖尿病2月组(D组)。用免疫组化和Western印迹法检查PKCα, TGF-β₁和α-SMA在肾小球的表达情况。光镜观察肾组织的形态改变, 生化法测定大鼠血糖, 血脂, 血尿肌酐以及尿蛋白。结果:糖尿病各组肾小球PKCα和TGF-β₁的表达多于正常组(P<0.05), 糖尿病各组PKCα, TGF-β₁和α-SMA3者间呈正相关, 并且与肾脏病变程度呈正相关。结论:糖尿病早期肾组织PKCα表达持续增加, 可使肾小球滤过率和滤过膜通透性增加, 参与了肾病早期蛋白尿的发生机制, 使TGF-β₁增多并诱导α-SMA的表达, 标志着肾脏固有细胞激活及表型转变和肾脏组织学改变。     

孕哺期至成年前铝暴露对子鼠空间学习记忆能力和海马miR-132转录的影响

[目的]探讨孕哺期至成年前持续铝暴露对子鼠空间学习记忆和海马miR-132转录的影响。[方法]将12只清洁级健康SD孕鼠随机分为3组,每组4只。各组饮水中氯化铝浓度分别为0、600、1 000 mg/L,即对照组、低铝组、高铝组。母鼠从妊娠第0天至子鼠出生第21天染毒。从每组中随机选择8只子鼠(4雌4雄,同一窝别雌雄比为1∶1)延续同组剂量继续染毒至成年(出生第90天),每2周称一次体重,子鼠处死前收集24 h尿液,Morris水迷宫实验检测空间学习记忆能力。处死后光镜观察海马组织的病理变化,采用石墨炉原子吸收法测定尿铝和脑铝含量,用实时荧光定量PCR方法检测海马组织中miR-132转录水平。[结果]与对照组比较,高铝组子鼠出生后0~12周体重均降低(均P0.01)。水迷宫结果显示:与对照组相比,染毒组在第3天和第4天逃避潜伏期延长(均P0.01),高铝组子鼠首次达台时间延长及穿越平台次数减少(P0.05,P0.01)。低铝组、高铝组子鼠尿铝和脑铝水平分别为(11.84±1.03)、(16.32±1.32)μg/L,(12.69±0.43)、(16.61±0.93)μg/g,均高于对照组(均P0.01)。与对照组比较,染毒组海马神经细胞出现核固缩,染色加深,数量减少和排列紊乱变形等病理改变;miR-132在低铝组、高铝组中的相对转录水平分别为1.48±0.35、1.62±0.38,与对照组(1.00±0.12)比较,miR-132在染毒组中转录水平均升高(P0.05,P0.01)。[结论]持续铝暴露损害子鼠的空间学习记忆能力,可能与海马组织中的miR-132转录水平升高有关。     

钙调蛋白在氟中毒大鼠肝组织中的表达

目的探讨钙调蛋白在氟中毒大鼠肝组织中的表达及意义。方法在饮水中加入氟化钠进行大鼠染毒试验,3个月后采用免疫组化技术及RT-PCR技术检测大鼠肝脏中钙调蛋白(CaM)的表达水平。结果与对照组相比,染氟浓度为25mg/L、50mg/L、100mg/L组大鼠肝脏CaM mRNA及蛋白表达水平均增高,并随染氟浓度的增加,表达增强。结论氟可以导致大鼠肝脏CaM mRNA及蛋白表达水平增强。     

人冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40、CXCL2、IFN-γ的表达及其与冠心病猝死的关系

目的 探讨YKL-40及其下游炎症信号分子γ干扰素(interferon-γ, IFN-γ)、CXCL2在人冠状动脉粥样硬化斑块内的表达及其与冠状动脉粥样硬化斑块结构、冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease, CHD)引起猝死的关系。方法 筛选尸检案例库中心脏冠状动脉标本66例,分为3组：CHD组24例、CHD猝死组24例、对照组18例。测量冠状动脉内膜(含病灶)厚度、纤维帽厚度、坏死灶厚度及血管腔狭窄程度4个形态学指标综合评价血管结构;检测冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40及其下游信号分子CXCL2、IFN-γ的表达水平及分布特点;分析冠状动脉粥样硬化斑块内YKL-40表达与冠状动脉粥样硬化斑块结构指标间的相关性,探讨其与SCD的关系。结果 同对照组比较,CHD组和CHD猝死组冠状动脉粥样硬化病灶的内膜厚度和坏死核心增厚、纤维帽变薄、血管狭窄程度增高(P<0.01)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉血管YKL-40、CXCL2及IFN-γ的蛋白表达量明显高于对照组,而CHD猝死组高于CHD组(P<0.01)。CHD组和CHD猝死组冠状动脉内膜...     

人冠状动脉内半乳糖凝集素3水平与斑块稳定性的相关性研究

目的:探讨人冠状动脉粥样斑块内半乳糖凝集素3(galectin-3)的表达水平与斑块结构及稳定性的关系。方法:收集尸检案例的冠状动脉标本84例,其中动脉粥样硬化但非冠心病猝死者22例(A1组),冠心病猝死但不伴有继发病变者20例(A2组),冠心病猝死且伴有继发病变者24例(A3组),无心脏疾病死亡者18例作为正常对照组(control组)。所有冠状动脉行常规HE染色检测内膜厚度、坏死核心厚度、纤维帽厚度和血管狭窄程度;以单核巨噬细胞表面标志物CD68标记病灶内的单核-巨噬细胞并计数,采用免疫组织化学、Western blot及RT-qPCR法检测冠状动脉组织中galectin-3、CD68和基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达,并分析其表达与斑块结构及其稳定性的关系。结果:同正常组比较,病变各组粥样硬化病灶内的内膜和坏死核心增厚,纤维帽变薄,血管狭窄程度增高(P<0.05);病灶内泡沫细胞数量增多(P<0.05);病灶内galectin-3、CD68和MMP-2蛋白及mRNA水平较正常组显著升高,且在A1组、A2组和A3组中呈递增趋势(P<0.05);病灶内galect...     

胃癌组织及邻癌黏膜组织p27kip1表达水平及意义

目的:探讨胃癌及邻癌黏膜组织p27kip1的表达水平及其与临床病理因素的关系.方法:用免疫组织化学EnVision二步法分别检测胃癌组织、邻癌黏膜组织及胃切端黏膜组织p27kip1的表达水平;图像分析仪测定各组织实质细胞数密度、阳性细胞数密度等形态指标并计算阳性细胞比率.结果:胃癌组织及邻癌黏膜组织p27kip1的阳性率、阳性细胞数密度及阳性细胞比率均显著低于切端胃黏膜,而癌组织与邻癌黏膜组织比较各指标差异均无显著性.癌组织p27kip1表达水平与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关,而与胃癌患者的性别、年龄及肿瘤大小无关.结论:胃癌组织p27Kip1水平降低并与癌分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关,可作为胃癌预后判断的指标.同时邻癌胃黏膜p27Kip1水平也降低,这种异常可能对癌扩散和转移也起到一定的作用.     

依那普利和丹芪复方对糖尿病大鼠肾小球MAPK和PKCα途径的影响

目的观察依那普利和中药复方对糖尿病大鼠肾小球丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),蛋白激酶Ca(PKCo),转化生长因子β1(TGFβ1)表达和纤维连接蛋白(FN)沉积的影响。方法Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)和糖尿病组(B、C、D组)。用链脲菌素复制糖尿病模型,B组为糖尿病对照组,C组为糖尿病依那普利组,按2mg／kg．d给药,D组为糖尿病中药组,按1．8g／kg．d中药浸膏给药,持续60天。用免疫组化检测MAPK、PKC．、TGFβ1和FN在肾小球的表达;用生化方法测定大鼠血糖、血脂、血肌酐和尿蛋白;光镜观察肾小球形态。结果糖尿病各组肾小球MAPK、PKc0、TGFβ1和FN的表达明显高于正常对照组,但用药组(C、D组)的表达则低于未用药组(B组)。形态观察显示,C、D组肾小球病变比B组轻。B组血糖与C、D组无明显差异,但血脂、血肌酐和尿蛋白则高于C、D组。结论依那普利和丹芪复方可抑制糖尿病大鼠肾小球MAPK和PKCα信号途径,从而改善肾小球的形态和功能。     

燃煤型氟中毒人群血清氧化应激产物水平比较

目的 通过观察氟中毒病区中人群血清氧化应激产物水平,进一步探讨氟中毒时损伤的发生机制,并为筛选地方性氟中毒早期诊断提供依据。方法 选取贵州省六盘水市陡箐乡氟暴露区165名儿童与成人为实验组,同市花嘎乡非病区90名儿童与成人作为对照组,采集清晨空腹血液、尿液,分别检测尿氟及血清中丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷（8-oHdG）、8-异前列腺素 F 2α（8-iso-PGF 2α）和晚期氧化蛋白产物（AOPPs）水平,分析其与氟斑牙及机体氟荷载的关系。结果 病区成人血清8-oHdG（1.73±0.62）ng/mL、8-iso-PGF2α（256.29±105.95）pg/mL、AOPPs（61.10±27.33）μmol/L,均高于成人对照组（P<0.05）,而在病区组儿童仅8-iso-PGF 2α（181.22±77.24）pg/mL高于对照组（P<0.05）;结合氟斑牙程度的分析显示,血清8-iso-PGF 2α儿童在轻度氟斑牙（184.87±73.14）pg/mL时即明显高于对照组（P<0.05）。结论 氟中毒人群存在脂质、蛋白、DNA多方面损伤,其中脂质损伤发生较早;血清8-iso-PGF 2α能较早反映机体的氧化应激状态,可作为筛选早期氟中毒病例的指标之一。     

组织蛋白酶C和肿瘤坏死因子α在人冠脉组织中的表达及其与冠心病的相关性研究

目的:检测组织蛋白酶C(CTSC)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在人冠状动脉组织中的表达,并探讨两者在冠心病中的可能作用机制。方法:收集贵州医科大学法医司法鉴定中心2018年10月～2019年12月的52例冠心病死亡案例的冠状动脉作为冠心病组,以同期25例无任何心脏疾病的意外死亡案例作为对照组。通过病理组织学检查冠状动脉管腔狭窄情况和血管内膜斑块形成情况;采用Western blot法检测CTSC和TNF-α的蛋白表达;免疫组织化学染色方法检测CTSC及TNF-α在细胞内的表达及定位。结果:HE染色见对照组冠状动脉内膜光滑平整、无增厚,管腔未见狭窄;冠心病组中血管内膜不规则增厚、粥样硬化斑块形成,中膜明显受压变薄,管腔呈不同程度偏心性狭窄(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,CTSC和TNF-α在冠心病组中的表达显著升高(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,CTSC和TNF-α均在泡沫细胞胞质中表达,且其阳性表达均显著高于对照组(P<0.05)。Pearson积矩相关分析结果显示,CTSC和TNF-α在冠心病中的表达呈正相关(r^...     

应激对小鼠心肌Cx43表达及磷酸化水平影响

目的 观察Cx43在应激小鼠心肌中的表达与磷酸化水平,探讨其在应激情况下发生的心源性猝死中的法医学意义。方法 根据文献建立应激小鼠模型和心性猝死小鼠模型;常规苏木素-伊红染色(HE)观察各组小鼠心肌组织病理变化;应用免疫组织化学和图像分析技术检测各组小鼠心肌Cx43表达变化;应用蛋白印迹技术检测各组小鼠心肌Cx43磷酸化水平。结果 应激组小鼠及心性猝死组小鼠心脏出现应激性心肌病相关的病理学改变;与对照组(0.26±0.04)比较,心性猝死组小鼠心肌Cx43表达水平(0.18±0.03)下降且分布紊乱;与对照组(476.28%)比较,应激组、心性猝死组小鼠心肌Cx43磷酸化水平[分别为(432.23%)、(188.69%)]下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 心肌Cx43表达及磷酸化水平对诊断和解释某些猝死案例具有参考意义。