苯丙素苷及其类似物的合成研究

利用葡萄糖6位羟基活性较高的特性, 2-(取代)苯乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷在低温条件下直接与(取代)肉桂酰氯反应,区域选择性地生成6位酰化的葡萄糖苷,利用此方法很方便的得到了13个苯丙素苷类似物,利用1H NMR 和13C NMR方法确证了他们的结构.     

PCR检测慢性胃炎患儿胃液中幽门螺杆菌DNA

目的检测慢性胃炎儿童胃液中幽门螺杆菌DNA，探讨其在临床诊断中的实用价值。方法应用PCR检测胃液中幽门螺旋菌DNA，应用Warthin-Starry银染色检测胃粘膜组织中的幽门螺旋菌。结果胃炎组与非胃炎组比较，敏感性为75.0％，特异性为96．2％，两组有显著性差异（P＜0．01）。PCR与Warthin－Starry银染色比较，PCR优于Warthin—Starry银染色法。结论PCR检测患儿胃液中的幽门螺旋菌DNA，具有敏感、快速、特异、高效等优点，是基因水平上检测幽门螺旋菌一项新技术，用于慢性胃炎的早期诊断，具有较好的实用价值，值得推广应用。     

bcl-xS基因对化疗引起的大肠癌细胞凋亡的调节作用

目的 探讨bcl-xS基因对化疗后大肠癌细胞生物学行为的影响。方法 用基因转染方法进行LoVo细胞bcl-xS基因转染,然后用MTT和ELISA法检测bcl-xS转染细胞对化疗药MMC及5-FU敏感性的影响和作用机制。结果 bcl-xS转染可增强LoVo细胞对化疗药MMC及5-FU的敏感性,与经neo转染的细胞相比有显著差异（P<0.05）。ELISA细胞死亡试剂盒研究发现,LoVo细胞对化疗药敏感性的增加是由于凋亡所致,而且MMC和5-FU对bcl-xS转染细胞凋亡的诱导是对照组neo转染细胞的1~4倍。结论 本研究结果提示了bcl-xS转染途径的靶治疗功用。     

4种细胞因子对K562/S及其耐药细胞株K562/A02积蓄柔红霉素的影响

目的通过检测４种常用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响,评价细胞因子在抗白血病细胞多药耐药性方面的应用前景。方法用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、重组人粒－单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ作用后Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对柔红霉素的积蓄无改变,而ＩＦＮ－α可显著提高耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２细胞内ＤＮＲ浓度,在１５０ｍｉｎ时升高了４.０１倍（Ｐ＜０.０５）。结论小剂量（５００Ｕ／ｍｌ） α－干扰素作用后,多药耐药细胞株 Ｋ５６２／Ａ０２对抗肿瘤药物ＤＮＲ的积蓄作用大大提高,提示ＩＦＮ－α具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用。     

99m Tc-HL91 "hot spot" imaging of mice bearing human carcinoma by gamma camera and the effects of tumor necrosis on imaging

Objective To evaluate the hypoxia-avid agent ^99m Tc-HL91 (^99m Tc labeled 4, 9-diaza-3, 3, 10, 10-tetramethyldodecan-2, 11-dione dioxime) as the tracer of tumor "hot spot" imaging and the influence of tumor necrosis on the image.
Methods After injection of ^99m Tc-HL91, 6 nude mice bearing human breast cancer MCF-7 and 18 nude mice bearing human pancreatic adenocarcinoma were subjected to gamma camera imaging, postmortem analysis, and autoradiography and imaging of tumor sections.
Results The image of tumor was identified 1 hour after injection of ^99m Tc-HL91.Images demonstrated gradually increased ^99m Tc-HL91 uptake in the tumor 1-12 hours after injection (P<0.05-0.001).Six hours after injection, the radioactivity ratios of tumor to thorax and tumor to head were higher than 2.1.Six hours after injection, the radioactivity ratios of tumor to brain, muscle, blood, heart, lung and kidney in pancreatic adenocarcinoma bearing nude mice were 101.0±114.7, 30.0±30.3, 19.9±21.9, 14.4±15.1, 3.71±2.41 and 0.46±0.26, respectively, and the radioactivity ratios in breast cancer MCF-7 bearing nude mice were close to these figures.The radioactivity of non-necrotic tumor was 3.77 times that of necrotic tumor.However, the radioactivity ratios of tumor to liver, intestine and stomach were lower than 1.3. Autoradiographs and images of tumor sections showed that the radioactivity was higher in the region of solid tumor than in the necrotic region.
Conclusion ^99m Tc-HL91 via gamma camera positively identifies regional tumor in nude mice bearing human cancer.^99m Tc-HL91 retention is lower in necrotic tumor than in non-necrotic tumor.The low radioactivity ratio of tumor to abdominal organs limits the application of ^99m Tc-HL 91 in detecting abdominal tumors.      

乙肝核心抗原DNA疫苗的构建及其免疫原性分析

构建ＨＢＶ核心抗原ＤＮＡ疫苗,并探讨基实验动物内的表达及其免疫原性。方法：采用ＰＣＲ法从ＨＢＶ全基因ＤＮＡ中获得核心抗原ＤＮＡ片段,并将其重组到ｐｃＤＮＡ３载体。以此为候选疫苗分别免疫小鼠和树Ｊｕ,并检测其抗ＨＢｃＩｇＧ。结果：构建了乙肝核心抗原候选核酸疫苗ｐｃＤＮＡ３－ＨＢｃ。免疫接种该疫苗后第２周抗ＨＢｃＩｇＧ水平开始升高,小鼠至第９周,树Ｊｕ至第７周升至峰值。结论：构建ｐｃＤＮＡ３－ＨＢＣｄ     

叶黄素酯的生物转化研究

目的对叶黄素酯进行微生物降解,以获得游离态叶黄素。方法采用青霉菌摇瓶发酵转化法,并考察了pH、发酵时间、接种量对转化结果的影响。结果青霉菌在pH值为6.0,接种量为2菌塞,发酵24 h叶黄素酯转化彻底,所得叶黄素纯度为91.6%,延长转化时间使叶黄素纯度增加,但是叶黄素质量浓度降低。结论青霉菌在发酵过程中会产生能转化叶黄素酯为游离态叶黄素的酶,发现制备叶黄素的一种新方法。     

健脾化痰法在针刺治疗中风(风痰阻络型)中的作用及其机理研究

目的:观察健脾化痰法在针刺治疗中风风痰阻络型中的作用,并初步探讨其机理。方法:将中风风痰阻络型患者随机分为观察组和对照组各30例,观察组以健脾化痰合祛风通络法、对照组仅以祛风通络法针刺治疗,各30次后观察疗效及检测血脂情况。结果:治疗后观察组总有效率为86.67%,对照组为73.33%;痰证辨证积分观察组比对照组显著减低;血脂分析,观察组总胆固醇、载脂蛋白B水平比对照组显著减低,高密度脂蛋白比对照组显著升高。结论:健脾化痰法能有效提高针刺治疗中风风痰阻络型的临床疗效,其机理可能与调节脂代谢有关。     

Idoxifene抗氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡的机制

 目的　研究非激素类的雌激素拮抗物Idoxifene与氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡之间的关系,进一步阐明其抗鼠肝纤维化机制。方法　用次氮基三乙酸铁 (ferricnitrilotriacetate ,FeNTA)导致培养的鼠肝细胞处于氧化应激状态 ,在idoxifene存在的条件下培养细胞 ,用流式细胞仪 ,酶联免疫测定法 ,Westernblot及凝胶阻滞实验等方法分别检测凋亡细胞 ,caspase-3活性,Bcl-2蛋白家族的表达及结合物蛋白 1(activatorprotein-1,AP-1)结合活性。结果　Idoxifene能显著抑制氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡。在鼠肝细胞中 ,氧化应激可降低Bcl-2及Bcl-X_L蛋白含量,激活caspase-3与AP-1。Idoxifene与处于氧化应激状态的细胞孵育 12h ,使Bcl-2及Bcl-X_L的蛋白含量分别是仅处于氧化应激状态下的3.01倍及1.68倍,使caspase-3活性下降了36.92%。同时idoxifene显著抑制氧化应激诱导的AP-1与其调控位点的结合活性 ,且此AP-1中的主要成分为c-jun与c-fos。结论　Idox ifene能通过抑制Bcl-2及Bcl-X_L 蛋白含量的下降及caspase-3及AP-1活性 ,抑制氧化应激导致的鼠肝细胞凋亡。     

佛甲草对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的：观察佛甲草对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法：分别采用四氯化碳（CCl4）、α-萘异硫氰酸酯（ANIT）一次性灌胃中毒致小鼠急性肝损伤及黄疸模型，测定血清谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBiL）含量及血清、肝组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）水平和观察肝组织病理变化，分析佛甲草对上述指标的影响。结果：佛甲草能明显降低CCl4中毒性小鼠血清ALT、血清及肝组织中MDA含量（P〈0.01），使SOD，NO水平显著增高（P〈0．01，P〈0．001）；能明显降低ANIT中毒性小鼠血清TBil含量（P〈0．001）；肝脏病理组织学检查表明佛甲草能明显减轻肝细胞的变性和坏死。结论：佛甲草对CCl4和ANIT所致的急性肝损伤有保护作用，其机理可能与抗脂质过氧化及改善肝脏微循环，恢复肝脏功能的作用有关。