rhGLP-1（7-36）联合他克莫司对人肝细胞Akt的作用研究*

目的 观察重组人胰高血糖素样肽-1（7-36）[rhGLP-1（7-36）]联合他克莫司作用于人肝细胞系HL7702细胞系后对Akt表达的影响。方法 选用处于对数生长期的人肝细胞系HL7702,分为4组：对照组、G组、F组及GF组。对照组用等量的培养基处理90?min;G组用含100?nmol/L的rhGLP-1（7-36）培养基处理90 min; F组用含5?mg/L的他克莫司处理90?min;GF组用含100?nmol/L的rhGLP-1（7-36）及5?mg/L的他克莫司处理90?min。Western blotting检测各组Akt蛋白表达水平。结果 各组p-AktThr308相对表达水平差异有统计学意义（P?< 0.05）;G组、F组及GF组p-AktThr308相对表达水平与对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,G组、F组及GF组均升高;各组p-AktSer473相对表达水平差异无统计学意义（P?>0.05）;G组、F组及GF组p-AktSer473相对表达水平与对照组比较,差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 rGLP-1（7-36）联合他克莫司能使Akt蛋白活化,提示GLP-1可能不依赖Akt蛋白改善他克莫司引起的肝脏脂质代谢紊乱。     

乙型丙型肝炎病毒合并感染细胞模型的建立

目的：本文拟利用慢病毒载体,在可感染丙型肝炎病毒（HCV）的Huh7.5.1细胞中过表达人肝细胞乙型肝炎病毒（HBV）受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白（sodium taurocholate cotransporting polypeptide, NTCP）编码基因,建立Huh7.5.1- hNTCP细胞模型,使其可以被HBV、HCV共同感染。方法：使用携带人NTCP编码基因、GFP（green fluorescent protein）基因、嘌呤霉素抗性基因的GV358重组慢病毒载体,以50的感染复数（MOI）感染Huh7.5.1细胞。经过嘌呤霉素筛选获得稳定表达人NTCP基因的Huh7.5.1-hNTCP细胞株,并通过Western-blotting验证NTCP蛋白的表达。使用HepAD38细胞来源的HBV感染Huh7.5.1-hNTCP细胞,通过ELISA及qPCR等方法检测HBV感染后不同时间点HBsAg、HBeAg的表达以及HBV DNA的复制。HBV感染后24小时予以HCV-JFH1感染,检测合并感染状态下HBV DNA以及HCV RNA的复制。结果：Western-blotting 结果表明Huh7.5.1-hNTCP细胞株可稳定表达HBV受体NTCP。HBV感染Huh7.5.1-hNTCP细胞后ELASA、qPCR结果显示：HBsAg、HBeAg、HBV DNA合成逐渐增加,并在第9天达峰。HBV/HCV合并感染Huh7.5.1-hNTCP细胞后,qPCR检测结果显示不同时间点HBV DNA、HCV RNA复制逐渐增加。结论:建立了Huh7.5.1-hNTCP细胞模型,该模型可被HBV/HCV合并感染。     

针刺蝶腭神经节治疗变应性鼻炎的多中心病例系列研究

目的 初步评价针刺蝶腭神经节治疗变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）的临床疗效。方法 采用病例系列研究设计,自2017年4月至2018年6月分别于7个分中心纳入222例过敏性鼻炎患者予针刺蝶腭神经节治疗,各分中心之间纳入患者的基线一致,每周1次,共4次。分别于治疗前、治疗第2、3、4、8周进行鼻炎症状量表（total nasal symptom score,TNSS）和鼻炎伴随症状量表（total nonnasal symptom score,TNNSS）评价,于治疗前、治疗第4、8周进行鼻结膜炎生活质量调查问卷标准版（rhinconjunctivitis quality of life questionnaire,RQLQ）评价。结果 222例患者中有1例失访,纳入统计的有效量表分别为221份TNSS、218份TNNSS、213份RQLQ。患者TNSS量表和TNNSS量表评分自针刺第2周开始持续下降至第8周（治疗结束后4周,观察结束时点）,RQLQ量表评分在第4周或此前即明显降低,并于第8周进一步下降,差异均具有统计学意义。1例患者出现面颊肿胀的轻微不良反应。在8周的观察期内,AR患者的控制率超过80%。结论 初步证明针刺蝶腭神经节治疗AR有效、安全、具备推广的可行性。进一步研究将增加客观指标评价、补充针刺即刻效应观察,细化可能的不良反应种类,延长随访时间,明确不同刺激方式对AR治疗效果的影响,规范针刺方案,优化患者就诊体验。     

同步辐射X线相衬成像对裸鼠胰腺癌的早期诊断

目的 通过建立裸鼠胰腺癌模型,结合磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）,探讨同步辐射X线相衬成像技术对胰腺癌的早期诊断。方法 32只nu/nu雌鼠,采用数字表法随机分为A、B两组：A组（n=24）为人胰腺癌细胞PANC-1胰腺原位移植瘤组,即于胰腺被膜下注射10⁸×2 μL单细胞悬浮液;B组（n=8）为空白对照组,即于胰腺被膜下注射2 μL 0.9%（质量浓度）氯化钠注射液。再根据术后1、2、3、4周处理时间的不同,将A、B两组分为4个亚组,即A1、A2、A3、A4（n=6）和B1、B2、B3、B4（n=2）。术后分别行MRI扫描、肿瘤标本相衬成像及病理学检查。结果 ①A组术后平均成瘤率73%（16/22）,术后4周成瘤率最高,达到100%,成瘤率随观察时间的延长而升高,二者之间存在线性趋势关系（χ_线性趋势²=4.718,P=0.030）;病理组织学检查为胰腺低分化腺癌。②同步辐射X线相衬成像可显示直径为0.5 mm的胰腺原位肿瘤,早期（两周）的灵敏度和特异度达到100%,明显高于MRI扫描（P=0.029）。结论 PANC-1细胞原位移植是建立裸鼠胰腺癌模型的可靠方法;与MRI相比,同步辐射X线相衬成像能发现胰腺癌微小病变,有可能为胰腺癌的早期诊断提供了一种全新的技术手段。     

睡眠功能失调性信念与态度量表中文版的信效度研究

目的 评估睡眠功能失调性信念与态度量表中文版（Dysfunctional Beliefs and Attitudes about Sleep Scale-Chinese Version,DBAS-CV）的心理测量学特征。方法 按照《精神疾病诊断与统计手册》第四版（Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders,DSM-Ⅳ）诊断标准入组原发性失眠者、精神疾病共病失眠者共218例,招募健康被试34例。所有被试均完成睡眠功能失调信念与态度量表（Dysfunctional Beliefs and Attitudes About Sleep Scale,DBAS）、DBAS-16、匹兹堡睡眠质量指数量表（Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI）。其中30名被试在2周后再次进行DBAS量表的评定。结果 探索性因素分析结果显示5个因子是可接受的。修订后量表的总分与DBAS-16、PSQI总分的相关系数分别为0.86、-0.48（均P<0.01）,并具有较好的区分效度（P<0.05）。总量表Cronbach α系数为0.83,各分量表Cronbach α系数为0.42~0.78;总量表重测信度为0.94,各分量表的重测信度为0.76~0.93。结论 修订后的中文版DBAS-CV具有较好的信度和效度,可用于评估失眠人群的功能性失调信念。     

软骨样脂肪瘤1例

正患者,女,28岁,因右前臂内侧软组织肿物2年入院。患者自述2年前无明显诱因出现右前臂内侧软组织肿物,当时肿物大小约4 cm×3 cm×2 cm,肿物呈进行性生长,且生长较慢。患者未予重视,也未行任何治疗。1个月前因右上肢剧烈活动后,出现肿物部位疼痛,疼痛为隐痛,休息后疼痛稍有缓解。现为进一步治疗,至我院就诊。入院查体:右前臂中1/3内侧处肿胀明显,皮肤无黄染、无瘢痕、肤色正常,右前臂内侧局部可触及肌间软组织包块,大小约5 cm×3 cm×2 cm,质韧,边界清晰,活动度较差,无压痛,桡动脉搏动良好,末梢血运良好,无肢体感觉及运动障碍。辅助检查:术前完善各项常规检查,前臂X线片未见骨质异常。超声提示前臂肌层内可见5.0 cm×2.4 cm低回声肿物,边界清,内部回声欠均     

CroweⅡ/Ⅲ型髋关节发育不良继发重度骨关节炎髋臼解剖旋转中心重建方法及效果

目的探讨在全髋关节置换术治疗CroweⅡ/Ⅲ型髋关节发育不良(DDH)继发重度骨关节炎(OA)中准确去除髋臼骨赘及重建人工髋臼解剖旋转中心的方法与效果。方法回顾性分析2011年6月至2013年6月,上海交通大学第九人民医院骨科应用人工全髋关节置换术治疗的31例(36髋)CroweⅡ/Ⅲ型DDH继发重度OA炎患者。病例纳入标准:CroweⅡ/Ⅲ型成人DDH继发终末期OA(TonnisⅣ型),髋关节疼痛影响正常生活方式或工作;排除标准:患侧髋关节有感染史、骨折史及手术史,下肢有感觉障碍及肌力异常。CroweⅡ型25髋,CroweⅢ型11髋。术前应用平片、CT等影像学方法评估髋臼形态及髋臼缘骨赘部位与骨赘量,术中以坐骨结节作为真实髋臼后壁高度的参考标志,准确切除髋臼后缘增生骨赘,以卵圆窝为参考标志确定真臼位置及深度重建臼杯,最后以臼杯前缘为标志切除髋臼前缘残留骨赘。所有患者均应用生物型臼杯,臼杯直径为44~52 mm。术前、术后对术侧髋关节进行Harris髋关节评分(HHS),术后测量假体旋转中心的垂直与水平距离及外展角。SPSS 13.0统计学软件包处理数据,计量资料应用t检验,以P0.05为差异有统计学意义。结果所有患者均未发生血管、神经损伤及髋臼骨折,旋转中心垂直距离、水平距离分别为(22.5±3.2)mm及(29.4±2.6)mm,与解剖旋转中心符合率为86.11%,外展角为(44.3±3.2)°。随访期间未发生髋关节脱位、假体松动、感染等并发症。Harris髋关节评分(HHS)由术前(38±9)分(25~55分)升至术后末次随访(94±3)分(89~100分),差异有统计学意义(t=35.95,P0.05)。结论CroweⅡ/Ⅲ型DDH继发重度OA的髋臼形态发生明显改变,术前应用CT充分评估髋臼形态,术中准确切除骨赘,以卵圆窝为参考标志重建髋臼旋转中心接近解剖旋转中心,可达到满意的临床效果。     

256层螺旋CTA在左锁骨下动脉窃血综合征患者术前评估的价值

目的应用256层CTA技术观测左锁骨下动脉解剖特点,评价CTA对锁骨下动脉窃血综合征(SSS)介入治疗术前评估的应用价值。方法回顾性分析60例经临床确诊的SSS患者(疾病组)及500例无SSS受检者(对照组)左锁骨下动脉CTA资料,测量受检者左锁骨下动脉自主动脉弓的起始角度;评价疾病组左锁骨下动脉斑块的特点、管腔狭窄及闭塞情况。结果所有受检者左锁骨下动脉自主动脉弓的起始角度为:71.98°±8.26°,疾病组左锁骨下动脉起始角度71.98°的比例明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。疾病组左锁骨下动脉管腔闭塞11例(18.33%),闭塞范围为9~24mm;中度狭窄7例(11.67%),重度狭窄42例(70.00%),狭窄长度8~31mm;偏心性斑块33例,环形斑块16例。以DSA为金标准,CTA诊断左锁骨下动脉狭窄、闭塞的敏感度为96.77%,特异度为100%,诊断符合率为96.97%。结论 256层CTA可准确测量左锁骨下动脉的各项解剖数值;对左SSS术前评估具有重要的应用价值。     

小型猪烧伤后早期切痂时机的选择

目的探讨小型猪严重烫伤后最佳切痂的时机。方法制作小型猪35%TBSAⅢ度烫伤模型,随机分两组伤后6h切痂为A组,伤后24h切痂为B组,每组7只。分别于伤前及伤后不同时相点检测两组猪的血液动力学、血液流变学指标的变化及血清中细胞因子含量。结果与B组比较,A组猪血液动力学指标改善明显,心输出量(CO)及右心房压(RAP)伤后48h已恢复伤前水平,分别为(2.23±0.02)L/min、(4.54±0.04)mmHg。两组猪血液流变学指标无统计学意义(P>0.05)。A组伤后1周细胞因子含量均降至伤前水平;B组仍高于伤前水平及A组(P<0.05或001)。结论小型猪大面积严重烧伤后6h切痂安全可行,能有效预防远期并发症。     

烧伤大鼠创面再上皮化过程中表皮角质形成细胞基底膜相关基因的表达

目的　检测烧伤大鼠创面再上皮化过程中表皮角质形成细胞(KCs)基底膜(BM)相关基因的表达。　方法　24只SD大鼠造成背部45cm2 深Ⅱ度烫伤, 按照基因表达检测时间随机分为A组(伤后3d)、B组(伤后10d)、C组(伤后14d)、D组(创面完成再上皮化后),每组6只。伤后3、10、14d取距创缘1cm处皮肤标本,创面完成再上皮化后取创面中心皮肤标本,分别制备KCs悬液。另取6只SD大鼠背部皮肤作为正常对照组。利用基因芯片技术检测各组大鼠创面再上皮化不同阶段KCsBM相关基因的差异性表达。　结果　伤后3d,KCs层粘连蛋白γ1、整合素β8基因表达上调,基因表达数据与正常对照比值分别为2. 068和2. 200。再上皮化过程中(伤后10、14d)层粘连蛋白受体1、整合素β1基因表达上调,β2、β7表达下调,基因表达数据与正常对照的比值分别为2. 472、2. 658、0. 419和0. 462。Ⅳ胶型原α1、α3基因各组均上调,基因表达数据与正常对照的比值为2. 547和2 036。　结论　创面再上皮化过程中整合素β1、层粘连蛋白γ1、层粘连蛋白受体1、Ⅳ型胶原α1、α3基因表达上调,有利于新生皮肤BM的构建和KCs与BM之间形成稳定的连接。