围术期维持活体部分移植小肠血供的措施

目的：探讨围术期维持移植小肠血液灌注的方法，方法：男，18岁，短肠综合征患者，全麻下接受其父亲供给末段回肠150cm，行活体部分小肠移植，围主期维持出入量平衡，中度等容血液稀释，选用扩血管药，防止血管痉挛，以及抗凝治疗，结果：术的31d脱离肠外营养，至今已术后34mo，未发生移植小肠明显缺血性改变。结论：采用上述方法匀是维持围术期移植小肠血供的重要措施。     

安定对大鼠局灶性脑梗死半影区神经细胞死亡的保护作用

目的　研究安定对光化学诱发脑梗死后细胞死亡的保护作用 .方法　使用光化学诱发的大鼠局灶性脑缺血模型 .采用原位末端标记技术 (TU NEL)检测凋亡细胞 .大鼠脑梗死术后存活 3,6 ,12 ,2 4 ,4 8和 72 h,分别观察梗死灶坏死中心面积和凋亡细胞数目 .术前 2 4 h开始腹腔注射安定 (10mg·kg- 1· 8h- 1 ) ,直到处死动物 .结果　TUNEL 阳性细胞位于坏死中心与正常皮层之间的半影区 .TUNEL 阳性细胞的均数随着梗死后时间的延长逐渐增多 ,2 4 h达到高峰 .在2 4 h时间点 ,安定治疗组梗死坏死中心的平均最大面积和TUNEL阳性细胞均数与对照组相比 ,明显减少 (P<0 .0 0 1) .结论　安定可明显减少成年大鼠局灶性脑梗死后的细胞坏死和凋亡 .该结果可为临床使用安定治疗缺血性脑血管病提供理论依据     

乙型肝炎病毒转基因小鼠体内肝靶向反义RNA抗病毒疗效研究

目的：探讨半乳糖修饰的反义RNA真核表达质粒在乙型肝炎病毒转基因小鼠体内的抗病毒作用。方法：以半乳糖多聚赖氨酸（Gal-PLL)作肝靶向载体，将乙型肝炎病毒基因C区的反义RNA真核表达重组质粒（pCEP4-aC）制备为Gal-PLL－pCEP4-aC。将24只血清HBV DNA、HBsAg阳性的小鼠，随机等分为Gal-PLL－pCEP4-aC治疗组、Gal-PLL-pCEP4对照组和生理盐水阴性对照组，于实验第1天尾静脉分别注射Gal-PLL－pCEP4-aC、Gal-PLL－pCEP4（100μg/只）和等体积的生理盐水，观察治疗前后血清HBV DNA以及HBsAg变化。结果：Gal-PLL－pCEP4-aC治疗组21天时血清HBV－DNA转阴率62．5％（5／8），且7，14，21天时血清HBsAg明显降低；而Gal-PLL－pCEP4组血清HBV DNA转阴1只（1／8），生理盐水组8只均未转阴，两组用药后血清中HBsAg与用药前比较差异性均不明显（P＞0．05）。结论：肝靶向反义RNA能在乙肝基因小鼠体内抑制HBV的复制和抗原表达。     

Inhibition of glucuronidation of benzo(a)pyrene phenols by long-chain fatty acids

Long-chain fatty acids inhibit glucuronidation of benzo(a)pyrene phenols in perfused liver; therefore, this study was designed to investigate interactions of fatty acids with beta-glucuronidase, glucuronosyl transferase, and energy supply. In beta-glucuronidase-deficient C3H/He mice, infusion of oleate (250 microM) increased the release of free benzo(a)pyrene phenols from 14 to 33 nmol/g/h and decreased release of glucuronides into the perfusate from 25 to 17 nmol/g/h. Rates of accumulation of glucuronides in the liver were also diminished from 11 to 4 nmol/g/h after infusion of oleate (250 microM). Fatty acids did not affect the release of benzo(a)pyrene metabolites into bile, and the ratio of free phenol to glucuronide production was increased from 0.57 to 1.30. A similar trend was observed in livers from DBA/2 mice that have beta-glucuronidase. Rates of hydrolysis of benzo(a)pyrene-O-glucuronide were not altered in isolated microsomes by addition of oleoyl coenzyme A (CoA) or octanoyl CoA (10- approximately 100 microM). Thus, we conclude that fatty acids do not alter glucuronidation by acting on beta-glucuronidase. The concentration of cofactors (UDP-glucuronic acid, UDP-glucose, and adenine nucleotides) involved in hepatic conjugation was not altered by infusion of concentrations of oleate (300 microM) that inhibited glucuronidation in perfused livers. When oleate concentrations were increased to 600 microM, UDP-glucuronic acid and UDP-glucose decreased 44 and 49%, respectively, and the ATP:ADP ratio declined concomitantly. Oleoyl CoA inhibited UDP-glucuronosyl transferase noncompetitively (half-maximal inhibition, 10 microM) in microsomes with 3-hydroxy-benzo(a)pyrene or p-nitrophenol as substrate. In contrast, octanoyl CoA was a very poor inhibitor of transferase activity. Inhibition of the transferase by oleoyl CoA was increased markedly by treatment with detergents (Triton X-100), i.e., half-inhibition of glucuronosyl transferase was obtained with about 2 microM oleoyl CoA. Inhibition of UDP-glucuronosyl transferase by oleoyl CoA was also increased in a dose-dependent manner by albumin, possibly due to increasing access of the CoA derivative to the enzyme. Collectively, these data indicate that fatty acids diminish glucuronidation via the formation of acyl CoA compounds that inhibit UDP-glucuronosyl transferase noncompetitively.     

大豆总皂甙对培养心肌细胞自发性搏动与动作电位的影响

培养Wistar大鼠乳鼠的心室肌细胞,向培养基中分别加入浓度为1.56μg/ml至50μg/ml的大豆皂甙,可使心肌细胞群落的自发性搏动呈剂量依赖性抑制。洗脱大豆皂甙或向培养基中再加入10μg/ml肾上腺素均能使自发性搏动恢复。向培养基中加入大豆皂甙5μg/ml使心肌细胞动作电位的波幅、波宽、超射、最大舒张电位、阈电位、最大除极速度等各电参数立即减小。Ca~(2+)80μg/ml能使动作电位的抑制逆转。上述结果表明大豆皂甙对培养的鼠心肌细胞具有钙通道阻滞用。     

肾移植术后肺部感染的诊治

目的：探讨治疗肾移植术后肺部感染的有效方法。方法：对我院1999年至2002年发生的23例肾移植术后肺部感染病人治疗方法和结果总结，结果：发现强调提高病人机体免疫力水平的治疗方法效果明显。结论：肾移植术后肺部感染的主要病因是机体免疫水平的低下，提高机体免疫水平是治疗移植后肺部感染的最重要手段。     

电镜和荧光显微技术在细胞凋亡研究中的应用

目的：探讨荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用。方法：应用拓扑异构酶Ⅱ抑制剂VP-16及化学毒物叠氮钠分别诱导HL-60细胞凋亡和死亡，用透射电镜和经Hoechst 33258染色的荧光显微镜对凋亡及死亡动态观察和定量分析。结果：HL-60细胞在VP16处理后，荧光显微镜下可见核浓缩、染色质凝集、核碎裂等凋亡特征；而叠氮钠诱导的细胞死亡则出现核溶解、核染色质弥散，但无上述改变；两者电镜的观察与荧光显微镜的改变一致；凋亡细胞及坏死细胞荧光显微镜下呈不同的形态特征。对处理的不同时间点细胞的荧光显微镜观察发现：处理后4h核形态开始变化，有核浓缩的细胞比例在处理8h达高峰，然后下降，核碎裂细胞的比例在24h达高峰，约占80％，表明核浓缩发生在核碎裂之前。结论：荧光显微镜技术可明确观察判断细胞凋亡及坏死，并可进行动态及定量分析，是良好的凋亡检测方法。     

心电图短P-R间期观测研究

目的：探讨和鉴别心电图短Ｐ－Ｒ间期的产生原因，为临床诊断、治疗提供依据。方法：检测１１５例受检者的常规导联心电图（ＲＬＥＣＧ）、头胸导联心电图（ＨＣＥＣＧ）、食管导联心电图（ＥＬＥＣＧ），对其中５５例临床可疑心律失常和ＲＬＥＣＧ示短Ｐ－Ｒ间期者行食管心房调搏电生理检查。结果：①Ｐ波出现率和振幅均值比较ＥＬＥＣＧ＞ＨＣＥＣＧ＞ＲＬＥＣＧ（Ｐ＜０．０１），出现率分别为１００％、９５％、９１％。②ＨＣＥＣＧＰ－Ｒ段均值（Ｐ＜０．０１）及变异系数＜ＲＬＥＣＧ。③ＲＬＥＣＧ波幅低、图形多变是产生心电图短Ｐ－Ｒ间期的主要原因。结论：作为无创伤性检查方法，ＨＣＥＣＧ和ＥＬＥＣＧ可以对短Ｐ－Ｒ间期者进行初步筛选，而经食管心房调搏能检测ＥＣＧ短Ｐ－Ｒ间期的电生理特性，对鉴别诊断有肯定价值。     

石密的化学成分研究

从番荔枝科植物石密的茎皮中分离和鉴定了一个氧化阿朴啡类生物碱——石密碱(1)和两个木脂素类化合物:(2R,3R)-2,3-二氢-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-甲基-5-(E)-丙基苯并呋喃(2)和conocarpan(3)。其中石密碱为新化合物,化合物(2)和(3)为从番荔枝科植物中首次分得。     

细菌内快速构建两种用于肝纤维化基因治疗的重组复制缺陷型腺病毒

目的 :在大肠杆菌内快速构建两种分别含有人肝细胞生长因子 (hepatic growth factor,HGF)和非分泌型人尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinase- type plasm inogen activator,u PA) c DNA片段的重组复制缺陷型腺病毒。方法 :分别将人 HGF和 u PA c DNA片段与穿梭载体 p Track- CMV连接 ,线性化后与骨架载体 Ad Easy- 1在大肠杆菌 BJ5 183内同源重组获得腺病毒载体 p Ad HGF和 p Adu PA,经 2 93细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒 Ad HGF和 Adu PA;将 Ad HGF和 Adu PA分别体外感染肝细胞株 L0 2 ,以 Northern印迹法和 Western印迹法检测两种病毒在肝细胞中的表达。 结果 :连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒 p Ad HGF和 p Adu PA;经 2 93细胞包装 ,3d后均观察到绿色荧光蛋白明显表达 ,Cs Cl梯度离心纯化最终分别获得 4× 10 1 0 efu/ m l滴度的重组病毒 Ad HGF和 6× 10 1 0 efu/ ml Adu PA;两种病毒体外感染肝细胞 3d后 ,HGF和u PA表达均明显增加。结论 :细菌内同源重组制备复制缺陷型腺病毒 ,纯化过程简单 ,重组腺病毒在肝细胞中均高效表达 ,为肝细胞移植基因治疗肝纤维化提供了新的手段