肾癌微卫星不稳定性及其机制的研究

目的 探讨微卫星不稳定性（microsatelite instablility,MSI)在肾细胞癌中的表现及与基因突变的关系。方法 用PCR方法分析34例肾细胞癌MSI表现;应用RT－PCR方法检测5种人类错配修复（mismatch repair,MMR)基因在肾细胞癌和肾癌细胞系mRNA转录水平的表达;用PCR－SSCP技术对15例肾细胞癌标本进行MMR基因hMLH1的19个外显子进行筛选,观察基因突变的情况;用PCR方法检查肾癌组织中TGF－βⅡ型受体（TGF－βRⅡ）基因和BAX基因移码突变的情况。结果 34例肾细胞癌中有15例（44．1％）表现为MSI,并多见于晚期肿瘤;15例表达MSI阳性肾癌标本中,3例hMLH1基因mRNA表达缺失,3例表达明显降低,但在正常对照及PCC949细胞系都表达5种MMR基因;PCR－SSCP筛检结果,15例MSI（＋）细胞中3例显示异常电泳带型;40％（6／15）及27％（4／15）分别见TGF－βRⅡ基因及BAX基因移码突变,但不表现在MSI（－）肾肿瘤及正常细胞中。结论 肾细胞癌MSI与MMR基因表达有关,较高的突变率在肿瘤发生中的作用与MSI有关。     

膀胱移行细胞癌微卫星不稳定性表达及机理探讨

目的 探讨微卫星不稳定性在膀胱移行细胞癌的表达及其作用机制。方法 用PCR方法分析35例膀胱移行细胞癌尿沉渣标本中微卫星不稳定性表达;用RT-PCR方法监测5种人类错配修复基因在膀胱癌细胞系mRNA转录水平的表达;用PCR方法检测膀胱癌细胞系BIU-87中错配修复基因hMLH1的启动子区域出现异常甲基化。结果 35例膀胱癌患者尿沉渣中,有31例（88.6%)可检出微卫星不稳定性表现;5种人的错配修复基因在BIU-87膀胱癌细胞系中有hMLH1和hMSH2表达缺失,而在正常近曲小管细胞系中都有表达;BIU-87细胞错配修复基因hMLH1的启动子区域出现异常甲基化,应用去甲基化剂处理后可检测到hMLH1的启动子区域的表达,再次去除去甲基化剂后叠不能检测hMLH1的启动子区域。结论 微卫星不稳定性与错配修复基因表达有关。甲基化对膀胱癌细胞系BIU-87错配修复基因hMLH1的表达具有调控作用。     

无张力疝修补术治疗腹股沟疝68例报告

目的总结无张力腹股沟疝修补术的经验。方法采用德国贝朗公司提供的补片为68例腹股沟疝患者施行无张力修补术,观察伤口疼痛、术后下床活动时间、住院时间、手术并发症、复发率等情况。结果本组患者全部治愈出院,近期效果良好。术后最早6h、最迟2d下床活动,住院时间平均6d。无切口感染、皮下积液、排异反应、阴囊血肿等手术并发症。4例术后第1d感切口疼痛应用度冷丁后缓解,1例患者于术后2个月复发,另1例患者于3个月后出现同侧股疝。结论人工网片植入无张力腹股沟疝修补术具备复发率明显低、术后恢复快等优点。     

Detection of Fas/APO-1 in six human urogenital malignant cell lines with flow cytometry.

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＦａｓ／ＡＰＯ１ｉｎｓｉｘｈｕｍａｎｕｒｏｇｅｎｉｔａｌｍａｌｉｇｎａｎｔｃｅｌｌｉｎｅｓｗｉｔｈｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙＬｉＨｏｎｇｊｕｎ李宏军，ＹｕＬｉｚｈａｎｇ俞莉章，ＧｕｏＹｉｎｇｌｕ郭应禄，ＤｉｎｇＹｉ丁义ａｎｄＬ...     

99Tcm-抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体在荷人膀胱癌裸鼠的放射免疫显像

目的　研究99Tcm 抗人膀胱癌人 鼠嵌合抗体ch BDI对膀胱癌细胞的体外结合性能、在荷人膀胱癌裸鼠中的体内分布及对肿瘤的靶向定位性能。方法　用改进的Schwarz方法进行99Tcm 标记 ,经SephadexG 5 0柱分离纯化。用纸层析法测定标记率与放化纯 ;用Lindmo的方法测定免疫活性分数 ;用Scatchard作图法求得亲和常数。荷人膀胱癌裸鼠静脉注射99Tcm ch BDI 11.1MBq(30 μg) ,分别于 2、6、2 0及 2 4h行放射免疫显像。用感兴趣区 (ROI)技术获得全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织 (T NT)的放射性比值。 2 4h显像后处死裸鼠 ,测定体内放射性分布 ,计算每克组织百分注射剂量率 (%ID g)及T NT比值。结果　99Tcm ch BDI标记率为 (6 6 .5± 7.3) % ,放化纯 >90 % ,免疫活性分数为 76 % ,亲和常数为 3.5 6× 10 9L mol。荷人膀胱癌裸鼠放射免疫显像结果示 ,静脉注射后 6h肿瘤显影清晰 ,随时间延长更清晰。全身放射性计数随时间延长迅速降低 ,肿瘤放射性计数下降缓慢 ,T NT比值随时间增高。荷瘤裸鼠体内分布结果示 ,静脉注射后 2 4h肿瘤 %ID g为 17.4 ,除肾脏外 ,肿瘤与其他正常组织有很高的T NT比值 ,与脑、肌肉、小肠壁、骨骼及心壁的T NT比值分别为 136 .0、5 5 .1、39.3、2 9.7及 2 7 9。结论　ch BDI具有良     

前列腺癌患者外周血中前列腺特异性膜抗原mRNA的表达

采用巢式ＲＴ ＰＣＲ方法检测 33例前列腺癌 (ＰＣａ)患者外周血中前列腺特异性膜抗原 (ＰＳＭ)ｍＲＮＡ的表达 ,报告如下。材料与方法　 4 3例患者分 2组 :(1)ＰＣａ组 :33例 ,其中Ｂ期 9例 ,Ｃ期 2 0例 ,Ｄ期 4例 ,均经前列腺穿刺病理证实。2 1例接受过黄体生成素释放激素类似物 (ＬＨＲＨ)治疗。 (2 )良性前列腺增生(ＢＰＨ)组 :10例 ,经ＴＵＲＰ术后病理证实。取患者静脉血 5ｍｌ,Ｆｉｃｏｌｌ分离白细胞 ,提取ＲＮＡ ,逆转录ｃＤＮＡ ,巢式ＰＣＲ扩增 ,扩增产物用凝胶电泳观察 ,测序鉴定ＰＣＲ结果。统计学方法采用 χ2 检验 ,χ2 =35 …     

肾及膀胱肿瘤组织中MAGE基因及其产物的表达

目的:观察肿瘤特异性抗原MAGE-1、MAGE-3基因及MAGE-3抗原在肾及膀胱肿瘤组织中的表达状况,以评价这些基因或基因产物作为肾及膀胱肿瘤组织中的免疫学检测和免疫治疗、基因治疗分子标志物的可行性.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法分别测定39例肾及膀胱肿瘤患者癌组织与10例相应的癌旁组织MAGE-1、MAGE-3基因.应用免疫组织化学方法测定121例肾及膀胱肿瘤患者癌组织与10例相应的癌旁组织MAGE-3抗原表达.结果:39例肾及膀胱肿瘤中有23例MAGE-1 mRNA呈阳性表达(59.0%),有22例MAGE-3mRNA呈阳性表达(56.4%),其中肾细胞癌14例中MAGE-1 mRNA及MAGE-3 mRNA阳性表达均为8例.肾盂与膀胱移行细胞癌25例中MAGE-1 mRNA及MAGE-3 mRNA阳性表达分别为15例及14例.同时表达MAGE-1及MAGE-3的肾及膀胱肿瘤为18例(46.2%),所有10例癌旁组织均不表达MAGE-1及MAGE-3.免疫组织化学检测121例肾及膀胱肿瘤中56例MAGE-3抗原表达阳性(46.3%),包括肾细胞癌13例,MAGE-3抗原表达率为30.8%;肾盂与膀胱移行细胞癌108例,MAGE-3抗原表达率为48.1%.10例相应的癌旁组织MAGE-3抗原均不表达.根据Logistic回归检验分析MAGE-3抗原的表达与患者的临床分期及病理分级无明显关系.结论:MAGE基因有可能作为肾及膀胱恶性肿瘤组织免疫学检测的分子标志物,并且具有作为免疫治疗、基因治疗特异性靶位的潜在价值.     

核基质蛋白22检测与尿脱落细胞学检查在膀胱癌诊断中的价值

目的　探讨尿核基质蛋白 2 2 (NMP 2 2 )检测和尿脱落细胞学检查在膀胱移行细胞癌诊断中的价值。　方法　对 15 5例怀疑膀胱癌者进行尿NMP 2 2与尿细胞学检查 ,其中 95例经组织学证实为膀胱移行细胞癌。比较两者诊断膀胱癌的敏感性和特异性。　结果　尿NMP 2 2的敏感性为6 5 .3%、特异性为 70 .0 % ;尿细胞学的敏感性为 4 3.2 %、特异性为 83.3%。NMP 2 2在膀胱癌不同分级和分期中的敏感性优于尿细胞学 (P <0 .0 5 )。　结论　尿NMP 2 2检测在早期诊断膀胱癌方面优于尿细胞学检查 ,可以作为膀胱癌的早期检测指标。     

脂质体介导的聚集素反义寡核苷酸对膀胱癌EJ细胞的作用

目的探讨clusterin对膀胱癌EJ细胞生物学特征的影响. 方法应用脂质体包裹的clusterin反义寡核苷酸转染EJ细胞,阻断其表达,通过3′端末端标记、MTT试验、伊红排斥实验等方法观察clusterin反义基因对EJ细胞增殖、凋亡、坏死等生物学行为的影响. 结果转染clusterin反义寡核苷酸组(反义组)EJ细胞凋亡增加,第5天达峰,凋亡率80%,与转染clusterin正义寡核苷酸组(正义组)比较,差异有显著性意义(P<0.05).反义组细胞死亡率增加,以转染后1～4 d明显(13.8%～33.3%),显著高于相应正义组(P<0.05).反义组细胞增殖活性降低,以转染后第6、7天明显,显著高于相应正义组(P<0.05). 结论 clusterin是重要抗凋亡因子,其表达与膀胱癌细胞的生存、增殖、抗凋亡发展密切相关.     

肾癌差异表达基因克隆的研究

目的 克隆并鉴定肾癌与正常肾之间差异表达的基因。方法 应用抑制性消减杂交技术构建人肾癌组织与正常肾组织差异表达的cDNA消减文库,并从中克隆鉴定出肾癌差异表达的基因。结果 构建成功了高消减效率的人肾癌cDNA消减文库,对其中5个克隆插入的cDNA片段进行测序后经Genbank检索表明,5个片段均为未知新序列,其中GYIZ-RCC18为3个拷贝,提示以上5个cDNA征段可能来自3个新基因。Northern杂交分析显示,GYIZ-RCC18在肾癌组织中有明显表达,而在正常肾组织中无表达,这证明GYIZ-RCC18是肾癌相关的新基因。结论 人肾癌cDNA消减文库的建立为进一步筛选,克隆肾癌特异性表达的新基因奠定了基础。