细粒棘球蚴重组蛋白GST诱导小鼠脾细胞增殖及对细胞因子水平的影响

目的探讨细粒棘球蚴重组蛋白GST(rEg.GST)诱导小鼠产生免疫保护力的机制。方法将rEg.GST与弗氏佐剂混合免疫小鼠,腹腔注射原头蚴制备包虫感染模型,分离脾淋巴细胞,用rEg.GST和刀豆蛋白A(ConA)诱导后,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测小鼠脾淋巴细胞的增殖情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果重组蛋白免疫组在rEg.GST及Con A刺激状态下脾淋巴细胞增殖水平均高于佐剂组(P=0.003 0;P0.001)和PBS组(P=0.001 4;P=0.006 1)。与PBS组比较,rEg.GST组在免疫后、感染后的IL-2、IFN-γ、与IL-4的水平均增高(P=0.007 7;P=0.041 9;P=0.014 8);rEg.GST组免疫后与免疫前相比,IL-2、IFN-γ、IL-4与IL-10水平均增高(P=0.001 7;P=0.023 1;P=0.003 1;P=0.021 2);感染后与免疫后相比,IL-4与IL-10水平升高,IL-2水平则呈下降趋势(P=0.009 4;P=0.039 3;P=0.0179)。结论 rEg.GST能够促进脾淋巴细胞的增殖并同时活化辅助性T细胞1型(Th1)与2型(Th2)细胞。     

大肠杆菌动力与侵袭力的关系

目的:比较实验室和医院的大肠杆菌动力大小及与其侵袭力是否有关系。方法:用嗜热菌蛋白酶分离单个小肠上皮细胞,再用大肠杆菌侵袭小肠上皮细胞,计数胞体中所含大肠杆菌个数来反应侵袭力的大小。细菌培养后通过穿刺线运动直径判断细菌动力大小。结果:医院菌实验组平均每个细胞内有11个细菌,实验室菌实验组平均每个细胞内有5个细菌,两组经秩和检验差异有统计学意义(Z=-4.837,P=0.000)。实验室细菌动力强于医院细菌。结论:医院大肠杆菌虽然动力弱但其侵袭力强。     

表达甲型H5N1禽流感病毒结构蛋白的重组痘苗病毒的构建与鉴定

目的  构建表达甲型H5N1禽流感病毒（H5N1 avian influenza A virus,H5N1 AIAV）NIBRG14株结构蛋白的重组痘苗病毒,为研制新型人用流感疫苗奠定基础。方法  通过反转录PCR扩增H5N1 AIAV NIBRG14株的血凝素（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶（neuraminidase,NA）编码基因,并将改造的HA、NA基因克隆至痘苗病毒穿梭质粒 pSCCK。在重组质粒与痘苗病毒天坛株（vaccinia virus Tiantan,VTT）于Vero细胞中发生同源重组后,筛选同时表达HA和NA的重组痘苗病毒（rVTT-HA/NA）,并对其进行鉴定。结果  反转录PCR扩增的HA和NA基因大小约分别为1 700和1 400 bp,与预期相同。DNA测序证实,改造的HA和NA序列正确。对获得的rVTT-HA/NA进行PCR及测序表明,HA和NA基因正确插入VTT。蛋白质印迹显示,rVTT-HA/NA感染的Vero细胞表达的HA和NA能与相应的抗体发生反应。表达的HA具有血凝活性,血凝滴度为1∶32。结论  重组痘苗病毒rVTT-HA/NA可稳定表达H5N1 AIAV NIBRG14株的HA和NA。     

细粒棘球蚴95抗原在真核昆虫表达系统中表达、纯化及免疫原性初步分析

目的 采用真核昆虫表达系统表达细粒棘球蚴95(Eg95)抗原,探讨其免疫原性.方法 从GeneBank 获取Eg95基因序列(序列编号:EU595937.1),合成开放读码框(CDS)全长基因;利用杆状病毒表达系统Bac-to-Bac symtem在昆虫细胞中表达目的基因Eg95,亲和层析纯化,Western blot鉴定;对Balb/c小鼠分别免疫接种重组昆虫表达目的蛋白Eg95(简称eu rEg95)、原核重组表达Eg95(简称pro rEg95)、阴性对照PBS,制备免疫血清,间接法ELISA对各组特异性IgG抗体进行分析.结果 合成Eg95基因CDS全长471 bp,经测序与理论完全一致;Western blot证实目的蛋白通过重组杆状病毒在昆虫细胞内实现可溶性表达;ELISA结果表明:eu rEg95能够诱导产生原头蚴特异性IgG抗体,抗体水平高于pro rEg95组(P＜0.05).结论 利用昆虫杆状病毒表达系统成功表达出具有良好免疫原性的Eg95抗原,为优化细粒棘球蚴疫苗奠定基础.     

眼表分析仪观察人工泪液在抗抑郁药SSRI引起干眼症状前后的应用效果

目的探讨抗抑郁药SSRI引起干眼的病因以及眼表分析仪在人工泪液治疗干眼症状前后的应用价值。方法选取近年来患抑郁症的患者,根据其患病情况分成3类,用眼表分析仪进行眼部检查,然后给予抗抑郁药5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)帕罗西丁(赛乐特)治疗,若变化明显则局部滴用人工泪液(聚乙烯醇滴眼液)并对治疗前后眼部情况进行分析,用眼表分析仪观察患者的眼表情况。结果抗抑郁药SSRI可引起患者局部干眼,用眼表分析仪观察患者的干眼症状明显加重。结论 SSRI引起患者干眼的症状病因探讨以及眼表分析仪在对于干眼症的诊断和研究中有重要意义。     

锁定钢板经皮外固定治疗儿童胫骨骨折

目的：探讨锁定钢板经皮外固定治疗儿童胫骨骨折的效果。方法：回顾2010年7月至2013年2月采用锁定钢板经皮外因定治疗儿童胫骨骨折8例,均为单侧;男6例,女2例;年龄4～10岁,平均7岁。开放性骨折5例按照Gustilo-Anderson分型：Ⅱ型1例,ⅢA型3例,ⅢB型1例;闭合性骨折3例按照AO分型：A3型2例,B2型1例。术后观察骨愈合情况及步态影响,采用Johner-Wruhs评定标准对疗效进行评价。结果：8例患者骨折均愈合,未发生感染。骨折愈合时间3-6个月,平均3．9个月;锁定钢板拆除时间4-7个月,平均4．3个月。7例带架行走后目测走态正常,另l例因胫前肌腱缺失,影响步态。对侧小腿内侧皮肤未见擦伤痕。8例患者获随访,时间6个月～1年,依据Johner-Wmhs疗效评价标准,结果优7例,良1例。结论：锁定钢板经皮外固定操作简便,对于儿童胫骨骨折固定稳定可靠,术后功能恢复好,带钢板行走时步态影响较小,但LCP钢板置钉点固定,要求在安装前完成骨折的复位并确定置钉处有完好的皮肤覆盖。     

氢化可的松琥珀酸钠治疗重症哮喘的疗效观察

目的探讨氢化可的松琥珀酸钠对重症哮喘患者的疗效。方法选取2 0 1 0年1月~2 0 1 2年3月收治的重症哮喘患者5 6例,随机分为对照组和观察组各2 8例,对照组在常规治疗的基础上,加用地塞米松2 0 mg QD静脉滴注,观察组在常规治疗的基础上,加用氢化可的松琥珀酸钠2 0 0 mg Q8 h静脉滴注,所有患者根据病情需要,连续用药4~6 d,对比分析地塞米松与氢化可的松琥珀酸钠对重症哮喘患者的有效率、肺通气功能、血气分析等指标。结果对照组患者的有效率为5 7.1 4%,观察组患者的有效率为7 8.5 7%,两组之间的差异有统计学意义(P0.0 5);对照组和观察组患者经治疗后肺通气功能均明显改善,但观察组患者肺通气功能改善情况较对照组更高,两组之间的差异有统计学意义(P0.0 5);对照组与观察组治疗前后的血气分析各指标经统计学分析,差异有统计学意义(P0.0 5)。结论氢化可的松琥珀酸钠治疗重症哮喘患者缓解率高,适合在临床广泛应用。     

氟伐他汀对大鼠角膜碱烧伤后Smad-3表达的影响

目的探讨氟伐他汀对大鼠角膜碱烧伤后Smad-3表达的影响。方法 24只SD大鼠随机分为3组：生理盐水组、氟伐他汀组和地塞米松组,每组8只,用1mol/L的NaOH烧伤大鼠右眼,生理盐水组、氟伐他汀组和地塞米松组分别以生理盐水、氟伐他汀和1g/L地塞米松点眼。烧伤后1~7 d用裂隙灯观察角膜新生血管的生长情况,HE染色观察角膜组织病理学改变,免疫组化观察Smad-3的表达情况。结果烧伤后第7天,氟伐他汀组的角膜新生血管生长密度显著低于生理盐水组,差异有统计学意义,P〈0.05。组织病理学检查结果提示,氟伐他汀组与生理盐水组相比,新生血管的形成明显减少,管腔小且稀疏,周围炎症细胞浸润明显减少,角膜组织结构明显整齐。免疫组化结果显示氟伐他汀组的Smad-3的表达情况显著降低。结论氟伐他汀能通过下调Smad-3的表达,来减轻大鼠角膜碱烧伤后新生血管的生成。     

髌外侧支持带松解加减压：不破坏髌软骨面的修复治疗

背景：髌骨外侧高压综合征常合并有外侧支持带的紧张和影像学上的髌骨倾斜,CT扫描显示,外侧支持带松解能有效地纠正髌骨外侧倾斜。目的：分析关节镜下髌外侧支持带松解联合关节外髌骨钻孔减压治疗髌骨外侧高压综合征的疗效。方法：对32例髌骨外侧高压综合征患者行关节镜下髌外侧支持带松解加关节外髌骨钻孔减压,采用Lysholm膝关节功能评分评价治疗效果。结果与结论：患者治疗后随访均超过12个月。治疗后1个月所有患者膝关节疼痛明显减轻或消失,1年后26例疼痛基本消失。Lysholm 评分,优20例,良6例,可4例,差2例,优良率83.6%,患者主观满意率为92.8%。说明关节镜下松解髌外侧支持带加关节外髌骨钻孔减压治疗髌骨外侧高压综合征具有创伤小、康复快等优点,在不破坏髌骨软骨面的情况下进行髌骨减压,对髌股关节疼痛伴有髌骨向外侧倾斜且关节软骨退变较轻的病例,疗效良好。